伊立替康脂质体制备工艺及处方优化研究

目的:通过优化手段筛选脂质体最佳处方工艺,制备伊立替康脂质体,并对其进行质量评价。方法:采用薄膜分散法,改良薄膜分散法,逆向蒸发法,主动载药等方法制备伊立替康脂质体,通过包封率测定优选出最佳制备方法。采用正交试验设计,以包封率为考察指标,优化伊立替康脂质体的处方和工艺。结果:用最优处方制得的脂质体外观好,包封率达到90%以上,透射电镜观察外观圆整,均匀,粒径小于20nm。结论:改良薄膜分散法用于制备水溶性药物伊立替康脂质体是一种较好的制备方法。     

胆汁酸替代胆固醇制备盐酸伊立替康脂质体的可行性研究

目的:探讨用胆汁酸代替胆固醇制备盐酸伊立替康脂质体的可行性，并优化制备工艺处方，减少胆固醇的使用。方法:以薄膜分散法制备含不同比例的胆汁酸-胆固醇的盐酸伊立替康脂质体，采用Sephadex G-50凝胶色谱法分离游离的盐酸伊立替康和脂质体，进行高效液相分析，计算脂质体的包封率(EE)和载药量(DL)。以包封率、载药量，粒径和分散性指数(PDI)评价胆汁酸对脂质体的影响。最后以胆酸为代表，采用Box-Behnken实验设计法优化胆酸-盐酸伊立替康脂质体的工艺处方，对优化后的脂质体进行表征。结果:在不同胆汁酸-胆固醇比例下制备的盐酸伊立替康脂质体均具有类似于传统脂质体(胆固醇型)的EE、DL、粒径和PDI,经过处方优化后的胆酸-盐酸伊立替康脂质体为类球形，EE为82.04%±1.38%,DL为3.72%±0.04%,粒径为(154.16±4.92)nm, PDI为0.15±0.02,剪切面电位为(-56.93±0.46)mV,在体外表现出缓释作用。结论:胆汁酸可以作为膜材料辅料，应用于脂质体的制备，降低胆固醇的使用量。     

pH梯度法制备伊立替康脂质体

目的：以pH梯度法制备伊立替康脂质体，研究两种铵盐对伊立替康脂质体主动载药行为的影响。方法：采用薄膜分散一高压乳匀法制备空白脂质体，通过pH梯度法将药物包封入脂质体中，建立铵离子的测定方法；研究pH梯度、孵化温度对脂质体包封率及药物释放的影响。结果：以硫酸铵和磷酸氢二铵建立脂质体膜内外梯度制备的空白脂质体主动载药后，包封率分别为（98．2±1．5）％和（87．6±2．3）％，两种脂质体的包封率均随pH梯度增加而增加，其中以硫酸铵制备的载药脂质体药物的释放较慢。结论：pH梯度法适合制备伊立替康脂质体，pH相同时，铵盐的类型对脂质体主动载药后的包封率和释放均有一定影响。     

盐酸伊立替康脂质体包封率的测定

目的：建立测定盐酸伊立替康脂质体包封率的方法。方法：通过微柱离心分离盐酸伊立替康脂质体和游离药物,以HPLC法测定药物含量,计算包封率。结果：Sephadex G-50微型柱可完全吸附盐酸伊立替康游离药物,空白脂质体回收率为98.2%～100.7%,脂质体和游离药物得到良好的分离;在选定色谱条件下,辅料不干扰测定,盐酸伊立替康质量浓度在1.1～10.6mg/L范围内线性关系良好（r=0.9997）,日内和日间精密度（RSD）均〈2%,加样回收率为97.6%～100.7%。结论：微柱离心-HPLC法可用于盐酸伊立替康脂质体包封率的测定。     

硫酸铵梯度法制备盐酸川芎嗪脂质体

目的:通过实验确定盐酸川芎嗪脂质体的最佳工艺条件.方法:用硫酸铵梯度法主动载药制备盐酸川芎嗪脂质体.结果:包封率为48.82%,载药量为4.07%.结论:用硫酸铵梯度法制备盐酸川芎嗪脂质体可行.     

伊立替康长循环脂质体的初步生物学活性研究

目的 采用乙醇注入-硫酸铵梯度法制备伊立替康长循环脂质体,并初步考察其体外抗肿瘤的生物活性.方法 乙醇注入-硫酸铵梯度法制备伊立替康长循环脂质体,以结直肠癌细胞SW480,肝癌细胞HepG2,乳腺癌细胞MCF-7三种细胞为模型,MTT法检测伊立替康长循环脂质体对各种细胞的杀伤能力,同时采用荧光染色法,考察伊立替康长循环脂质体对乳腺癌细胞MCF-7形态及凋亡的影响.结果 与游离伊立替康溶液相比,伊立替康长循环脂质体对人直肠癌细胞SW480,肝癌细胞HepG2,乳腺癌细胞MCF-7有明显的抗肿瘤活性,能够改变MCF-7细胞的形态,促进其凋亡.结论 伊立替康长循环脂质体体外实验表明其能提高药物的抗肿瘤活性,其效果优于伊立替康注射液,体内实验有待于下一步进行.     

海参皂苷nobilisideA注射用脂质体冻干制剂的制备及其性质考察

目的:制备海参皂苷nobilisideA冻干脂质体并对其性质进行考察。方法:采用薄膜分散法制备了nobilisideA脂质体并将其冻干制成nobilisideA冻干粉,测定冻干脂质体的药物含量和包封率、粒径、ζ电位等指标,考察其与葡萄糖配伍的稳定性和溶血性,了解nobilisideA冻干脂质体的性质。结果:通过工艺优化,制备了以蔗糖为冻干保护剂的nobilisideA冻干脂质体,具有较好的成型性和复溶能力。测得冻干前后nobilisideA脂质体的百分含量分别为108.3%和108.6%,包封率分别为98.4%和97.8%,粒径分别为89.9 nm和115.8 nm,ζ电位分别为-19.9 mV和-15.9 mV。脂质体在葡萄糖输液中8 h内含量、包封率、粒径以及溶血率均无明显变化。结论:所制得的nobilisideA冻干脂质体粒径分布范围窄,包封率高,性质稳定,是一种很有应用前景的nobilisideA脂质体制剂。     

盐酸左氧氟沙星脂质体的包封率和体外释放研究

目的:研究盐酸左氧氟沙星脂质体的包封率测定方法和影响因素,初步考察其体外释放规律.方法:用硫酸铵梯度法制备了盐酸左氧氟沙星脂质体;用凝胶过滤色谱法测定脂质体的包封率,并研究各种因素对包封率的影响;用溶出度第三法考察了脂质体的释放规律.结果:制得脂质体的包封率约为80%,脂质体的体外释放规律符合一级动力学过程.结论:体系pH值和硫酸铵浓度对包封率影响最大,制得脂质体的体外释放具有缓释特点.     

重酒石酸长春瑞宾脂质体冻干前后包封率的测定

目的用pH梯度法制备重酒石酸长春瑞宾脂质体,考察不同因素对脂质体冻干前后包封率的影响。方法采用pH梯度法制备重酒石酸长春瑞宾脂质体,冷冻干燥,用Sephadex G-50柱层析法测定包封率,比较冻干前后包封率的大小。结果在药脂比为1∶40、孵育温度37℃、孵育时间30 min、洗脱液PBS(pH7.4,137 mmol/L NaCl,2.6 mmol/L KCl,6.4 mmol/L Na2HPO4,1.4 mmol/L KH2PO4)时,重酒石酸长春瑞宾脂质体冻干前后的包封率最高。结论药物与磷脂的比值、孵育温度和不同缓冲盐作为洗脱液,在制备过程中对重酒石酸长春瑞宾脂质体冻干前后的包封率都有不同程度的影响。     

粉防己碱-阿霉素复合脂质体的制备及质量控制评价

目的:制备粉防己碱-阿霉素复合脂质体并对其工艺及质量进行研究与评价,为临床上逆转肿瘤的多药耐药提供新的思路.方法:采用3种不同脂质体制备方法,并以包封率为指标进行处方筛选和工艺优化.结果:确定了硫酸铵梯度法结合pH梯度法制备复合脂质体的最佳处方最佳处方为:药脂比1:20,磷脂-胆同醇比例3:1,外水相pH值为7.6,硫酸铵浓度为250mmol/L.以该处方制备的脂质体DOX的平均包封率为90.77%,TET的平均包封率为80.12%.结论:该处方制备的粉防己碱-阿霉素复合脂质体包封率及外观良好,在低温充氮条件下较稳定,为进一步实验奠定了基础.