BmCPV-MAb／Fab复合物三维结构的初步研究

我国是世界上最大的茧丝绸生产国和供应国。然而，蚕病对养蚕业造成很大的危害。家蚕质多角体病毒(BmCPV)是引起蚕病的主要病原体之一，对该病毒的生化研究和三维结构研究，对于阐明病毒致病机理和进行生物防治具有重要意义。本实验室从1996年起开始应用单颗粒技术和分子生物学技     

家蚕质多角体病毒 (BmCPV)的结构研究

质多角体病毒(CPV)属于呼肠弧病毒科.已在200多种昆虫中发现有CPV感染.CPV在生物防治害虫中具有重要作用.而家蚕CPV(BmCPV)却是养蚕业的最严重的病源病毒.它的粒子形状为二十面体,其基因组由10条双链RNA组成.关于CPV的结构已有多种模型提出[1,2],但目前尚无定论.另外,CPV与其他呼肠弧科病毒一样,含有自己的RNA聚合酶.虽然有证据显示RNA聚合酶与其双链RNA紧密相连,但对于RNA聚合酶的分布位置尚不清楚.本文应用电镜观察和生化分析方法对BmCPV的结构进行了研究.     

透翅毒蛾核多角病毒超微结构的研究

透翅毒蛾多角体病毒病(Polyhedrosis disease)常发生于台湾初夏。如同其他种核多角体病毒,此病毒对透翅毒蛾族群动态扮演主要角色(Hostetter and Bell,1985)。此季节性之疾病的明显症状与其他昆虫之多角体病毒病相似(Mazzone,1985)。感染的幼虫先有下痢现象,甚至有脱肛发生,濒临死亡或已死的幼虫常倒悬树枝,然而濒临死亡或已死的蛹则体色变黑,停留在榕树叶的表面。     

家蚕质多角体病毒RDRP的免疫电镜定位研究

以原核表达BmCPV RDRP重组蛋白为抗原制备的兔抗血清为一抗,直径15nm山羊抗兔IgG 胶体金为二抗。应用3%多聚甲醛 0 1%戊二醛混和固定液、K4M低温包埋剂和紫外光聚合制备的样品进行免疫电镜观察,结果感染BmCPV(C)病蚕的中肠柱状细胞中,游离和病毒多角体中BmCPV的病毒粒子均能结合胶体金颗粒,平均标记率为25%左右,认为BmCPV(C) RDRP基因编码的蛋白应为BmCPV病毒的结构蛋白,位于病毒的衣壳上。其中一抗的使用浓度为1∶200,二抗的使用浓度为1∶40,可以获得较好的免疫标记效果和较少的非特异性标记。     

棉铃虫质型多角体病毒在寄主细胞中的复制

棉铃虫质型多角体病毒在寄主细胞中的复制郝宏京（中国农科院原子能研究所，北京１０００９４）应用电镜技术探讨棉铃虫质型多角体病毒（ＣＰＶ）在寄主细胞内的复制过程。采用健康棉铃虫饲毒后不同时间取材、超薄切片，电镜观察，直观地看到了棉铃虫ＣＰＶ复制的整个过程...     

美国粘虫(Pseudatia unipuncta)颗粒体病毒(Granulosis Virus)荚膜(Capsule)电镜观察方法的比较

本文介绍五种(扫描电镜观察、透射电镜直接观察、透射电镜旋转喷镀观察、透射电镜投影喷镀观察、透射电镜负染观察)观察美国粘虫颗粒体病毒荚膜的方法,并对这五种方法进行了比较,其中以用透射电镜直接观察为最简便、准确。几种观察方法相互配合,可以充分肯定美国粘虫颗粒体病毒荚膜长约350nμ,宽约200nμ,表面光滑呈卵园型。     

冷冻电镜单颗粒重构中病毒三维显示的校正

利用冷冻电镜显微技术和单颗粒三维重建方法获得BmCPV（家蚕质多角体）;CSBV（中蜂囊状幼虫病病毒）;C6/36DNV（C6/36浓核病毒）的三维结构体数据,用空间低通滤波对体数据矢量场进行处理并进行三维显示,较原来的显示,提高了信噪比,增强了显示稳定性与显示质量。病毒每个表面细节和轴上突起更加清晰可见。     

灰茶尺蛾核型多角体病毒形态发生的超微结构

灰茶尺蛾(Ectropis grisescens W)是我国中南地区茶树的主要害虫。灰茶尺蛾核型多角体病毒可以使该幼虫致死。该病毒为单粒包埋型的昆虫杆状病毒。作者曾对多粒包埋型的斜纹夜蛾核型多角体病毒等在体内的形态发生和装配过程作过详细的报告。近两年来,我们应用电子显微技术,对该种新发现的灰茶尺蛾核型多角体病毒,在幼虫体内形态发生过程中的丝状纤维和核糖体等的超微结构进行了观察和分析。     

水生动物病毒的电镜和荧光显微镜观察

应用透射电镜和荧光显微镜对三种水生动物病毒粒子形态、病毒感染细胞的超微结构变化及亚细胞定位进行比较和研究。负染电镜观察显示:鳜鱼弹状病毒(SCRV)粒子呈典型的子弹状形态,长约76～118 nm,直径约29～52 nm;鲈鱼呼肠孤病毒(LJRV)粒子呈正二十面体结构,具有双层衣壳,直径约70～80 nm;蛙虹彩病毒(RGV)粒子呈正二十面体结构,具有囊膜,直径大小约150 nm。超薄切片观察表明,宿主细胞的基本结构遭到不同程度的破坏,成熟病毒粒子分布在胞质中或以出芽的方式释放到胞外,且RGV增殖后在胞质中聚集形成晶格状结构。免疫荧光观察进一步显示,RGV感染细胞后能产生多个直径大小不一的包涵体。本研究结果有助于了解和认识水生动物病毒的超微形态特征、复制过程及致病机理。     

黄褐天幕毛虫核型多角体病毒的形态结构研究

黄褐天幕毛虫(Malacosoma neustria testacea)属鳞翅目,枯叶蛾科。由于食性杂,因而分布广,危害大,是林业、果树、园林的主要害虫之一。黄袍天幕毛虫核型多角体病毒(简称MnNPV)对天幕毛虫幼虫有很强的致病力。感病幼虫,其体内形成大量的核型多角体和游离态病毒,可再次感染寄主幼虫形成流行性疾病的病原。Mn-NPV是一种很有前途的生物杀虫剂。本文应用电子显微技术研究了MnNPV的形态及病毒粒子的细微结构。研究结果表明:从自然感病虫体及室内喂饲MnNPV的感病幼虫尸体的提取物中均观察到MnNPV,其形