醒髓汤治疗脊髓损伤大鼠的实验研究

目的观察醒髓汤对脊髓损伤大鼠后肢运动功能和受损脊髓组织形态学的影响。方法60只SD大鼠随机分为空白组、模型组和醒髓汤组，采用改良Allen＇s的WD法对模型组和醒髓汤组进行脊髓损伤造模，空白组仅打开椎板不损伤脊髓。造模成功后，空白组和模型组用生理盐水灌胃，醒髓汤组用醒髓汤灌胃，分别于术后3h、6h、24h、72h、168h对每一组实验动物进行Tarlov法评分、斜板试验功能测定和受损脊髓组织形态学观察。结朵醒髓汤组大鼠后肢功能恢复明星优于模型组，脊髓组织神经细胞坏死、液化、溶解较模型组轻。结论醒髓汤能有效减轻脊髓损伤大鼠脊髓组织坏死，有利于大鼠运动功能恢复。     

醒髓汤对大鼠脊髓损伤血栓素影响的实验研究

目的探讨脊髓损伤后血浆血栓素与神经功能的变化及其意义。方法采用改良式的A llen’s方法制作中度脊髓损伤模型,用放射免疫法测量血浆血栓素(TXA2)含量。结果醒髓汤组与地塞米松组于伤后30m in时无显著差别,血栓素显著升高,而醒髓汤组血浆血栓素(TXA2)含量在2h和8h明显低于地塞米松组。结论醒髓汤可明显改善受损脊髓早期微循环和缺血缺氧状态,从而阻断或减轻继发性病变发生与发展过程,促进脊髓神经功能恢复。     

通督活血汤对大鼠急性脊髓损伤后炎症反应影响

目的观察通督活血汤对急性脊髓损伤后炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的影响,探讨通督活血汤对急性脊髓损伤后炎症反应的影响。方法 56只SPF级SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=8)、模型组(n=24)、通督活血汤组(n=24)。模型组、通督活血汤组均采用改良Allen's打击法建立脊髓损伤模型,假手术组不打击脊髓,其他步骤同模型组,造模后通督活血汤组给予通督活血汤灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃。术后第1、3、7天对各大鼠进行BBB功能评分,评分后取脊髓组织,HE染色观察脊髓组织形态变化,Elisa法检测脊髓组织TNF-α、IL-1β含量,实时荧光定量PCR检测脊髓组织TNF-α、IL-1βmRNA的表达情况。结果与假手术组相比,术后第1、3、7天模型组、通督活血汤组BBB评分显著降低(P0.05),与模型组相比,术后第3、7天通督活血汤组BBB评分显著增高(P0.05);与假手术组相比,术后第1、3、7天模型组、通督活血汤组TNF-α、IL-1β及其mRNA表达量显著升高(P0.05),与模型组相比,通督活血汤组TNF-α、IL-1β及其mRNA表达量显著降低(P0.05)。结论通督活血汤可以降低炎症因子TNF-α、IL-1β的表达,抑制急性脊髓损伤的炎症反应,促进急性脊髓损伤后大鼠下肢功能的恢复。     

人参皂甙对大鼠急性脊髓损伤的影响实验研究

目的探讨人参皂甙对大鼠急性脊髓损伤的疗效和作用机制.方法取60只SD大鼠,采用改良Allen's重物打击法制作SCI模型.显露后,切除T12的全椎板.将一10 g重物自5 cm高处垂直下落打击硬膜表面,致伤能量为50 g/cm,造成脊髓全瘫模型,分别给予人参皂甙、甲基强的松龙(methylprednisolon,MP)注射液治疗.于术后12 h,24 h,7 d,14d取脊髓测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素(ET)的含量及神经生长因子(NGF)的表达;脊髓行常规组织切片染色.结果损伤组脊髓中MDA升高,SOD减低,ET升高,而各治疗组上述指标均有改善,各组各指标比较差异有显著性(P＜0.01);组织学检查损伤组有神经细胞变性,坏死,各治疗组损伤程度减轻;人参皂甙引起了脊髓中表达NGF的雪旺细胞阳性细胞百分率升高,间接地促进了神经损伤的修复.结论早期使用人参皂甙对脊髓损伤有一定保护作用,在脊髓继发性损伤的修复中起着重要的作用.     

吴门枳壳甘草汤对腰椎间盘突出大鼠酸敏感离子通道及相关因子影响的实验研究

目的探究吴门枳壳甘草汤对腰椎间盘突出症(Lumbar disc herniation,LDH)大鼠脊髓酸敏感离子通道2(acid-sensing ion channel-2,ASIC2)、酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channel-3,ASIC3)蛋白及相关因子表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、甲基强的松龙组和枳壳甘草汤组,每组10只。通过自体椎间盘移植方法制备LDH大鼠模型,假手术组仅暴露神经根后缝合伤口。造模后5 d连续给药28 d,甲基强的松龙组腹腔注射9 mg/mL注射液,枳壳甘草汤组灌胃给予1.2 g/mL的药液。假手术组和模型组给予等量生理盐水。给药后检测神经功能BBB(Basso,Beattie,Bresnahan)评分,HE染色观察脊髓形态变化,用酶联免疫吸附试验法(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)测定脊髓中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、丙二醛(Model Driven Architecture,MDA)水平及血清中血栓素(thromboxane,TXA_2)、6-酮前列腺素F1(6-keto-PGF1)水平。应用蛋白印迹技术检测脊髓组织ASIC2、ASIC3蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组BBB评分明显降低(P0.01),MDA和TXB_2、6-Keto-PGF1的水平均增加(P0.05),SOD降低(P0.01);与模型组比较,甲基强的松龙组及枳壳甘草汤组均显著降低MDA及TXB_2、6-Keto-PGF1水平(P0.05),提高SOD水平(P0.05)。HE染色结果显示,与假手术组相比,模型组脊髓结构受损,胶质细胞增殖明显增加。与模型组相比,甲基强的松龙组和枳壳甘草汤组大鼠脊髓损伤较轻,胶质细胞增殖改善,正常神经元数量增加。蛋白印迹技术检测结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠髓核ASIC2和ASIC2蛋白表达水平均显著升高(P0.001或P0.01)。与模型组比较,甲基强的松龙组和枳壳甘草汤组ASIC3蛋白表达明显降低(P0.05或P0.01),但是ASIC2蛋白表达与其相当。结论吴门枳壳甘草汤能明显减轻LDH大鼠的病情,并推测与抑制大鼠髓核 ASIC3蛋白表达密切相关。     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓神经细胞凋亡的影响

目的：探讨补阳还五汤（BYHWD）对脊髓损伤（SCI）大鼠脊髓神经细胞凋亡的影响。方法：30只Wistar大鼠随机分为SCI模型组、假手术组和BYHWD组,每组10只大鼠。SCI模型组和BYHWD组建立大鼠SCI模型, BYHWD组大鼠给予BYHWD（20ml/kg）灌胃2周。用药结束后处死大鼠,采用TUNEL法检测脊髓神经细胞的凋亡情况。结果：与假手术组大鼠比较,模型组大鼠神经细胞凋亡指数明显升高（P ＜0.05）;与模型组大鼠比较,BYHWD组大鼠神经细胞凋亡指数明显降低（P ＜0.05）。结论：BYHWD可通过抑制SCI大鼠脊髓神经细胞凋亡对SCI时脊髓损伤发挥保护作用。     

人参汤对脾阳虚大鼠血中NO/ET影响的实验研究

目的:通过人参汤对血中一氧化氮(NO)／内皮素(ET)的影响的实验研究,探讨其治疗冠心病的机制。方法:在采用苦寒泻下法建造的脾阳虚大鼠模型上观察人参汤对一氧化氮(NO)、内皮素(ET)等指标的影响。结果:人参汤能显著降低模型大鼠血中ET的含量,升高血清NO水平,与对照组比较差异显著(P<0．05)。结论:人参汤对血中ET/NO 失衡的纠正和调节,可能是其治疗冠心病机制的一个方面。     

茶多酚对脊髓损伤大鼠急性期氧自由基与炎症因子的影响

目的研究茶多酚(tea polyphenols, TP)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)急性期抗氧化与抗炎的作用。方法SD雌性大鼠随机分为6组,每组6只,建立大鼠脊髓半切SCI模型,分为假手术组、模型组、阳性药组(甲基强的松龙100 mg/kg)、TP高剂量组(100 mg/kg)、TP中剂量组(50 mg/kg)、TP低剂量组(25 mg/kg)。术后5 min,假手术组和模型组灌胃生理盐水(10 mL/kg),其他组别灌胃相应药物。24 h后取受损脊髓局部组织,HE染色观察脊髓组织形态学变化,测定脊髓组织中·O2-、NO水平及诱导型-化氮合酶(iNOS)蛋白含量、抗氧化酶系统SOD与MDA活性以及血清中炎症因子IL-1β、IL-6与IL-8的含量。结果 HE染色图像显示,TP各剂量组脊髓形态好于模型组;同时,与模型组比较,TP降低了SCI大鼠脊髓组织中活性氧(ROS)的水平、增加了SOD活性、降低了MDA含量(P0.05),亦减少了血清炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8的含量(P0.05)。结论茶多酚能减少SCI大鼠急性期氧自由基与炎症因子的表达。     

甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤组织中肾上腺髓质素表达的影响

目的:观察甲基强的松龙(MP)对大鼠脊髓损伤(SCI)组织中肾上腺髓质素(AM)表达的干预作用.方法:SD大鼠108只随机分为假手术组、MP干预组(MP组)和脊髓损伤组(SCI组),每组36只.假手术组只切除椎板不损伤脊髓,MP组和SCI组采用Allen WD法制作大鼠急性脊髓损伤模型,并于术后1 h经尾静脉分别给予50mg/kg MP和等量生理盐水.于术后2 h、8 h、1 d、2 d、3 d、6 d取骨髓组织(每个时点6只大鼠),HE染色观察脊髓损伤情况,免疫组化染色观察AM的表达,并于术后1 d、3 d、6 d行运动功能评定.结果:HE染色,假手术组各时间点无明显异常,MP组病理变化轻于SCI组.免疫组化染色,假手术组中AM低表达,SCI组AM表达增高并于术后8 h达峰值,以后逐渐降低(P＜0.01),MP组AM的表达在术后8 h、1 d、2 d、3 d均高于SCI组,差异有统计学意义(P＜0.05).运动功能评分:假手术组1 d、3 d、6 d均高于MP、SCI组,MP组在术后3 d、6 d高于SCI组,P均＜0.01.结论:急性脊髓损伤后AM表达代偿性增高并存在动态变化,MP干预可上调AM的表达从而减轻脊髓的继发性损伤.     

电针对急性脊髓损伤大鼠差异表达基因及钙离子作用的实验研究

目的 探讨电针对急性脊髓损伤(SCI)保护作用的机理.方法 大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、药物组、电针组,用改良Allen's打击法制成SCI模型.电针组造模后电针"大椎""命门"两穴,药物组尾静脉注射甲基强的松龙.损伤6 h后取材.测定损伤后血清中钙离子含量;取电针组、模型组和空白组的损伤局部组织,提取mRNA,由空白组、模型组和电针组脊髓标本中提取的RNA样品中,各选取3份RNA样品,分别混合后组成具有可比性的2组获得差异表达基因,通过生物信息学方法对这些差异表达基因在急性SCI中的作用进行功能分析.结果 与模型组相比,电针组钙离子含量降低显著(P<0.05).SCI的早期,模型-空白组有266条基因的表达发生了显著变化;电针-空白组有181条差异表达基因.结论 电针可以降低SCI大鼠血清中钙离子含量,对SCI具有保护作用;脊髓损伤后有大量的基因差异表达发生,这些基因可能与神经组织保护、生长和再生关系密切.     

注射用血栓通对2型糖尿病GK大鼠视网膜病理结构的影响

[目的]注射用血栓通（冻干）（XST）由三七主根为原料制成,本文探讨了其对GK大鼠糖尿病视网膜病理结构的影响,为治疗糖尿病视网膜并发症提供实验依据。[方法]GK 2型糖尿病大鼠随机分为模型组,100 mg/kg血栓通组,50 mg/kg血栓通组。血栓通组每天给予血栓通腹腔注射,另设Wistar对照组,对照组和模型病组给予等量的生理盐水,大鼠均于屏障环境中饲养治疗60 d。[结果]血栓通对糖尿病大鼠的体质量、血糖未见影响,能有效抑制糖尿病大鼠视网膜的收缩,改善各层的细胞结构。[结论]血栓通可改善GK2型糖尿病大鼠视网膜病理结构。     

复方血栓通胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用

目的探讨复方血栓通胶囊对糖尿病肾病大鼠模型的作用。方法 8周龄雄性SD大鼠予链脲佐菌素50 mg/kg单次腹腔注射建立糖尿病肾病模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组、血栓通低剂量组[900 mg/(kg.d)]、血栓通高剂量组[1 800 mg/(kg.d)],每组7只,选取健康同龄大鼠作为正常组。采用灌胃给药,正常组和模型组均灌服等体积稀释液。干预12周后,留取尿液,测定尿白蛋白;肾脏组织行苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色、过碘酸-雪夫(PAS)染色,并行电镜病理观察肾小球基底膜、足细胞、系膜细胞改变。结果模型组尿白蛋白高于正常组,3种不同干预组(厄贝沙坦、低剂量和高剂量血栓通)尿白蛋白均降低,血糖和体重差异;三大染色和电镜结果提示,厄贝沙坦组基底膜、系膜细胞和足细胞的病理损害缓解,血栓通组上述细胞损害改善,高剂量组与低剂量组间差异无统计学意义。结论复方血栓通胶囊可减少糖尿病肾病大鼠模型的尿白蛋白,改善肾脏足细胞、系膜细胞病理形态,对糖尿病肾病具有保护作用。     

内皮素受体拮抗剂PD142893对大鼠损伤脊髓血流及功能的影响

目的：研究内皮素受体拮抗剂PD142893对大鼠损伤脊髓血流及功能的影响,探讨内皮素在继发性脊髓损伤中的作用机制。方法：35 g物体后路压迫大鼠胸段脊髓5 min造成脊髓急性中度损伤。应用激光多普勒血流仪检测对照组、损伤组及PD142893治疗组(蛛网膜下腔注射给药50 μg)大鼠局部脊髓血流的动态变化,并观察伤后一周的神经功能恢复情况。结果：PD142893蛛网膜下腔注射能明显改善脊髓压迫伤早期（30 min至8 h）的低血流灌注;且能部分恢复损伤大鼠脊髓功能。结论：内皮素可能是脊髓继发性损伤的重要损害因子之一; 蛛网膜下腔注射内皮素受体拮抗剂PD142893能部分逆转脊髓损伤。     

Attenuation of Brain Inflammatory Response after Focal Cerebral Ischemia/Reperfusion with Xuesaitong Injection(血塞通注射液) in Rats

Objective： To investigate the neuro-protective effect of Xuesaitong Injection （血塞通注射液, XST） on brain inflammatory response after transient focal cerebral ischemia/reperfusion in rats. Methods： Focal cerebral ischemia/reperfusion models of male rats were induced by transient occlusion for 2 h of middle cerebral artery （MCA） which was followed by 24 h reperfusion. XST was administered through intraperitoneal injection of 25 mg/kg or 50 mg/kg at 4 h after the onset of ischemia. After reperfusion for 24 h, the neurological function score was evaluated, the brain edema was detected with dry-wet weight method, the myeloperoxidase （MPO） activity and the expression of intercellular adhesion molecule-1 （IOAM-l） of ischemic cerebral cortex and caudate putamen was determined by spectrophotometry and immunohistochemistry respectively. Results： XST not only lowered neurological function score at the dose of 50 mg/kg, but reduced brain edema and inhibited MPO activity and IOAM-1 expression as compared with the ischemia/reperfusion model group （P〈0.01）. Conclusion： XST has a definite effect on inhibiting the expression of IOAM-1 and neutrophil infiltration in rats with cerebral ischemia/reperfusion when treatment started at 4 h after ischemia onset, and also attenuates inflammation in the infarcted cerebral area.     

大鼠脊髓损伤模型的制备与评估

目的：制备大鼠急性脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）模型并对模型进行评估,为探究SCI 继发性反应的发生机制及SCI 早期干预治疗奠定基础。方法：将10 周龄的雄性SD 大鼠随机分为SCI 组和假手术（Sham）组（n=12）,SCI 组行第9~11 胸椎（T9-11）椎板切除术,于T10 处用标定力为50 g 的动脉瘤夹完全钳夹脊髓并维持40 s,以制备急性SCI 大鼠模型。Sham 组大鼠仅行T9-11 椎板切除手术,而不损伤脊髓组织。SCI 后,根据BBB评分标准对实验动物后肢运动功能进行评价,采用HE 染色和TUNEL 染色检测实验动物脊髓组织的病理学变化和细胞凋亡,并采用 Western blot 对细胞凋亡密切相关蛋白：B淋巴细胞瘤-2（ B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）和cleaved caspase3（c.caspase3）的相对含量进行检测。结果：     

急性低压缺氧对血清一氧化氮和内皮素的影响

目的：探讨急性低压缺氧时一氧化氮（NO）、内皮素（ET）的变化及其相互关系。方法：36只健康雄性SD大鼠，随机分为对照组、5000m低压缺氧组、8000m低压缺氧组。采用硝酸还原酶法测定血清中NO含量、放射免疫法测定ET含量。结果：5000m、8000m急性低压缺氧组与对照组比较，血清NO含量显著降低（P＜0．05）；血清ET含量显著升高（P＜0．05或P＜0．01）；5000m组与8000m相比，NO、ET含量均无显著性差异（P＞0．05）。结论：缺氧后机体发生病理改变与NO合成下降、ET合成增加导致功能失衡有关。     

大鼠脊髓急性损伤后内皮素-1含量的变化

目的：通过检测大鼠脊髓急性损伤后内皮素－1（ET－1）的含量变化,探讨ET－1在脊髓继发性损伤中可能的作用机制。方法：用35g负荷压迫大鼠胸段脊髓（T8－9）5min,造成大鼠胸段脊髓急性损伤,用放射免疫法测定大鼠脊髓急性损伤后早期血浆和伤段脊髓组织中ET－1的含量。结果：脊髓损伤后30min,血浆,伤段脊髓组织中ET－1水平显升高,4h达最高峰,并分别持续至48h和72h。结论：ET－31参与脊髓继发性损伤,可能是伤后4－24h重要的损害因子之一。     

脑缺血再灌注胃肠损伤老龄大鼠血浆神经肽的变化及其意义

目的 :从内皮素 (ET)和降钙素基因相关肽 (CGRP)及神经降压素 (NT)的变化方面探讨老龄大鼠脑缺血再灌注胃肠损伤的机制。方法 :青年 (5月龄 )和老龄 (2 0月龄以上 )大鼠均分为模型组和正常对照组 ,观察大鼠全脑缺血 30分钟再灌注 6 0分钟后胃肠组织病理损伤和血浆ET、CGRP、NT含量。结果 :脑缺血再灌注胃肠组织出现明显的病理改变 ,老龄大鼠较青年大鼠严重。青年对照组血浆中CGRP高于青年模型组和老龄对照组。老龄模型组血中ET高于老龄对照组和青年模型组。青年对照组血浆中NT高于老龄对照组和青年模型组。结论 :脑缺血再灌注胃肠损伤与以ET占优势的CGRP与ET的平衡失调和NT含量降低有关 ,由于老龄大鼠ET与CGRP间平衡和NT的增龄变化使脑缺血再灌注后这些病理改变较青年大鼠有着明显特点     

急性脊髓损伤后大鼠血浆和脊髓组织内皮素及电解质含量变化

测定急性脊髓损伤（ＳＣＩ）后大鼠血浆和脊髓组织中内皮素（ＥＴ）及电解质含量,了解其变化规律, 探讨其作用机制。方法：用放免法测定不同程度脊髓损伤后１ｈ,４ｈ,８ｈ,２４ｈ血浆和脊髓组织内皮素含量,并测定 相应脊髓组织钠、钾、钙离子含量和含水量。结果：损伤１ｈ,４ｈ,８ｈ血浆内皮素含量比对照组高（Ｐ＜０．００５）,２４ｈ与 对照组比较差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。脊髓组织内皮素含量实验组均较对照组高（Ｐ＜０．０５）,同一时间不同程度损 伤组比较,重度损伤组均较中度损伤组高（Ｐ＜０．０５）。脊髓组织中钠、钾、钙离子含量及含水量与组织内皮素含量 变化趋势一致。结论：急性脊髓损伤后脊髓组织内皮素含量升高,且与损伤程度有关,组织内皮素含量升高可导致组织水肿,钙、钠离子内流及钾离子外流而加重损伤。