miR-342-5p 调控靶基因Merlin 表达促进肝细胞癌侵袭转移的实验研究

目的：探讨miR-342-5p及其可疑靶基因Merlin在肝细胞癌（HCC）中表达及意义。 方法：用qRT-PCR检测miR-342-5p和Merlin mRNA在HCC组织与癌旁组织，以及正常肝细胞系与各种不同HCC细胞系中的表达；用重组慢病毒包装质粒pGCSIL-GFP-miR-342-5p或空载体（阴性对照）转染HCCLM3细胞，以无处理的HCCLM3细胞作为空白对照，划痕愈合及Transwell实验观察细胞侵袭运动能力；Western blot法检测细胞中Merlin蛋白的表达。采用双荧光素酶基因报告系统，将含野生型或突变型Merlin基因3''UTR质粒（psiCHECK-Merlin）分别与pGCSIL-GFP-miR-342-5p、空载体（阴性对照）共转染或单独转染（空白对照）HCCLM3细胞后，检测各组细胞荧光素酶活性。 结果：与癌旁组织比较，HCC组织中miR-342-5p表达明显上调，Merlin mRNA表达明显下调（均P<0.05）；HCC组织中，血管侵犯组较无血管侵犯组miR-342-5p表达明显上调，Merlin mRNA表达明显下调（均P<0.05），且miR-342-5p与Merlin mRNA表达呈负相关（r2=5.364，P<0.05）。各HCC细胞系中miR-342-5p表达均明显高于正常肝细胞系，且miR-342-5p的表达随HCC细胞系的侵袭性增高而上调，而Merlin mRNA表达则呈相反趋势（均P<0.05）。与空白对照组及阴性对照组比较，HCCLM3细胞转染pGCSIL-GFP-miR-342-5p质粒后，细胞侵袭运动能力明显下降（均P<0.05），而Merlin蛋白表达明显上调。psiCHECK-Merlin野生型与pGCSIL-GFP-miR-342-5p质粒共转染HCCLM3细胞后，细胞的荧光素酶活性较其阴性对照组或空白对照组明显降低（P<0.05），而psiCHECK-Merlin突变型与pGCSIL-GFP-miR-342-5p质粒共转染HCCLM3细胞后，细胞的荧光素酶活性与其空白对照组或阴性对照组无统计学差异（P>0.05）。 结论：Merlin是miR-342-5p的靶基因，miR-342-5p可能通过调控MerlinmRNA的表达促进肝细胞癌侵袭转移。     

miR-200a-3p在胆囊癌中的表达及其作用与机制

背景与目的 miR-200a-3p参与了多种肿瘤的生物学过程的调控,但在不同肿瘤中起着不同的作用（促癌基因或抑癌基因）。目前,其在胆囊癌中的作用尚不清楚。因此,本研究探讨miR-200a-3p在胆囊癌中的表达及其对胆囊癌细胞生物学功能的影响与机制。方法 采用qRT-PCR法测定32例胆囊癌及癌旁组织、胆囊癌细胞系（GBC-SD、SGC-996、NOZ）及正常人胆囊上皮细胞系HGBEC中miR-200a-3p的表达。采用Lipofectamine? 3000试剂盒将GBC-SD及NOZ细胞系分别转染miR-200a-3p模拟物（miR-200a-3p过表达组）、miR-200a-3p抑制物序列（miR-200a-3p沉默组）及阴性对照序列（阴性对照组）。MTT实验测定细胞增殖能力,Transwell实验测定细胞侵袭能力,MiRBD/Targetscan7.2/starBase2.0/miRtarbase网站预测miR-200a-3p的下游靶基因,并采用荧光素酶实验验证。Western blot检测上述3组细胞中靶基因与上皮间质转化（EMT）相关分子蛋白（E-cadherin、vimentin）的表达。结果 qRT-PCR结果显示,胆囊癌组织中miR-200a-3p表达量低于癌旁组织,所有胆囊癌细胞系中miR-200a-3p表达量低于正常人胆囊上皮系HGBEC（均P<0.05）。GBC-SD及NOZ细胞系转染后,与各自的阴性对照组比较,两种细胞的miR-200a-3p过表达组miR-200a-3p表达量明显升高、增殖与侵袭能力明显减弱,两种细胞的miR-200a-3p沉默组miR-200a-3p表达量明显降低、增殖与侵袭能力明显增强（均P<0.05）。在线网站预测显示,miR-200a-3p和Notch2存在潜在结合位点;荧光素酶实验显示,miR-200a-3p导致Notch2野生型质粒pmirGLO-Notch2-3''UT WT荧光素酶活性明显降低,而miR-200a-3p对Notch2突变型质粒pmirGLO-Notch2-3''UTR MUT的荧光素酶活性没有影响。Western blot结果显示,两种细胞的miR-200a-3p过表达组与各自的阴性对照组比较,E-cadherin蛋白表达量升高、vimentin蛋白与Notch2蛋白表达量降低,而3种蛋白在两种细胞的miR-200a-3p沉默组则呈相反的变化（均P<0.05）。结论 miR-200a-3p在胆囊癌中表达降低,并可能起了抑癌基因的作用,其抑制胆囊癌细胞增殖和侵袭的机制可能与靶向下调Notch2从而抑制EMT过程有关。     

肝内胆管癌细胞系ICC-9810与肝细胞癌细胞系SMMC-7721蛋白质组学比较

目的 比较肝内胆管癌细胞系ICC-9810、肝细胞癌细胞系SMMC-7721及正常肝细胞系L02的蛋白质表达,筛选胆管细胞癌和肝细胞癌的标志蛋白.方法 收集体外培养的肝内胆管癌细胞系ICC-9810、肝细胞癌细胞系SMMC-7721及正常肝细胞系L02细胞,细胞裂解液处理后提取蛋白.应用表面增强激光解吸离子化(SELDI)蛋白质芯片技术同时使用IMAC3和WCX2两种芯片检测肝内胆管癌细胞系ICC-9810、肝细胞癌细胞系SMMC-7721及正常肝细胞系L02的蛋白质谱.用PBSII-C型蛋白质芯片阅读机读取数据,采用Proteinchip Software 3.0.2软件分析数据.结果 与L02细胞比较,有12个蛋白质在两种肝癌细胞系中均出现明显的变化,其中4个蛋白高表达,8个蛋白低表达.比较两种肝癌细胞系的蛋白质谱,发现7个蛋白在ICC-9810细胞中高表达,10个蛋白低表达;11个蛋白在SMMC-7721细胞中高表达.在L02和ICC-9810细胞中去磷酸化蛋白17 175 Da表达较多,而在SMMC-7721细胞中磷酸化蛋白17 255 Da表达较多.结论 肝内胆管癌、肝细胞癌与正常肝细胞的差异蛋白表达为寻找肝肿瘤标志物提供了重要线索.17 255 Da蛋白的磷酸化/去磷酸化可能与肝细胞癌的发生有关.     

miR-338—3p在肝癌组织中的表达及意义

目的 检测miRNA 在肝癌中的表达谱,探讨miR-338-3p 在肝癌组织中的表达及与肝癌临床病理参数的关系和意义.方法 采用液相芯片技术分析20 对肝癌组织与其癌旁组织中114 种miRNA 表达谱的差异.Real-time RT-PCR 验证另36 对肝癌组织中miR-338-3p 下调表达及其与肝癌临床参数的相关性.结果 31 种miRNA 在肝癌组织与非肝癌组织间呈现差异表达,其中12 种miRNA 在癌组织的表达较癌旁组织上调,19 种miRNA 在癌组织中表达下调.miR-338-3p下调表达程度与肝癌恶性程度、肿瘤分化程度、肝内和肝外转移及门静脉癌栓有关,与患者性别、AFP、HBsAg、是否合并肝硬变等不相关（P 〈 0.01）.miR-338-3p 的表达量肝癌组织低于非肿瘤组织,转移性肝癌低于非转移性癌组织,miR-338-3p 的表达量随着肿瘤级别的增加而逐近降低（P 〈0.01）.结论 肝癌组织与癌旁组织之间存在miRNA 差异表达,其中miR-338-3p 下调表达程度与肝恶性行为相关.     

SIX4和miR-103a-3p在胆囊癌组织中的表达及其对胆囊癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 探究SIX同源盒蛋白4（SIX4）、微小RNA（miR）-103a-3p在胆囊癌组织中的表达情况,以及二者对胆囊癌细胞增殖、侵袭的影响。方法 胆囊癌组织及癌旁组织取自永州市中心医院2019年10月至2021年9月32例接受手术治疗的胆囊癌患者,并将体外培养的胆囊癌细胞系GBC-SD分为对照组、mimic NC组、miR-103a-3p mimic组、miR-103a-3p mimic+pc DNA3.1组、miR-103a-3p mimic+SIX4组。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测SIX4 mRNA、miR-103a-3p水平;蛋白印迹法检测SIX4、增殖细胞核相关抗原Ki-67、增殖细胞核抗原（PCNA）以及基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP9蛋白水平;CCK-8法检测细胞增殖情况;Transwell检测细胞侵袭情况。双荧光素酶验证SIX4 mRNA 3’UTR与miR-103a-3p的结合作用。结果 与癌旁组织相比,胆囊癌组织中SIX4 mRNA水平升高,miR-103a-3p水平降低（P<0.05）。miR-103a-3p靶向负调控SIX4。与对照组、mimic NC组比较,miR-103a-3p mimic组细胞中SIX4 mRNA和蛋白水平,OD₄₅₀,侵袭数量,Ki-67、PCNA、MMP2、MMP9蛋白水平降低,miR-103a-3p水平升高（P<0.05）;与miR-103a-3p mimic+pc DNA3.1组比较,miR-103a-3p mimic+SIX4组上述各项指标均被逆转。结论 胆囊癌组织中SIX4水平升高、miR-103a-3p水平降低,过表达miR-103a-3p可能通过靶向抑制SIX4表达,从而抑制胆囊癌细胞增殖、侵袭。     

miR-18a-3p在肝癌中的表达及其调控ADCY1表达对肝癌细胞侵袭及增殖的影响

背景与目的 研究表明多种microRNA（miRNA）可能在肝癌的发生发展中发挥重要作用,其作用机制仍值得进一步研究和探讨。因此,本研究从已报道的肝癌差异表达miRNA中进一步筛选关键miRNA,并验证和探讨其作用机制。方法 从已发表的研究中筛选出肝癌组织及肝癌患者血清/血浆中与正常肝组织及正常血清/血浆中共同的差异表达miRNA;用qRT-PCR在正常肝细胞与肝癌细胞中对筛选出的目标miRNA表达情况进行验证;用过表达和抑制的方法观察目标miRNA对肝癌细胞侵袭能力（Transwell实验）与增殖能力（MTT实验）的影响,以及在30例临床标本中检测目标miRNA的表达并通过KM plotter网站分析其对肝癌患者生存的影响;通过miRDB和GEPIA数据库预测和分析目标miRNA的靶基因,并用逆转实验和双荧光素酶报告实验进一步验证。结果 在肝癌组织（vs.正常肝组织）及肝癌患者血清/血浆（vs.正常人血清/血浆）中共同高表达的miRNA有4个（miR-18a-3p、miR-221-3p、miR-222-3p、miR-224-3p）,共同低表达的miRNA有2个（miR-26a-3p、miR-125b-3p）。qRT-PCR实验证实,与正常肝细胞比较,miR-18a在肝癌细胞中高表达,miR-26a在肝癌细胞中低表达（均P<0.05）。过表达/抑制miR-18a-3p表达能促进/降低肝癌细胞的侵袭及生长能力（均P<0.05）,而过表达/抑制miR-26a-3p对肝癌细胞的侵袭及生长能力影响无不法确定。分析结果显示,ADCY1是miR-18a-3p的靶基因,过表达ADCY1能部分逆转miR-18a-3p对肝癌细胞的上述作用,同时,表达上调的miR-18a-3p能通过结合到ADCY1 mRNA 3''UTR抑制ADCY1的表达。结论 miR-18a-3p可能在肝癌的发生发展中起了关键作用,其在肝癌中表达上调,并能通过抑制下游靶基因ADCY1的表达增强进肝癌细胞的侵袭和增殖能力。     

直肠癌中差异表达的microRNA及其与预后因子的关系

目的：检测直肠癌组织中差异表达的microRNA（miRNA）,并分析其与预后因子的关系。 方法：选20例直肠癌患者手术所得癌组织标本与癌旁组织,用q-PCR方法筛选在癌组织与癌旁组织中有差异表达的miRNA以及相关的预后因子。 结果：筛选得到26个在直肠癌组织中有差异表达的miRNA,其中15个miRNA表达上调,11个表达下调。相关分析显示,下调的miR-4770、miR-4790-5p与CK20表达呈负相关;上调的miR-182、miR-125a-5p、miR-126与p53表达呈正相关、miR-143和k-ras呈负相关、miR-9与vilin基因呈负相关（均P<0.05）。 结论：直肠癌组织中差异表达的miRNA与预后因子密切相关,可作为直肠癌诊断或预后判断的生物标记。     

膀胱癌组织miR-361-5p、BTF3表达变化及临床意义

目的检测膀胱癌组织中微小RNA-361-5p(miR-361-5p)、通用转录因子3(BTF3)的表达水平, 并探讨其临床意义。方法选取2015年3月至2017年6月本院收治的74例膀胱癌患者为研究对象, 所有患者均行根治性膀胱全切术, 收集癌组织及癌旁正常组织, 采用荧光定量PCR技术检测miR-361-5p、BTF3 mRNA的相对表达量, 采用免疫组化法检测BTF3蛋白的表达情况, 根据细胞染色强度和阳性细胞比例进行定量分析, 将患者分为miR-361-5p高表达组和低表达组、BTF3高表达组和低表达组, 分析miR-361-5p、BTF3表达水平与膀胱癌患者临床病理参数的关系, 分析患者的3年生存情况。结果膀胱癌组织中miR-361-5p水平明显低于癌旁组织(P<0.05), BTF3 mRNA水平明显高于癌旁组织(P<0.05);膀胱癌组织中BTF3蛋白的阳性表达率为62.16%(46/74), 癌旁组织中BTF3蛋白的阳性表达率为17.57%(13/74), 差异有统计学意义(χ2=30.694, P<0.001);miR-361-5p、BTF3表达水平与...     

MicroRNA-766-3p靶向调控SIRT6抑制肝癌进展的实验研究

目的:探究miR-766-3p是否可通过调节靶基因SIRT6影响肝细胞癌(HCC)的发生与发展进程。方法:RT-PCR及Western blot检测miR-766-3p及SIRT6在HCC组织及癌旁组织中的表达;CCK-8、流式凋亡检测技术、划痕实验及Trans well小室检测miR-766-3p/SIRT6对HCC细胞生长、凋亡、转移及侵袭能力的影响;荧光报告基因实验及western blot技术检测miR-766-3p对SIRT6表达的影响。结果:miR-766-3p在HCC组织中低表达,而SIRT6高表达。过表达miR-766-3p通过与SIRT6的3’UTR区结合降低SIRT6的表达。上调miR-766-3p明显抑制HepG2细胞增殖、转移及侵袭能力,促进细胞凋亡;但SIRT6过表达后终止miR-766-3p的以上作用。结论:miR-766-3p通过靶向负调控SIRT6的表达抑制HCC进展。     

MicroRNA-7对HCCC9810细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的探讨MicroRNA-7(miR-7)对于肝内胆管癌细胞HCCC9810增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法利用实时定量PCR对于肝内胆管癌病人的癌组织和癌旁组织,以及正常肝内胆管上皮细胞和肝内胆管癌细胞HCCC9810中miR-7表达水平的验证;培养人肝内胆管癌细胞HCCC9810,将其分为研究组(miR-7 mimics)和阴性对照组(miR-7 NC),分别进行miR-模拟物以及miR-阴性序列的转染,效率验证后,通过CCK-8实验,EDU实验,克隆形成实验,以及划痕和Transwell实验分别验证两组细胞的增殖、迁移和侵袭的能力。结果肝内胆管癌病人中癌组织miR-7的表达水平低于癌旁组织,肿瘤细胞HCCC9810 miR-7表达水平低于正常胆管上皮细胞;细胞转染效率验证显示,miR-7 mimics组HCCC9810细胞中miR-7的相对表达水平远高于miR-7 NC组,差异具有统计学意义(P<0.05);与miR-7NC相比,miR-7 mimics组细胞的增殖、迁移以及侵袭能力被明显抑制,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-7在肝内胆管癌中表达水平下调,而且过表达miR-7能够抑制肿瘤细胞的增殖、迁移以及侵袭过程。     

良恶性梗阻性黄疸胆汁,血清免疫球蛋白和补体测定及其意义

文章研究良恶性梗阻性黄疸（梗黄）胆汁、血清免疫球蛋白和补体（Ｃ）水平的变化。研究分４组：对照组（Ａ组，ｎ＝１０），非黄疸性胆道结石组（Ｂ组，ｎ＝１２），良性内组（Ｃ组，ｎ＝１４）和恶性梗黄组（Ｄ组，ｎ＝７）。结果显示：（１）和Ａ组比较，Ｃ组血清ＩｇＭ和Ｄ组血清Ｃ３升高；（２）和Ｂ组比较，Ｃ组胆汁Ｃ３升高；和Ｂ、Ｃ组比较，Ｄ组胆汁ＩｇＭＣ３和Ｃ４下降。结果提示：恶性梗黄胆道体液免疫功能和补体经典途径     

损伤性高位胆管狭窄41例报告

目的 总结损伤性高位胆管狭窄外科治疗的经民教训。方法 性调查４１例损伤性高位胆管狭窄患者的治疗方法，并发症及远期疗效。结果 采用胆肠吻主３８例，无手术死亡。其中肝管空肠Ｒｏｕｘ－Ｙ吻合术２６例，随访２～１０年，优良率８３．３％；肝管十二指肠吻合１２例，随访３年以上，优良率７０％。结论 肝管空肠Ｒｏｕｘ－Ｙ吻合术是治疗损伤性高位胆管狭窄的最佳方式，肝管十二指肠吻合术对高危胆管狭窄患者仍然是有效方法之     

胆囊切除术后胆汁漏的预防和处理

报告胆囊切除术后胆汁漏２５例,主要原因为肝外胆管、副肝管、迷走胆管损伤、肝外胆管微小破口,胆囊管结扎不完善,胆总管探查Ｔ管旁 缝合胆管的针眼漏。预防措施：主要是避免胆管损伤,完善处理胆囊管,迷走胆管和细小的副肝管可以结扎,关腹前仔细检查手术野。术后胆汁漏、行ＥＲＣＰ检查,有助于明确部位和原因。胆漏并腹膜炎、疑有胆管损伤、胆囊管残端端漏或肝下大量积液、应及时开腹再手术。     

Zur operativen Behandlung von Gallengangscysten im Kindesalter

Zusammenfassung Es wird über neun Fälle einer cystisch-zylindrischen Gallengangserweiterung berichtet, die in den Jahren 1970 bis 1984 an der Kinderchirurgischen Klinik im Dr. von Haunerschen Kinderspital der Universität München operiert wurden. Das Alter der Patienten betrug im Mittel 4,2 Jahre. Als optimales diagnostisches Vorgehen hat sich die Oberbauchsonographie, ergänzt durch eine hepato-biliäre Funktionsszintigraphie oder Computertomographie, bewährt. Die Operationsmethode der Wahl besteht in einer möglichst totalen Excision der Cyste mit nachfolgender End-zu-End-Anastomose oder einer Hepatico-Jejunostomie nach der Roux-Y-Technik. Postoperative Frühkomplikationen wie Cholangitis wurden nicht gesehen, als Spätkomplikation wurde bei einem Patienten eine Anastomosenstenose nach primärer Hepato-Choledochostomie gesehen.

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Operative treatment of bile duct cysts in childhood

Summary Nine cases of cystic and cylindric bile duct dilatation are discussed. They were treated at the Children's Surgical Hospital of the University of Munich from 1970 to 1984. The patients' mean age was 4.2 years. Upper abdominal sonography in combination with hepatobiliary functional scintigraphy or computer tomography has been proven the best diagnostic procedure. The operating procedure of choice is a total cyst excision followed by an end-to-end anastomosis or a hepatojejunostomy according to the RouxY-technique. There were no immediate postoperative complications such as cholangitis. In one case we found a stenosis of the anastomosis after primary hepatocholedochostomy.

     

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目的 了解我国当前对医源性胆管损伤外科治疗概况及胆管损伤治疗效果。方法 通过检索解放军医学图书馆中文生物医学期刊数据库（CMCC）从1995年1月至2000年1月全国各级期刊关于胆管损伤的论文,统计来自165个医疗单位2742例医源性胆管损伤。结果 统计显示胆管损伤的94％来自与胆囊有关的手术,以胆管横断伤为多（47％）,损伤类型时要为胆总管（44％）和肝总管（36％）,有40％为术中及时发现处理,胆管损伤修复手术因狭窄再手术占总数的23％,术中发现和术后发现及胆管修复的方式有明显的差异。结论 胆管损伤后期的修复防止狭窄是较困难的,调查修复方式显示术中发现的作胆管修补＋T管支撑引流,术后发现手术作胆管空肠吻合＋长期支撑的手术方式效果较好。     

肝管空肠吻合术治疗医源性胆管损伤伴狭窄

医源性胆管损伤是胆囊切除术严重的并发症之一.在LC迅速发展的今天,LC导致医源性胆管损伤的发生率较开腹胆囊切除术更高.2006年10月至2011年8月我中心采用肝管空肠吻合术治疗14例医源性胆管损伤患者,取得了良好的疗效,现报道如下. 1 资料与方法 1.1 一般资料 本组医源性胆管损伤患者14例,男6例,女8例;年龄28～62岁,平均年龄46岁.5例胆管损伤发生于开腹胆囊切除术,9例发生于LC.14例患者中,修复手术距胆囊切除术时间4个月至6年.4例患者带有T管.所有患者有急、慢性胆管炎表现,包括腹痛,伴或不伴发热,症状发作时均伴有黄疸.     

Biliary stones: treatment by shock-wave lithotripsy

Extracorporeal shock-wave lithotripsy has been introduced as a novel nonsurgical therapy for gallstone disease. To substantiate the initial results, more than 400 patients with biliary calculi have been treated. In selected patients with gallbladder stones, complete clearance of all stone fragments can be expected within 1 year in about 80%. In patients with bile-duct stones not amenable to endoscopic measures, sufficient stone fragmentation by extracorporeal shock waves was achieved in about 80%. Extracorporeal shock-wave lithotripsy is a safe and efficient therapy for selected patients with gallbladder calculi. For patients with bile-duct stones not amenable to endoscopic measures it offers a nonsurgical alternative.     

Zur Diagnostik und Therapie der Gallengangscysten beim Erwachsenen

Zusammenfassung Die Hauptproblematik der Gallengangscysten liegt heute in ihrer Therapie. Konservative Behandlungsmethoden eignen sich aufgrund der damit verbundenen Komplikations- und Letalitätsrate nur für vereinzelte Fälle. Die herkömmlichen operativen Verfahren mit einem inneren Anschluß der Cyste an eine Darmschlinge lassen das jetzt besonders beim Erwachsenen gut dokumentierte maligne Potential des Cystengewebes außer acht. Die moderne Aufteilung der Cysten nach Todani et al. [14] ermöglicht ein rationales Vorgehen für den Einzelfall unter Berücksichtigung der lokalen anatomopathologischen Verhältnisse sowohl des intrahepatischen als auch des extrahepatischen Gallengangssystems. Die Problematik von Klinik, Diagnostik und Therapie wird anhand von 6 eigenen Fällen besprochen.

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Diagnosis and treatment of bile duct cysts in adults

Summary Today the main problem of bile duct cysts is based on their optimal therapy. Conservative approaches only are fit for single selected cases because of the complications and lethality rate inherent to these methods. The usual operative treatment with internal derivation of the cyst by diversion to an intestinal loop does not take account the nowadays well documented risk of development of cancer in the cyst's tissue, mainly in the adult patient. The modern classification according to Todani et al. [14] offers the possibility for a selective approach with regard to the local anatomic-pathological relations found in the intrahepatic as well as in the extrahepatic biliary tree in such patients. The problems of the clinical picture, diagnosis and therapy are discussed on the basis of 6 cases seen at our centre.

     

肝胆胰术后胆汁漏21例处理体会

目的评估肝胆胰术后出现的各种胆汁漏的结局,分析其原因,提出预防和相应的治疗措施。方法回顾性分析我们治疗的肝胆胰术后胆汁漏21例,主要包括肝叶或半肝或多肝段切除后胆汁漏6例;各类开腹胆石病手术后7例;腹腔镜胆囊切除致右副肝管和迷走胆管损伤各1例;胆肠内引流术3例;胰十二指肠切除术后2例;ERCP和EST胆总管取石、胆总管十二指肠后段及胰腺段损伤1例。结果术后胆汁漏的主要原因是肝断面管道组织结扎不可靠,各种类型的肝外胆管损伤,胆囊管处理不满意,T管旁或针眼漏胆汁,胆肠吻合不完善等。21例术后胆汁漏病人中8例（38％）需要再次手术,术后8例均痊愈。21例术后胆汁漏病人中13例（62％）适合非手术治疗,其中12例痊愈;1例死于术后多器官功能衰竭,总体死亡率为5％（1／21）。结论肝胆胰手术中精细操作是预防术后胆汁漏的主要举措。当病人出现胆汁性腹膜炎、胆管损伤、肝下大量积液和经久不愈的胆汁漏时应及时手术,手术方式应根据具体情况决定,胆管修复、胆管支撑和腹腔引流是有效的治疗手段。     

地塞米松对单层培养的大鼠肝细胞分泌机能的影响

目的 研究地塞米松对大鼠肝细胞分泌机能的影响。方法 用Seglen两步灌注法从F344大鼠肝脏中灌注并以低温离心分离肝细胞，然后单层培养。在Willam's E培养基中加入地塞米松，通过位相差显微镜观察细胞形态；并通过荧光染料分泌实验及Rhodamin-Phallodin染色后荧光显微镜观察胆汁分泌机能和细胞骨架的改变。结果 培养基中加入地塞米松后，肝细胞毛细胆管样结构扩张，荧光染料在扩张的毛细胆管样结构中聚集，细胞骨架蛋白在毛细胆管样结构周围聚集。结论 地塞米松促进大鼠肝细胞胆汁分泌，导致肝细胞毛细胆管样结构扩张。