杂交稻博优998种子真实性与纯度的IEF鉴定

研究利用等电聚焦技术对博优998及其亲本种子蛋白进行了分析，发现有一条亲本互补谱带。应用该互补谱带，对该杂交稻种子样品进行了鉴定，与田间小区种植鉴定的结果比较差异较小。表明这一技术在杂交稻种子纯度鉴定上是可行的。     

两系杂交水稻培矮64S/培辐F1种子品种真实性和纯度的检测及评价

本试验利用超薄等电聚焦技术对两系杂交水稻培矮64S/培辐F1种子及其亲本种子蛋白进行了分析,并应用父本特征蛋白质谱带对该杂交稻种子样品进行了纯度鉴定。鉴定结果与田间小区种植鉴定的结果完全一致,而超薄等电聚焦技术成本更低,速度更快,表明这一技术在杂交稻种子纯度鉴定上是可行的。     

应用蛋白质凝胶电泳法鉴定玉米种子纯度

多年来，我们采用蛋白质凝胶电泳法对千份不同玉米品种的样品谱带观察、分析，并与田间种植鉴定对比，证实了该方法不但准确性高，速度快，经济，简便，而且具有稳定性和再现性，是目前玉米品种纯度鉴定的理想方法。下面从电泳谱带观察、分析上，谈谈鉴定玉米品种纯度的可行性。１　杂交种与亲本自交系之间的亲缘关系１．１　互补型谱带：在杂交种中出现两条谱带（与亲本对照），其中一条与父本一致，另一条与母本一致，则这两条谱带称作互补带。例如，单交种中单２号（Ｍｏ１７×自３３０）有两对互补带。一对互补带上线与父本自交系自３３…     

酯酶同工酶谱分析鉴定杂交水稻种子纯度技术初探

本文对长江中下游地区目前常用的水稻杂交种子及其亲本进行了酯酶同工酶电泳测定，通过对不同生长时期材料的选择，以及电泳图谱中标记酶带的分析，将杂交稻的酶话类型归为3种：互补类型、编亲类型、杂合类型，其中的互补酶类型为杂交水稻纯度的鉴定提供了一个可靠的依据。     

杂交水稻种子纯度SSR指纹图谱标记鉴定技术研究

用SSR指纹图谱标记对10个杂交水稻组合的子一代种子纯度进行鉴定,并进行人为掺杂与田间种植验证.结果表明,分布于染色体1～12的232对微卫星引物中,有62对引物能够分别在1～10个杂交稻组合及其亲本中显示稳定的多态性,据此有效鉴定出杂交组合中的亲本种子;人为掺杂与田间种植验证均与室内SSR鉴定结果完全一一对应.     

利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定向日葵种子纯度的研究

采用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术，对13份向日葵杂交种和自交系进行了鉴别，结果表明，它们的种子蛋白电泳图谱差异明显，特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定种子纯度结果之间存在极显著的线性正相关性。该技术可作为向日葵杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种新手段。     

用同工酶电泳快速鉴定甜瓜品种的

以9个甜瓜品种的种子为材料,利用同工酶PAGE电泳分析技术对甜瓜品种的真实性与纯度进行鉴定.对酯酶同工酶、过氧化物同工酶、乙醇脱氢酶、酸性磷酸酯酶的电泳结果表明,甜瓜种子中酯酶同工酶的多态性较多,乙醇脱氢酶仅有一条谱带,过氧化物同工酶、酸性磷酸酯酶同工酶均无谱带,不同的同工酶图谱间均无特异性谱带,因此,种子同工酶电泳法不适于鉴定甜瓜父母本和杂交种的品种纯度.     

利用SSR标记检测杂交玉米种子纯度的研究

以玉米杂交种垦玉6和龙单13及其亲本为试验材料,提取基因组DNA,利用SSR标记进行玉米杂交种子的纯度鉴定。结果表明,本试验提取方法获得的DNA质量高,可进行正常的SSR扩增,并且从20对玉米SSR引物中筛选出4对扩增谱带呈双亲互补型的引物,扩增谱带清晰,可以对垦玉6、龙单13杂交种子的纯度进行鉴定。     

利用TaqMan-SNP基因分型技术快速鉴别玉米杂交种与其亲本

根据玉米1个多态性SNP位点DNA序列设计TaqManSNP分型引物和探针,对5个杂交玉米组合进行分型分析,根据双亲互补的原则,确认该位点可用于2个杂交玉米品种与其亲本的鉴别.利用该位点对种子样品进行检测,能准确将混杂其中的亲本鉴定出来.与SSR标记相比,TaqMan-SNP分型技术不仅鉴定结果准确,而且具有速度快、易判定等优点,适合杂交玉米种子纯度的快速鉴定.     

酯酶同工酶鉴定杂交水稻品种及其亲本纯度的研究

研究了两种不同的电泳缓冲系统及染色方法对水稻酯酶同工酶的鉴定效果.结果表明：Tris-HCl系统的分辩率比Tris-citric系统的高.分析了杂交水稻不同发育时期材料、不同取材部位酯酶同工酶的表达.结果表明：3～4 d芽龄的幼苗为最适宜的鉴定时期,取材部位不影响标记酶带的表达.应用该方法对供试材料的酶谱类型进行了划分：①偏亲型（汕优559、协优57、协优559、65002）;②互补型（特优559、特优多C 1号）;③杂合型（汕优63、协优63、特优63）.其中互补型在种子真实性和纯度鉴定中具有一定利用价值.用互补型对生产用种进行检测,并与相应的大田鉴定结果进行回归分析,表明田检纯度和酶谱纯度呈极显著正相关.     

玉米改良单交种的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

利用改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对改良掖单19(8001×52106)、原掖单19(478×52106)及亲本8001、478、52106种子清蛋白(Albumin)进行了研究.改良掖单19共分离出18条清蛋白谱带,除了7条是双亲都有的公共带外,其余11条是分别来自于双亲的互补带,其中4条来自8001,7条来自52106,没有新生带的产生,在A区和B区表现双亲共显性,在C区表现偏父类型;原掖单19共分离出16条清蛋白谱带,比改良掖单19少两条,在谱带分布上也存在明显差别.改良掖单19与原掖单19的清蛋白谱带彼此不能相互替代.     

‘福春1号’大白菜一代杂种纯度的SRAP鉴定

‘福春1号’大白菜是福州市蔬菜科学研究所选育的晚抽薹春白菜新品种。为鉴定该品种的纯度,利用80对SRAP引物组合对‘福春1号’及其亲本混合池DNA模板进行扩增,筛选出杂交种具有亲本互补特征带的引物组合,并利用该组合对田间栽培的‘福春1号’大白菜幼苗进行纯度检测。本研究最终筛选出引物组合M2+E4,其对杂交种扩增产生亲本互补的特征带,可将亲本和杂交种有效区分。利用这对SRAP引物组合对102株‘福春1号’大白菜幼苗进行纯度检测,检测纯度为94.12%。SRAP标记鉴定结果与田间调查结果基本一致。SRAP分子标记技术可用于‘福春1号’大白菜的纯度鉴定。     

基于油菜F1杂种种皮鉴别其母本的SSR检测方法及应用

甘蓝型油菜杂交种中雄性不育母本假杂种是影响种子纯度的关键。为了探索一种能准确鉴定油菜杂交种中母本假杂种的方法,利用CTAB小样法分别提取油菜F1杂种种皮和幼苗的总DNA,进而筛选种皮与幼苗的SSR谱带存在差异的引物,并用于鉴别杂交种制种样品中母本基因型假杂种。结果表明：F1杂种种皮的SSR电泳谱带与其母本相同,利用筛选到的多态性SSR引物对2个国审品种的6份杂交制种样品中母本基因型假杂种鉴定的结果与田间单株鉴定吻合率达98%以上,说明利用F1杂种种皮与幼胚存在多态性的SSR标记鉴定杂交种的母本基因型假杂种是可靠的。该技术方法可以克服目前油菜杂交种SSR纯度鉴定对亲本的依赖,为种子生产、管理和经营部门种子纯度质量的有效监控提供技术参考。     

利用种子醇溶蛋白选育玉米姊妹系和姊妹种的研究

不同分离世代产生的姊妹系配制的早晚代姊妹种在农艺性状、产量和种子蛋白图谱上存在很大的差别。大多数早代姊妹种种子蛋白谱带具有双亲的互补带，并表现出较强的优势，晚代姊妹种的种子蛋白图谱基本上与亲本相同，优势不及早代姊妹种明显。     

应用SSR技术对西瓜种子进行品种纯度鉴定的研究

本试验以4个西瓜杂交种和8个亲本为试验材料，建立了西瓜单粒干种子DNA快速提取方法，筛选出了能够区分4个杂交种与双亲，并具有互补带型的SSR引物，建立了适于SSR分子标记检测西瓜种子品种纯度的反应体系。试验结果证明，这套检测技术体系可用于西瓜杂交种品种纯度室内快速鉴定，从而为SSR分子标记技术在西瓜种子纯度鉴定中的应用和推广打下了坚实的基础。     

杂交水稻骨干亲本鉴定标记的开发及应用

随着现代杂交稻育种的发展,利用表型进行品种特异性鉴定、品种真实性鉴定以及种子纯度测试的方法表现出诸多局限性,已经不再适合现代育种的进程.本研究利用水稻基因组插入缺失(insertion-deletion,InDel)位点开发了9个InDel标记用于鉴定生产中常用的29份杂交稻骨干亲本.利用标记电泳图谱做了供试材料的聚类分析,在遗传相似系数0.55左右可将所有供试材料分为5个类群,另外根据不同的亲缘关系和来源地区,又可以将供试材料分为9个亚群.最后利用品种鉴别标记和生长测试两种方法对一份杂交稻种子'广两优476'纯度进行了检测,结果表明两者基本一致.因此,分子标记可以有效应用于现代育种的各个环节,从而加快新品种选育.本研究结果将为水稻育种、新品种审定、品种鉴定以及种子生产提供有益的帮助.     

利用微卫星标记鉴定两系杂交稻两优培胜的种子纯度

从100对水稻SSR引物中筛选到5对表现共显性标记的SSR引物。通过进一步筛选以培矮64S为母本的杂交稻组合，获得一个对两优培胜特异性的引物RM127（SSR标记），该引物只在两优培胜中扩增出“杂合”带型，在其他37个两系杂交稻组合、不育系和常规品种中均只扩增出1条带（纯合带型）。利用该微卫星标记对两优培胜的商品种子进行了纯度鉴定，其检测结果与田间种植鉴定结果完全一致。研究结果初步表明微卫星标记技术应用于两系杂交稻种子纯度鉴定具有十分显著的商业潜力。     

用同工酶电泳快速鉴定甜瓜品种的真实性与纯度研究

以9个甜瓜品种的种子为材料,利用同工酶PAGE电泳分析技术对甜瓜品种的真实性与纯度进行鉴定。对酯酶同工酶、过氧化物同工酶、乙醇脱氢酶、酸性磷酸酯酶的电泳结果表明,甜瓜种子中酯酶同工酶的多态性较多,乙醇脱氢酶仅有一条谱带,过氧化物同工酶、酸性磷酸酯酶同工酶均无谱带,不同的同工酶图谱间均无特异性谱带,因此,种子同工酶电泳法不适于鉴定甜瓜父母本和杂交种的品种纯度。     

基于SSR标记的5个西瓜新品种纯度鉴定及特异性分析的研究

为建立西瓜杂交种品种纯度的快速、准确、高效鉴定体系,利用SSR分子标记,对5个西瓜新品种纯度进行鉴定,并构建亲本的分子指纹图谱。以上海市农业科学院育成的5个西瓜新品种‘申选958’、‘双色冰淇淋’、‘黄晶’、‘圣女红2号’与‘圣女红3号’及其亲本的种子为试材,采用CTAB法从发芽种子的根尖中提取DNA。根据杂交种带型双亲互补的原则,利用SSR标记进行杂交种纯度及特异性鉴定研究。从28对SSR核心引物中筛选出5对特异性引物(引物BVWS00106、BVWS00209、BVWS0036、BVWS01734、BVWS00826),鉴定到这5个新品种的杂交种纯度均达到98%,并与各品种的大田植物学形态特征鉴定结果相比较,符合率高达98%以上。分析比较各亲本材料的SSR引物的多态性表现,构建了9份亲本材料的DNA指纹图谱。研究为西瓜杂交品种纯度快速检测和品种权保护提供了理论依据与技术支撑。     

提高杂交稻亲本不育系繁殖产量和质量的技术措施

杂交水稻亲本种子质量的好坏直接影响到杂交种子的质量,同时也影响到种子公司制种工作的顺利进行.近几年,笔者承担了江苏地区粤优938等杂交稻组合的繁殖亲本不育系工作,连续三年来,生产的大面积不育系种子产量达225kg,纯度高达99.9%.通过近几年的实践,对如何提高杂交稻亲本种子质量和产量提出如下几点做法,供参考.