呼吸道病毒分离培养检测技术的研究进展

急性呼吸道感染是世界范围内的常见疾病,呼吸道病毒是其主要的致病病原体。近年来,呼吸道病毒的检测方法日益广泛,培养法作为病毒检测方法中的"金标准",也有了多方面的发展。该文综述了传统呼吸道病毒培养法及新兴方法,如病毒离心培养法、Pre-CPE检测、混合细胞培养法及转基因细胞培养法。这些新方法提高了呼吸道病毒培养法的效率及灵敏度,提高了该方法的实用性,将促进新型呼吸道病毒的发现。     

液态芯片法在社区获得性肺炎病毒检测中的应用价值

目的 评价液态芯片法在社区获得性肺炎(CAP)病毒检测中的应用价值.方法 采集2013年10月至2014年9月因CAP于首都医科大学附属北京同仁医院和卫生部中日友好医院171例就诊患者的342份鼻咽拭子和口咽拭子,分别采用液态芯片法(xTAG(R) RVP)和普通多重呼吸道病毒核酸检测法(Seeplex RV15)对15种呼吸道病毒进行检测;使用传统方法(间接免疫荧光法和特异性抗原法)对9种呼吸道病原体进行检测;用实时荧光定量-PCR方法进行确认.对检测结果进行统计学分析,并进行临床应用评价.结果 171例CAP患者实时荧光定量-PCR方法的病毒检测阳性率为35.7％ (61/171),其中甲型流感病毒(FluA)、乙型流感病毒(FluB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)、人偏肺病毒(hMPV)占所有检出病毒的90.5％,平均年龄为49.17岁.实时荧光定量-PCR方法对口咽拭子和鼻咽拭子呼吸道病毒检测的阳性率分别为31.6％和33.9％,两种标本类型差异无统计学意义(Kappa=0.714,P＜0.001;McNemar x2=0,P=1.000).xTAG(R) RVP和Seeplex RV15两种多重呼吸道病毒核酸检测技术对342份标本病毒检测阳性率分别为32.5％与29.5％,两种方法的结果一致率为85.4％(292/342)(Kappa=0.66).传统方法阳性率是14.0％.与Seeplex RV15及传统方法相比,xTAG(R) RVP具有更高的敏感度(93.3％)、符合率(92.4％)和阴性预测值(96.9％),与实时荧光定量-PCR一致率高(Kappa=0.83).结论 液态芯片法优于传统方法和普通多重呼吸道病毒核酸检测法,可作为CAP病毒检测的常规方法.     

呼吸道病毒检测与临床意义

95%的急性上呼吸道疾病和大部分的下呼吸道疾病是由病毒所引起,呼吸道病毒检测在加强小儿呼吸道疾病病原学诊断、有效防止交叉感染及抗生素的滥用、加强流感的流行病学监测及疫苗的研制等方面具有深远的临床意义.该文就目前呼吸道病毒检测的常用方法及其临床意义加以简述.     

7692例呼吸道感染患儿甲乙流病毒检测现况分析

目的 了解贵州省人民医院白云分院呼吸道感染患儿甲乙流病毒检测情况。方法 回顾性分析2019年4～12月在贵州省人民医院白云分院进行甲乙流病毒检测的患儿检测结果及其流行病学特点。结果 共有7692例患儿进行了甲乙流病毒检测,检出阳性率为15.95%,其中甲型流感病毒和乙型流感病毒检出率分别为13.38%和2.57%。检出阳性率存在年龄和季节分布特点,5岁以上的儿童检出率最高,冬季检出率可高达22.20%。结论 呼吸道感染患儿流感病毒检测阳性率较高,并且具有一定的年龄易感性和季节分布特点,医院、社区、学校和家庭应根据其特点做出针对性防治策略。     

鼻炎／鼻窦炎患儿鼻腔灌洗液病毒病原学检测及其细胞学分析

目的 了解鼻炎/鼻窦炎患儿呼吸道病毒包括新发现呼吸道病毒博卡病毒（HBoV）、人类偏肺病毒（hMPV）感染流行趋势,并分析病毒感染与嗜酸性粒细胞计数是否具有相关性.方法 采用PCR及RT-PCR技术分别进行DNA及RNA病毒检测,并对标本进行细胞学分类计数.结果 在95份标本中,30份检出病毒阳性,阳性率为31.58％,其中腺病毒（ADV）的检出率最高,为9.47％.病毒检测阳性组的嗜酸性粒细胞数明显高于病毒检测阴性组（P＜0.05）.结论 鼻炎/鼻窦炎患儿鼻腔灌洗液中除了能检测到以ADV、RhV为主的常见呼吸道病毒外,新发现呼吸道病毒HBoV也有较高的检出率;病毒感染后鼻腔灌洗液中嗜酸性粒细胞增多,致鼻呈超敏状态,是否与病毒诱发喘息有关值得进一步研究.     

探讨护患干预在小儿呼吸道标本采集中的意义

目的:探讨护理干预在小儿呼吸道标本采集中的意义。方法:回顾性分析我科2015年10月到2016年3月因呼吸道感染住院患儿的临床资料,对接受呼吸道病原检测的患儿实施护理干预。结果:563例患儿住院患儿中有512例接受呼吸道病原检测,病毒检测阳性率高达32%,无一例因呼吸道采集标本而投诉,患儿家属满意。结论:通过护理干预提高了患儿及家长进行呼吸道病原检测的依从性,可早期明确诊断,减少抗生素和激素的使用,减少并发症,促进患儿早日康复。     

老年人呼吸道合胞病毒感染32例临床观察

目的 了解冬春季节兰州地区因急性呼吸道感染住院的老年患者呼吸道合胞病毒感染状况。方法 2003年11月1日至2004年4月30日，对兰州地区3所三甲医院呼吸科年龄65岁或以上的318例因急性呼吸道感染而住院治疗的老年患者，通过间接醇联免疫吸附实验（ELISA，定量法）检测血清中呼吸道合胞病毒（RsV）特异性IgM抗体。结果 318例患者中有32例（32／318，10．1％）检测出呼吸道合胞病毒IgM抗体阳性。32例病毒检测阳性患者中有6例（6／32，18．8％）同时培养出致病细菌。结论 呼吸道合胞病毒是兰州地区冬春季节引起老年人急性呼吸道感染的重要病原体。部分患者同时合并细菌感染。     

小儿呼吸道感染病毒病原学研究

为了解近年来南宁地区小儿呼吸道感染病毒的流行趋势，采用桥联酶标法，对２６５例急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物进行呼吸道６种常见病毒检测，同时采用ＥＬＩＳＡ法检测轮状病毒抗原。     

2019-nCoV检测方法的研究进展

新型冠状病毒(2019-nCoV)是一种具有极高传染性的呼吸道RNA病毒,由于尚未存在批准上市的疫苗用于预防,为了提高疾病的确诊率诊断和改善治疗效果,避免扩散,病毒的筛查检测工作极为关键。本文综述了2019-nCoV的核酸检测技术、免疫学检测技术和联合诊断的实验室和临床方法,以期为病毒检测和疾病防控提供参考。     

儿童急性呼吸道病毒感染发生率和空气污染相关性

目的 对儿童急性呼吸道病毒感染发生率和空气污染相关性分析.方法 在该院2016年1—12月急性呼吸道病毒感染门诊接收的呼吸道病毒检测结果 为阳性患者中,随机选取1200例作为研究对象,并实施分析当地空气质量检测数据,分析儿童急性呼吸道病毒感染发生率和空气污染相关性.结果其中与RSV感染关系最为密切的是PM2.5的浓度,而PM2.5、NO2、SO2浓度与RSV感染具有密切相关性(r=0.796、0.768、0.642,P=0.002、0.003、0.023).结论 儿童急性呼吸道病毒感染中,其检测结果显示为PIV-3和RSV,和PM2.5、RSV感染具有密切关系的是PM2.5、NO2、SO2浓度,由此可见儿童急性呼吸道病毒感染发生率和空气污染密切相关.     

908例急性下呼吸道感染住院儿童病毒病原学研究

目的:分析桂东地区住院急性呼吸道感染患儿病毒特异性抗体(IgM)检测结果,探讨临床儿童急性呼吸道感染病毒病原学情况,而提供病原学诊断依据,指导临床诊断和治疗。方法:选择急性呼吸道感染患儿,取其血液用XK2100生物芯片进行检测筛查4种常见呼吸道病毒的特异性抗体(IgM),包括呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IV)及副流感病毒(PIV),对检测标本阳性的病例进行统计分析。结果:908份标本中有235份检出了病毒特异性抗体(IgM)阳性,总检出率为25.88%,其中ADV最为常见,检出率为20.26%,其次为IV(9.14%),RSV(3.63%),PIV(1.76%)。检出率在男女之间差异无统计学意义(P>0.05)。病毒阳性检出率在各年龄组之间差异有统计学意义(χ2=92.549,P<0.001),以4～5岁年龄组检出率最高。病毒总检出率在四季分布差异有统计学意义(χ2=101.011,P<0.001),以夏季检出率最高。结论:病毒病原在桂东地区儿童ALRTI中占重要地位,其中ADV、IV是主要病毒病原,病毒检出率以4～5岁年龄组检出率最高;夏季病毒总检出率高于其他季节。     

呼吸道合胞病毒检测技术的研究进展

呼吸道合胞病毒(RSV)是世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的主要病原体,可引起严重的呼吸道疾病。但感染后与其他呼吸道感染有相似的临床表现和X线胸片特征,不易鉴别。因此,需要快速准确的方法诊断RSV感染,这将有助于感染的控制,改善预后。目前实验室的检测方法主要有传统检测技术和分子生物学技术。     

贵阳地区儿童重症社区获得性肺炎肺泡灌洗液病原及药敏分析

目的分析贵阳地区儿童重症社区获得性肺炎支气管肺泡灌洗液（BALF）病原学分布及耐药特点。方法收集989例重症社区获得性肺炎患儿临床资料，将支气管肺泡灌液采用支气管镜取出进行细菌培养、病毒以及肺炎支原体(MP)检测。结果（1）989例重症社区获得性肺炎患儿病原检出阳性716例，阳性率72.40%，细菌、病毒、支原体检出率分别33.27% （329例）、22.45%（222例）、31.45%（311例）。（2）细菌感染中的肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌为最为常见的革兰阳性菌株(G+)；而肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌为最为常见的革兰阴性菌株(G-)。培养菌株对青霉素类、红霉素、第1、2、3代头孢类抗生素有较高的耐药性，对头孢吡肟、拉氧头孢、哌拉西林、左氧氟沙星有较高的敏感性，对亚胺培南、万古霉素、利奈唑烷均无耐药发生。（3）病毒感染检出222例，其中呼吸道合胞病毒131例，腺病毒检测49例，流感病毒6例（A型2例，B型4例），副流感病毒36例（1型3例、2型4例、3型29例），病毒检出率以0～12月龄组最高，RSV、ADV感染主要集中在冬春季节。（4）肺炎支原体检出阳性率31.45%（311例），肺炎支原体检出率以3～5岁组最高。结论贵阳地区重症肺炎中肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌为重要的细菌病原。重要病毒为腺病毒和呼吸道病毒为主，1～12月龄组的病毒感染检出率比较高。     

发热与不发热呼吸道疾病成人患者流感的检测

目的应用快速筛查法对发热及不发热的成人呼吸道疾病患者的甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)进行检测并结果分析,以了解流感病毒的流行及分布情况,为流感的防治奠定基础。方法对860例不发热呼吸道疾病成人患者和发热门诊407例发热成人患者鼻咽分泌物样本进行Flu A和Flu B的快速筛查检测,并对检测结果进行统计学分析。结果不发热病人Flu A检出率为9.5%,Flu B检出率为4.4%,发热病人Flu A检出率为32.9%,Flu B检出率为5.2%。发热病人的Flu A检出率明显高于不发热病人(P<0.01),而Flu B检出率二者则没有显著差异(P>0.05)。结论 Flu A和Flu B是呼吸道感染的重要病原体,并且能够共同流行,发热是其感染的重要症状之一,应用流感快速筛查的方法能够为临床提供一定的早期诊断依据。     

广东省中山市急性发热呼吸道症候群病毒病原学研究

目的 获得中山市急性发热呼吸道症候群病毒病原谱,为疾病防控及临床诊疗提供科学依据。方法 2017年12月至2018年11月,选择中山市4家医疗机构作为哨点监测医院,在门诊开展季节性流感等发热呼吸道症候群监测。采用多重RT-PCR方法检测8 种呼吸道感染病毒。结果 累计检测样本1 011份,368份（36.4%）检出病毒阳性。不同病毒检出阳性率依次为：流感病毒（Flu）14.0%,腺病毒（AdV）6.3%,鼻病毒（hRV）5.9%,呼吸道合胞病毒（RSV）4.9%,冠状病毒（hCoV）3.1%,副流感病毒（PIV）2.4%,人偏肺病毒（HMPV）2.0%和博卡病毒（hBoV）1.2%。与16岁及以上人群相比,16岁以下人群病毒检出率更高（27.3% VS 44.7%,χ²=32.867, P<0.001),病毒感染种类更加多样化。5岁及以下婴幼儿8种病毒均有检出,其中呼吸道合胞病毒（9.2%,37/404）、腺病毒（9.7%,39/404）检出率最高。6~15岁人群,流感病毒检出率(29.8%)最高。除副流感病毒和博卡病毒外,其余病毒不同月份检出率存在差异。结论 流感病毒、腺病毒、鼻病毒和呼吸道合胞病毒是中山市发热呼吸道症候群的主要病原体;年龄组越小,病毒多样性越明显;不同病原体其感染季节不尽相同,但多数病原体以冬季流行感染为主。     

呼吸道非典型病原体检测技术的应用与评价

目的:应用多种检测方法对临床常见呼吸道非典型病原体进行检测,并对检测结果进行分析和方法评价,为临床提供呼吸道感染性疾病病因诊断依据。方法:应用APAAP法、PCR法检测常见4种8型呼吸道病毒和MP病原,同时应用GICA法对流感病毒、快速培养法对MP进行检测,并分析比较检测结果。结果:441例样本中,病原体检出率为59.2%,其中混合感染率占阳性患者的36.8%。其中应用GICA法检测Flu A和Flu B与APAAP法总体一致率分别达90.0%和76.9%(Kappa值<0.75,一致性不理想),培养法检测MP与PCR法总体一致率达88.4%,(Kappa值<0.75,一致性不理想)。结论:非典型病原体是成人呼吸道感染的重要病原体,应用APAAP法、PCR法的方法能够为临床提供早期诊断和正确治疗的依据,但GICA法的检测敏感性和MP快速培养法的特异性有待于改进。     

2013年某院儿童哮喘急性发作住院患儿的病原特点分析

目的：了解2013年某院儿童支气管哮喘急性发作的病原分布特点。方法回顾性分析2013年该院收治的哮喘急性发作的447例住院患儿的临床资料,采用 SPSS 19．0进行数据分析。结果细菌检出率43．8％,其中肺炎链球菌检出率25．5％,居细菌检出首位;25例患儿完成了肺泡灌洗液细菌培养,阳性率44．0％,与痰培养检出结果差异无统计学意义（ P＞0．05）;呼吸道常见7种病毒检出率27．3％,其中呼吸道合胞病毒检出率18．8％,居常见7种病毒检出首位,小于1岁组病毒检出率较高,各年龄组检出率差异有统计学意义（ P＜0．05）;肺炎支原体检出率23．5％,未检出肺炎衣原体。结论该院儿童哮喘急性发作与呼吸道感染密切相关,细菌检出率在各年龄组均较高。     

病毒感染性眼病病原学诊断的研究进展

多种病毒可导致眼部疾病，包括腺病毒、人类疱疹病毒、人类T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）及新发现的严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）等。这类疾病的鉴别诊断较困难，容易被误诊和漏诊，导致严重的组织损伤和视觉损伤。腺病毒、单纯疱疹病毒1型和水痘-带状疱疹病毒相关眼病的诊断中，病原学诊断可作为一种强有力的辅助诊断工具；而在单纯疱疹病毒2型、巨细胞病毒、EB病毒、人类疱疹病毒6型和7型、人类疱疹病毒8型、HTLV-1和SARS-CoV-2相关眼病的诊断中，病原学诊断则发挥着主导作用。病毒培养、免疫组织化学或免疫荧光法及以PCR为代表的病毒基因诊断法是三种主要的病原检测手段，其中PCR技术检测快速、操作便捷、敏感度和特异度高，成为眼科病毒学诊断中最重要的工具。     

安宁地区住院患儿呼吸道病原体七联检阳性检测结果分析

  目的  分析安宁地区住院患儿呼吸道感染病毒病原体阳性检测结果。  方法  选择2019年9月至2022年2月安宁地区住院患儿1 766例为研究对象,根据年龄分为 < 6月龄组、6月龄～4岁组、4～14岁组;根据新冠疫情防控,2019年9月至2020年2月前为公众防护前,2020年2月后公众防护后;采集所有患儿鼻咽拭子标本,采用直接免疫荧光法测定甲型流感病毒抗原、乙型流感病毒抗原、呼吸道合胞病毒抗原、腺病毒抗原、副流感病毒Ⅰ型抗原、副流感病毒Ⅱ型抗原、副流感病毒Ⅲ型抗原7种呼吸道病原体,统计分析患儿呼吸道病原体检出情况。  结果  1 766例患儿呼吸道感染病毒病原学检出阳性584例,阳性率为33.07%,呼吸道病毒病原体中检出主要以呼吸道合胞病毒（316例/17.89%）、腺病毒（90例/5.10%）、副流感病毒Ⅲ型（82例/4.64%）为主;患儿呼吸道感染病毒病原体阳性主要集中在 < 6月龄组、6月龄～4岁组,检出阳性率分别为111例（34.69%）、327例（34.31%）,不同年龄段呼吸道感染病原体检测阳性率,差异有统计学意义（χ2 = 8.392,P = 0.031）;公众防护后甲型流感病毒检出阳性率0.29%低于公众防护前5.94%,差异有统计学意义（P < 0.05）;公众防护前后乙型流感病毒抗原、腺病毒抗原、副流感病毒Ⅰ型、副流感病毒Ⅱ型、副流感病毒Ⅱ型检出率差异无统计学意义（P > 0.05）。  结论  安宁地区住院患儿呼吸道感染病毒病原学检出率较高,呼吸道合胞病毒是主要病原体,公众防护后甲型流感病毒检出阳性率明显下降,故继续做好公众防护对防范甲型流感亦有重要意义。