大鼠肝肿瘤成模过程中肝组织结构变化

为了解大鼠肝肿瘤成模过程中肝组织结构变化,用二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DENA）灌胃法构建大鼠肝肿瘤模型,按常规方法制备肝组织石蜡切片和镜检.建模第1周大鼠肝脏的肝小叶结构完整,肝细胞排列整齐.从第5周起肝窦扩张,肝细胞变性肿胀并有不同程度的脂肪变性,同时出现炎症细胞浸润.第8周时肝窦充血,肝细胞脂肪变性严重,并出现纤维组织增生和明显的肝细胞增生.第10周时肝小叶结构受到破坏,出现肝细胞增生性结节.第12周时门管区内有不同程度的卵圆细胞增生及结缔组织增生,伴随胆管增生.第16周时肝小叶结构消失,可见典型的假小叶结构,结节内肝细胞异常增生明显,出现“结中结”,病理性核分裂相亦较多.第17周时肝肿瘤形成,且主要是肝细胞癌,癌细胞排列为索状、腺状、实片状.根据上述结果得出如下结论：用二乙基亚硝胺灌胃法构建大鼠肝肿瘤模型方便有效,肝组织结构和病理变化有规律,易于观察分析,值得推广应用.     

大鼠肝纤维化及肝硬化成模过程中肝组织结构变化

为了解大鼠肝纤维化及肝硬化成模过程中肝组织结构变化,用四氯化碳-白酒联合诱导法构建大鼠肝纤维化及肝硬化模型,按常规方法制备肝组织石蜡切片和镜检.建模第1～3周,肝脏的汇管区扩大,出现纤维性增生,肝细胞发生脂肪变性.建模第4～6周,肝脏的汇管区周围形成纤维束.建模第7～9周,纤维束更明显,肝小叶结构紊乱.建模第10～12周,肝小叶结构更加紊乱,出现早期肝硬化迹象.建模第13～15周,肝小叶消失,假小叶出现,肝硬化形成.根据上述结果得出如下结论:皮下注射四氯化碳与口服白酒结合能有效诱导大鼠肝纤维化及肝硬化,肝脏组织结构与病理变化有规律,易于观察分析,值得推广应用.     

Advances in studies on hepatic stem cells

The question whether hepatic stem cells exist or not has been debated for several decades. Current researches confirm that there are hepatic stem cells in the liver. Oval cells, putative bipotential hepatic stem cells, are probably located within canals of Hering, portal tracts or branches of biliary trees. Bone marrow is a potential source of oval cells, indicating that there exists a close relationship between liver and hematopoiesis in adulthood. Hepatic stem cells are able to proliferate in vitro and can be induced to differentiate into hepatocytes. This will provide a promising approach of cell transplantation, tissue engineering and gene therapy for liver diseases. In this review, the evidence of their presence, origin, identification, proliferation in vitro, differentiation by induction, application prospects of hepatic stem cells and future directions for the field are discussed.     

高压氧对运动性疲劳大鼠肝糖原及肝脏形态结构的影响

目的：通过研究高压氧对肝糖原和肝脏形态结构的影响,探讨高压氧消除运动性疲劳的作用机制.方法：4周龄健康雄性SD大鼠30只,随机分为3组：对照组、疲劳模型组、疲劳高压氧暴露组,每组10只.建立大鼠游泳致力竭疲劳模型并通过高压氧暴露进行恢复;8周实验后取每只大鼠两块肝脏组织,其中一块取每只大鼠的肝脏相同部位,光镜观察肝脏组织的病理变化;另一块取肝右叶5g,制备成10％的肝组织匀浆,采用蒽酮法检测肝糖原含量的变化.结果：（1）疲劳高压氧暴露组大鼠游泳时间明显长于疲劳模型组（P＜0.05）.（2）疲劳模型组与对照组比较,肝糖原含量显著降低（P＜0.01）;高压氧暴露组与疲劳模型组比较,肝糖原含量显著增高（P＜0.05）;疲劳高压氧暴露组与对照组比较,肝糖原含量显著降低（P＜0.05）.（3）光镜观察显示：对照组大鼠肝组织结构正常,疲劳模型组大鼠肝细胞肿胀,核变大,细胞间质模糊,中央静脉扩张淤血,汇管区少量淋巴细胞浸润,胞浆疏松,肝窦内枯否细胞增生肥大.疲劳高压氧暴露组大鼠肝细胞核肿胀有所改善,充血现象消失,肝细胞轮廓较为清晰,细胞间质纹理较疲劳组更清晰,汇管区炎症消退.结论：高压氧消除运动性疲劳的部分作用机制,可能是通过调节肝糖原含量、促进血糖的稳定,并改善肝脏的形态结构、缓解肝组织损伤而实现.     

大鼠肝卵圆细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析

按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除（parital hepatectomy,PH）模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心给合免疫磁珠分离方法卵圆细胞（oval cell,OC）.用卵圆细胞标志蛋白OC2和OV6的免疫组织化学方法定性、定位再生肝（regenerating liver,RL）、分散的肝脏细胞及分离的卵圆细胞,用RT-PCR定量卵圆细胞的OC2和OV6 mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量卵圆细胞的OC2和OV6蛋白.初步证实分离的肝卵圆细胞中,OC2和OV6阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的肝卵圆细胞的OC2和OV6 mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离肝卵圆细胞方法具有收率和纯度高、活性好等优点,值得采用.     

在体大鼠肝细胞内酸性磷酸酶和单胺氧化酶的超声生物效应

用频率为1.06MHz,强度为30W/cm~2的连续聚焦超声直接辐照在体大鼠肝脏3min,术后常规饲养,分别于辐照后1d、7d和15d宰杀取材,做石蜡切片和冰冻切片。观察辐照后肝细胞形态结构和酸性磷酸酶、单胺氧化酶活性变化。结果表明:辐照后的肝组织出现坏死区、重损伤区、轻损伤区,各区细胞的形态结构均发生了不同程度的变化。两种酶反应在坏死区为阴性,重损伤区呈弱阳性,轻损伤区呈强阳性,而未损伤区呈中等阳性反应。本文以此为线索,讨论了超声损伤机制和酶在肝细胞的继发性损伤和修复过程中的作用。     

柴胡皂苷d对肝星状细胞的作用分析

从传统药物中寻找生物活性成分是开发抗肝纤维化药物的重要途径。人们发现中药柴胡成份柴胡皂苷d（SSd）可以抑制肝星状细胞（HSC）活化，但是相关生物学机制的研究较少。本研究以体外诱导活化的HSC为肝纤维化细胞模型，探究SSd抗肝纤维化效果及其分子机制。结果显示，SSd能够抑制HSC增殖和纤维化相关基因转录，并且可能通过激活细胞凋亡通路和抑制线粒体能量代谢两条途径诱导HSC发生凋亡。本研究表明，SSd有希望成为抗肝纤维化的潜在药物。     

肝脏干细胞的来源与潜能

肝干细胞是肝脏内具有自我更新能力和多分化潜能的细胞,包括卵圆细胞、小型肝细胞和小肝细胞样前体细胞.其中,卵圆细胞可能来源于胚胎干细胞和/或骨髓干细胞.肝干细胞能分化为肝实质细胞和胆管上皮细胞,在一定条件下,还能分化为胰腺细胞、肠上皮细胞、肌细胞或转化为肝肿瘤细胞.     

Differentiation of human embryonic stem cells along a hepatocyte lineage and its application in liver regeneration

Hepatocyte transplantation and bioarUficial liver （BAL） as alternatives to liver transplantation offer the possibility of effective treatment for many inherited and acquired hepatic disorders. Unfortunately, the limited availability of donated livers and the variability of their derived hepatocytes make it difficult to obtain enough viable human hepatocytes for the hepatocyte-based therapies. Embryonic stem cells （ESCs）, which could be isolated directly from the blastocyst inner cell mass, have permanent self-renewal capability and developmental pluripotency and therefore might be an ideal cell source in the treatment of hepatic discords. However, differentiation of hESCs into hepatocytes with significant numbers remains a challenge. This review updates our current understanding of differentiation of ESCs into hepatic lineage cells, their future therapeutic uses and problems in liver regeneration.     

大鼠肝星形细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析

按Higgins等方法制作大鼠2／3肝切除（pafital hepatectomy，PH）模型，用两步灌流法分散肝脏细胞，用60％Percoll梯度离心和免疫磁珠相结合分离肝星形细胞，用结蛋白（desmin，DES）和波形蛋白（vimentin，vIM）的免疫组织化学定性、定位再生肝（regenerating liver，RD、分散的肝脏细胞及分离的肝星形细胞，用RT—PCR定量肝星形细胞的DES和VIM mRNA，用蛋白免疫印迹定量肝星形细胞DES和VIM．初步证实，分离的肝星形细胞中DES和VIM阳性细胞占95％以上，从PH后各时间点分离的肝星形细胞的DES和VIM mRNA量稳定，相应的蛋白量亦稳定．表明改进的分离肝星形细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点，值得采用．     

囊型肝包虫囊周肝细胞病理形态学观察

观察囊型肝包虫囊周肝细胞的病理形态学变化（肝细胞萎缩、坏死、凋亡）,初步探讨囊型肝包虫病肝细胞“消失”机制。对30例肝包虫囊肿周围肝组织及10例正常肝组织通过光镜观察肝细胞的病理形态学变化,透射电镜观察6例肝包虫囊肿周围肝细胞超微结构改变,运用TUNEL法测定肝细胞凋亡并采用免疫组化技术检测30例肝包虫囊肿周围肝组织及10例正常肝组织中Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果显示TUNEL法测定囊周肝细胞凋亡发生极少（0．12％）与正常肝（0．16％）比较无显著差异,囊周肝组织Bcl-2及Bax蛋臼呈低表达,分别为6．6％和13．3％,病理学观察囊周肝细胞明显萎缩,肝细胞坏死。因此,肝细胞萎缩、坏死、凋亡共同参与囊型肝包虫囊周肝细胞“消失”,肝细胞萎缩、坏死可能是引起肝细胞“消失”的主要机制,肝细胞凋亡可能不是引起肝细胞“消失”的主要机制。     

肝动脉血管段和周围等效肝组织介质应力分析的初探

根据肝脏的结构情况,将肝脏动脉血管简化为内均匀受压的弹性管理在无限大的等效肝组织的粘弹性介质之中的力学模型。并根据粘弹性材料的对应性原理,获得血管为弹性体和等效肝组织为Kelvin粘弹性模型下的应力计算公式及应力变化趋势,这与文献中的应力变化情况是相符的。     

肝癌患者发硒测定及临床意义

目的通过对肝癌、肝硬化患者发硒水平的测定,探讨缺硒与肿瘤发生、发展的关系。方法实验分三组：肝癌患者14例,肝硬化患者15例,正常健康志愿者10例,全部受试者取忱后头发,干燥48h至恒重,硒定量采用荧光测定法。结果肝癌患者发硒水平明显低于正常对照,差异有高度显著性(p＞0．01),肝硬化组发硒水平轻度低于正常对照,但无显著差异(p＜0．05)。肝癌患者发硒水平明显低于肝硬化(p＜0．01)。结论癌症时由于癌组织对硒的富积使血、发硒水平下降,削弱了机体抵抗氧化损害的能力,补充硒可能对改善癌症患者的病情有一定作用。     

左肝管定向穿刺胆管造影术

目的:报告左肝管定向穿刺胆管造影术的方法。方法:本组70例行左肝管定向穿刺胆管造影术(其中22例肝门胆管癌),61例穿刺成功,成功率87.14％,手术证实无出血及胆漏并发症。结果:总成功率98.57％,全组无住院死亡病例。结论:左肝管定向穿刺胆管造影术可作为PTC的首选方法,能有效防止出血和胆漏,但不能完全替代传统的右侧径路PTC,左肝管定向穿刺PTC有助于肝门胆管癌的诊断和分型诊断,应作为首选方法。     

Clonogenic colony-forming ability of hepatic stem cells in the spleens of mice

To confirm the existence of hepatic stem cells (HSCs), fetal liver cells isolated from mice on embryonic day 13 (ED13) were long-term cultured in vitro. Growth of the cells was observed intensively and characteristics were identified by immunocytochemistry. The results showed that some of the cells grew as colonies, in which some cells expressed AFP, CD34 and Albumin. Then the cells were transplanted intravenously into irradiated syngeneic mice. At day 12 a number of small hyperplasia nodules were seen in the apparently enlarged spleens of recipient mice. Moreover, some nodules were positive for AFP and CD34 and consisted of various types of cells, suggesting the very existence of hepatic stem cells in the mouse fetal liver.     

肝内门—腔静脉分流术的应用解剖

目的：为临床进行肝内门—腔静脉分流术提供解剖学基础。方法：在31例成人肝标本上观测肝静脉的汇合类型、开口纵径、横径,肝静脉与门静脉交叉处的长度、横径、两静脉间距离。结果：三条肝静脉注入下腔静脉分三种类型,肝右静脉与门静脉右干及右后上支交叉、肝中、左静脉与门静脉左干交叉。结论：肝内门—腔静脉分流术的首选部位是在肝右静脉与门静脉右干及右肩上支之间;其次是在肝中静脉与门静脉左干之间;肝左静脉不宜行肝内门—腔静脉分流术。     

肝硬化肝切除术后肝再生及评估指标研究

原发性肝癌是我国的常见病、多发病,且90%的患者合并有肝硬化,肝切除术是主要的治疗方法,而肝脏在受到损害或切除之后,可以显示出强大的再生能力,这一现象早已被人们所发现并研究.就肝硬化肝切除术后肝再生、肝再生受损机制以及肝再生评估予以综述.     

PTC在肝门胆管癌分型诊断中的应用

目的 :探讨经皮肝穿刺胆道造影术 (PTC)在肝门胆管癌分型诊断中的作用。方法 :2 2例肝门胆管癌 ,15例 (7例拒绝 )术前行 PTC检查 ;其中经右侧穿刺 3例 ,左侧穿刺 7例 ,双侧穿刺 5例。结果 :15例均根据 PTC结果诊断肝门胆管癌并作出 Bism uth分型 ,其中 型 2例 , 型 4例 , A 型 3例 , B型 1例 , 型 5例。结论 :PTC有助于肝门胆管癌的诊断和分型 ,应作为肝门胆管癌诊断和分型诊断首选方法     

红腹锦鸡肝脏的显微结构观察

用组织学方法对3只红腹锦鸡（Chroysolophus pictus）的肝脏进行了显微结构观察，结果如下：红腹锦鸡的肝脏由许多肝小叶组成；中央静脉位于其纵轴中央，围绕中央静脉，两层肝细胞组成的肝细胞索（肝板）不连续的呈放射状排列，肝血窦呈辐射网状排列；肝血窦的窦壁由一层内皮细胞和枯否氏细胞组成，内皮细胞不连续，枯否氏细胞常见于肝血窦，有几个突起；肝细胞索的两层肝细胞之间见有胆小管，另外，对红腹锦鸡的肝脏与其它动物的肝脏进行了比较。     

犬的肝昏迷模型手术造型方法

本文报告笔者采用保留下腔静脉的一期全肝切除术和门脉肝动脉分期结扎术制作犬的肝昏迷模型的情况、方法和结果。施行了保留下腔静脉全肝切除术12例,门脉肝动脉分期结扎术11例。行THEP时,在完成门腔静脉侧侧吻合后,游离、切断、结扎肝动脉、总胆管,然后结扎肝左外侧静脉,切除左侧叶,顺序如此法切除各肝叶。作PHL时则在完成门腔侧侧吻合后,结扎门脉近肝段后关腹。6～8周后再手术结扎犬动脉。THEP术后平均生存时间为11小时,犬在死亡前都有肝昏迷的临床表现。PHL术后都有慢性肝脑病的临床表现。用以上方法作成的模型可用于肝昏迷的病理生理学和肝昏迷治疗的研究。