新风胶囊对干燥综合症模型大鼠肺功能的保护作用及其TGF-β1-ERK1信号通路调节机制研究

目的：考察新风胶囊对干燥综合征模型大鼠肺功能的作用,及其对TGF-β1-ERK1 信号通路的影响。方法：将50 只SD 大鼠随机分为正常组（NC）、模型组（MC）和羟氯喹（HCQ）组、白芍总苷（TGP）组、新风胶囊（XFC）组,每组10 只。除正常对照组外,其余各组采用完全弗氏佐剂（CFA）+同种鼠颌下腺抗原诱导方法,在每只大鼠两后足跖部注射与弗氏完全佐剂充分乳化后的颌下腺蛋白混合抗原0.2 mL,诱发干燥综合征大鼠,检测各组大鼠饮水量及体重的变化,肺功能,ERK1,TGF-β1 蛋白的表达及血清细胞因子（IL-17、IL-4）的变化。结果：与NC 组比较,MC 模型组大鼠体质量、血清IL-4明显降低,饮水量、颌下腺/肺指数、颌下腺病理评分、ERK1、TGF-β1积分及IL-17 升高（P<0.01 或P<0.05）,肺功能参数降低（P<0.01 或P<0.05）;与MC 组比较,XFC 组体质量、肺功能参数FEF50、MMF升高,IL-4 表达升高,饮水量、颌下腺/肺指数、颌下腺病理评分、血清IL-17 表达、ERK1、TGF-β1积分降低（P<0.01 或P<0.05）;与HCQ 组相比,XFC 组体质量、IL-17 明显降低（P<0.01）,FEF25、FEF75、MMF 升高（P<0.01 或P<0.05）;与TGP 组比较,XFC 组肺指数、IL-17 降低（P<0.01 或P<0.05）。结论：干燥综合症大鼠存在肺功能下降,表达且与TGF-β1-ERK1 信号通路活化密切相关。中药XFC 能够下调TGF-β1表达,抑制上皮-间充质细胞转化,从而抑制ERK1 磷酸化活化增殖,降低免疫炎症反应,改善干燥综合症,进而改善肺功能。     

新风胶囊对干燥综合症模型大鼠肺功能的保护作用及其TGF-β1-ERK1信号通路调节机制研究＊

目的：考察新风胶囊对干燥综合征模型大鼠肺功能的作用,及其对TGF-β1-ERK1信号通路的影响。方法：将50只SD大鼠随机分为正常组（NC）、模型组（MC）和羟氯喹（HCQ）组、白芍总苷（TGP）组、新风胶囊（XFC）组,每组10只。除正常对照组外,其余各组采用完全弗氏佐剂（CFA）+同种鼠颌下腺抗原诱导方法,在每只大鼠两后足跖部注射与弗氏完全佐剂充分乳化后的颌下腺蛋白混合抗原0.2 mL,诱发干燥综合征大鼠,检测各组大鼠饮水量及体重的变化,肺功能,ERK1,TGF-β1蛋白的表达及血清细胞因子（IL-17、IL-4）的变化。结果：与NC组比较,MC模型组大鼠体质量、血清IL-4明显降低,饮水量、颌下腺/肺指数、颌下腺病理评分、ERK1、TGF-β1积分及IL-17升高（P<0.01或P<0.05）,肺功能参数降低（P<0.01或P<0.05）;与MC组比较,XFC组体质量、肺功能参数FEF50、MMF升高,IL-4表达升高,饮水量、颌下腺/肺指数、颌下腺病理评分、血清IL-17表达、ERK1、TGF-β1积分降低（P<0.01或P<0.05）;与HCQ组相比,XFC组体质量、IL-17明显降低（P<0.01）,FEF25、FEF75、MMF升高（P<0.01或P<0.05）;与TGP组比较,XFC组肺指数、IL-17降低（P<0.01或P<0.05）。结论：干燥综合症大鼠存在肺功能下降,表达且与TGF-β1-ERK1信号通路活化密切相关。中药XFC能够下调TGF-β1表达,抑制上皮-间充质细胞转化,从而抑制ERK1磷酸化活化增殖,降低免疫炎症反应,改善干燥综合症,进而改善肺功能。     

牛膝总皂苷对兔膝骨关节炎软骨组织形态变化及关节液中IL-1β、TGF-β1含量的影响

目的：观察牛膝总皂苷对兔膝骨关节炎软骨组织形态变化及关节液中细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和转化生长因子β1(TGF-β1)含量的影响。方法：将36只新西兰兔,随机分为空白组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组(60 mg?kg-1)、牛膝总皂苷高中低(200,100, 50 mg?kg-1)剂量组。采用改良Hulth法复制兔膝骨关节炎模型。药物干预2个月后,采用ELISA法检测各组兔膝关节液中IL-1β、TGF-β1的水平,分别于光镜及透射电镜下观察各组兔关节软骨的组织形态学变化。结果：与空白组比较,模型组兔膝关节液中IL-1β的含量明显增高(P<0.05),TGF-β1的含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组IL-1β的含量明显降低(P<0.05),TGF-β1的含量显著增高(P<0.05)。光镜下观察关节软骨组织形态变化,结果表明TSA呈剂量依赖的抑制了软骨组织的退变。各组兔KOA软骨组织结构Mankin评分的结果表明,与空白组比较,模型组评分明显增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组评分明显减小(P<0.05)。透射电镜下观察关节软骨细胞形态学变化,结果表明TSA具有呈剂量依赖的保护软骨细胞的作用。结论：TSA能抑制细胞因子IL-1β的表达,提高转化生长因子TGF-β1的表达,具有保护软骨组织缓解软骨退变的作用。     

仙鹿健骨汤对膝骨性关节炎大鼠关节软骨损伤的修复作用及机制研究

目的观察仙鹿健骨汤对膝骨性关节炎(KOA)大鼠关节软骨损伤的修复作用并探讨其机制。方法 SD大鼠100只,根据体质量随机分成5组:对照组、模型组、仙鹿健骨汤各剂量组;模型组、仙鹿健骨汤各剂量组构建KOA大鼠关节软骨损伤模型,并于造模成功第1天开始给予相应药物灌胃,持续给予3个月,对照组和模型组给予等体积0.9%氯化钠注射液。试验结束后,测定大鼠膝骨性骨关节炎软骨Mankin′s评分、p38m RNA、NF-κB mRNA、p38、NF-κB、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白水平。结果与对照组比较,模型组、仙鹿健骨汤各剂量组KOA软骨Mankin′s评分、p38、NF-кB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平明显升高(P 0.05);与模型组比较,仙鹿健骨汤各剂量组KOA软骨Mankin′s评分、p38、NF-κB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平明显降低(P 0.05),且随着仙鹿健骨汤给药剂量的增加,KOA软骨Mankin′s评分、p384、NF-κB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平逐渐降低,剂量-效应关系明显(P 0.05)。结论仙鹿健骨汤能明显减轻软骨细胞损伤程度,对KOA关节软骨损伤具有一定程度的修复作用,其机制与仙鹿健骨汤组能通过抑制炎症信号通路p38、NF-κB m RNA、蛋白表达水平的表达进而抑制细胞因子MMP-9、MMP-13、IL-1β的表达有关。     

针刀干预对膝骨关节炎模型兔膝关节软骨应力变化的影响

目的：观察针刀对膝骨关节炎（KOA）兔膝关节软骨退变、膝关节整体应力、关节软骨应力变化以及肿瘤坏死因子-ɑ（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的影响,探讨其治疗KOA的作用机制。方法：将28只兔随机分为空白组、模型组、电针组、针刀组,每组7只。除空白组均进行6周兔左后肢制动,建立兔KOA模型,电针组、针刀组均干预3周。采用苏木精-伊红（HE）法光镜下观察兔软骨病理改变,并评价软骨退变程度;运用有限元技术模拟KOA模型兔膝关节屈曲60°进行检测,观察膝关节整体应力及关节软骨最大应力变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测滑液中TNF-α、IL-1β表达水平。结果：与空白组比较,模型组Mankin评分升高(P<0.05）,膝关节整体应力、关节软骨最大应力显著降低（P<0.01）,TNF-α、IL-1β水平均显著升高（P<0.01）;干预后,与模型组比较,电针组、针刀组Mankin评分均显著降低(P<0.05),膝关节整体应力、关节软骨最大应力均升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β水平均明显降低(P<0.01）;与电针组比较,针刀组Mankin评分降低(P<0.05),膝关节整体应力和关节软骨最大应力较电针组升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β水平较电针组显著降低(P<0.01）。结论：针刀干预能够调节膝关节整体应力及关节软骨的最大应力,进而恢复膝关节应力环境、抑制炎症介质释放,从而改善关节软骨退变,达到治疗KOA的目的。     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠肺功能、Th细胞漂移及调节性T细胞的影响

目的观察新风胶囊不同剂量组对佐剂关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠肺功能、Th1/Th2细胞、调节性T细胞(Treg)的影响。方法将8 4只大鼠随机分为正常对照(NC)组、模型(M)组、甲氨喋呤(MTX)组、雷公藤多苷片(TGT)组和新风胶囊低剂量(XFC-L)组、新风胶囊中剂量(XFC-M)组、新风胶囊高剂量(XFC-H)组,每组12只,分别向除NC组外的其余动物右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 m L致炎,致炎后第19 d开始给药。NC组及M组给予生理盐水,其余5组分别给予MTX、TGT、XFC。观察各组大鼠各指标的变化。结果 (1)与NC组比较,M组大鼠足跖肿胀度(E)、关节炎指数(AI)、肺系数(LI)、1秒内平均呼气流量(FEV1/FVC%)、肺泡炎积分、TNF-α、Th1/Th2细胞、TGF-β_1表达明显升高(P0.01);用力肺活量(FVC)、25%肺活量的最大呼气流量(FEF25)、50%肺活量的最大呼气流量(FEF50)、75%肺活量的最大呼气流量(FEF75)、最大呼气中期流量(MMF)、用力最大呼气流量(PEF)、CD4~+Treg、CD4~+CD25~+Treg、IL-10、Foxp3表达明显降低(P0.01)。(2)与M组比较,各治疗组大鼠体重、FVC、FEF25、FEF50、FEF75、MMF、PEF、IL-10及Treg、Foxp3的表达升高;E、AI、LI、FEV1/FVC%及TNF-α、Th1/Th2细胞、TGF-β_1表达降低(P0.05,P0.01)。(3)与XFC-M组比较,其他各治疗组LI、肺泡炎积分及TNF-α、Th1/Th2细胞、TGF-β_1升高;FVC、FEF25、FEF50、FEF75及IL-10、CD4~+Treg、CD4~+CD25~+Treg、Foxp3降低(P0.05,P0.01)。结论 AA大鼠在关节局部肿胀同时肺功能降低;新风胶囊能明显改善AA大鼠足跖肿胀度、关节炎指数和提高肺功能,其机制是通过促进IL-10、CD4~+Treg、CD4~+CD25~+Treg及Foxp3的表达、抑制TNF-α、Th1/Th2细胞及TGF-β_1的表达,降低炎症反应和免疫复合物对组织器官的损伤,改善关节和肺部症状。     

补肺化痰定喘汤对肺肾亏虚型慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的临床疗效

目的 探讨补肺化痰定喘汤对肺肾亏虚型慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的临床疗效。方法 138例患者随机分为对照组和观察组,每组69例,对照组给予常规治疗,观察组在对照组基础上加用补肺化痰定喘汤,疗程4周。检测临床疗效、MMP-2、HIF-1α、TGF-β1、Gal-3、IL-6、肺功能指标(FVC、PEF、FEV1/FVC)、6 min步行距离、CAT评分、中医证候评分变化。结果 观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组MMP-2、HIF-1α、TGF-β1、IL-6、Gal-3、CAT评分、中医证候评分降低(P<0.05),肺功能指标(FVC除外)升高(P<0.05),6 min步行距离延长(P<0.05),以观察组更明显(P<0.05)。结论 补肺化痰定喘汤可减轻肺肾亏虚型慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者炎症反应,改善机体缺氧状态,调节肺功能,防止气道组织重塑,促进病情恢复,提高临床疗效。     

升陷乌梅汤对激素干预哮喘大鼠TGF-β1/Smad信号通路及气道重塑的影响

目的观察升陷乌梅汤对激素干预哮喘大鼠TGF-β1/Smad信号通路和气道重塑的影响。方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、哮喘组、激素组、布地奈德组、升陷乌梅汤组。除正常组外,其余各组采用卵蛋白致敏、雾化激发建立哮喘大鼠模型,并予各给药组大鼠腹腔注射糖皮质激素干预,在此基础上予升陷乌梅汤组大鼠灌胃、布地奈德组大鼠雾化吸入。观察各组大鼠肺功能及支气管病理改变,并采用Western blot及RT-qPCR法检测TGF-β1/Smad信号通路相关因子蛋白及mRNA表达的变化。结果①与正常组比较,哮喘组大鼠肺组织中胶原蛋白表达、WAi/Pbm、WAm/Pbm及WAe/Pbm升高(P0.05),信号通路因子TGF-β1、Smad2、Smad3的蛋白和mRNA表达及p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达均升高(P0.05),而肺功能中FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF50%及FEF75%均降低(P0.05),肺组织中Ai/Pbm以及通路因子Smad6、Smad7的蛋白和mRNA表达均降低(P0.05)。②与哮喘组比较,各给药组均可减少肺组织中WAi/Pbm、WAm/Pbm和WAe/Pbm(P0.05),降低TGF-β1、Smad2、Smad3的mRNA表达及TGF-β1、Smad2、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达(P0.05),并升高FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF50%和FEF75%(P0.05),增加Smad6、Smad7的mRNA表达(P0.05);且升陷乌梅汤组较激素组可进一步减少WAi/Pbm、WAm/Pbm、WAe/Pbm,降低TGF-β1、Smad2、Smad3的蛋白和mRNA表达及p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达(P0.05),并升高FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF75%,增加Smad6的蛋白和mRNA表达以及Smad7的mRNA表达(P0.05)。结论升陷乌梅汤可在激素干预基础上进一步阻止TGF-β1/Smad信号通路的异常激活,抑制气道重塑发展,延缓肺功能下降。     

独活寄生汤对膝骨关节炎模型大鼠中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响

目的?观察独活寄生汤（DHJSD）对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠中Wnt/β-连环蛋白（β- catenin）信号通路相关蛋白表达的影响，探讨DHJSD治疗骨关节炎（OA）的机制。方法?选取32只SD大鼠，按随机数字表法分为DHJS组、模型（M）组、硫酸氨基葡萄糖（GS）组和正常（NC）组。除NC组外，其余3组予双膝关节腔内注射0.2 mL 4%木瓜蛋白酶法建立KOA模型。造模后DHJS组予DHJSD灌胃，GS组予GS灌胃，NC、M组给予等体积纯净水灌胃。连续给药8周后进行双膝关节X线扫描，观察大鼠膝关节影像学变化并评分，ELISA法检测血清基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、白介素-1β（IL-1β）含量，HE染色、番红O固绿染色法观察膝关节软骨病理改变并进行Mankin评分，采用实时聚合酶链式反应（RT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot）及免疫组化法检测软骨组织中Wnt/β- catenin通路相关蛋白的mRNA及蛋白表达水平。结果?与NC组比较，M组大鼠膝关节间隙狭窄，软骨层损耗，X线评分、Mankin评分升高（P<0.05），DHJS组和GC组上述改变减轻，X线评分及Mankin评分下降（P<0.05）；DHJS组血清及软骨MMP-13含量减少（P<0.05）；下调软骨β-catenin、Wnt3a mRNA水平以及β-catenin、IL-1β蛋白表达水平（P<0.05），上调骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）mRNA 和蛋白表达水平（P<0.05）。结论?DHJSD能通过下调Wnt3a/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平，抑制MMP-13表达、促进BMP-2表达，从而改善大鼠KOA的影像学及病理学改变，发挥软骨保护作用。     

扶正消癌Ⅰ号方对大鼠肝纤维化作用

目的观察自拟扶正消癌Ⅰ号方对大鼠肝纤维化实验模型转化生长因子β(TGF-β)和其下游Smad信号系统的作用,探讨该方对多种肿瘤的作用机制。方法采用SD大鼠,四氯化碳注射制作肝纤维化模型,采用扶正消癌Ⅰ号方灌胃,阳性对照药物为秋水仙碱,免疫组化法检测TGF-β,Western-blot方法检测Smad-3、Smad-7蛋白表达。结果与正常大鼠比较,模型组大鼠TGF-β表达显著升高(P0.05),Smad-3呈高表达(P0.05),Smad-7为低表达(P0.05)。与模型组比较,扶正消癌Ⅰ号方组TGF-β和Smad-3的表达显著下降(P0.05),Smad-7表达显著增强(P0.05),显示该方对TGF-β、Smad-3、Smad-7表达较好的调节作用。结论扶正消癌Ⅰ号方对肝纤维化大鼠模型肝组织具有明显抑制TGF-β表达、下调Smad-3,上调Smad-7,对TGF-β-Smad系统具有较好的调节作用,可能是该方抗肝纤维化、抗肿瘤的机制之一。     

针刺与艾灸对哮喘大鼠肺功能及气道炎症的影响

目的 观察针刺与艾灸改善哮喘大鼠肺功能及气道炎症的作用，并比较疗效差异。方法 将48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组和艾灸组，每组12只。采用卵清白蛋白致敏和雾化激发制备哮喘大鼠模型。造模成功后，针刺组和艾灸组大鼠分别给予双侧“肺俞”穴针刺与艾灸干预30 min，每天1次，连续14天。干预结束后，使用肺功能测定仪测定大鼠肺功能[最大呼气流量（PEF）、肺阻力（RL）、动态肺顺应性（Cdyn）、呼出25%肺活量时最大呼气流量（FEF 25%）、用力呼气量占用力肺活量比（FEV/FVC）、最大呼气中期流量（MMEF）]；分别经HE和Masson染色后，光镜下观察大鼠肺组织的病理形态学变化及胶原沉积程度；运用酶联免疫吸附法检测各组大鼠肺组织中半胱氨酸白三烯（LT）、白介素（IL）-17、IL-4、IL-13、IL-33、IL-5、胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）、前列腺素D2(PGD2)表达。结果 与正常组比较，模型组PEF、Cdyn、FEF 25%、FEV/FVC、MMEF下降，RL、胶原纤维沉积、肺组织中LT、IL-17、IL-4、IL-13、TSLP、IL-33、PGD2、I...     

强骨宝对去卵巢大鼠疲劳性损伤诱发膝骨关节炎关节软骨的修复作用

目的：观察强骨宝对去卵巢大鼠疲劳性损伤诱发膝骨关节炎（KOA）的作用,以探讨该方对关节软骨的保护机制。方法：将24只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组及强骨宝组,每组8只。空白对照组不进行手术干预,模型组及强骨宝组均采用去卵巢联合跑台运动构建KOA模型。术后连续灌胃30d,于第30天灌胃后行大鼠膝关节MRI影像学检测并取材。采用HE染色及Mankin评分观察、评价膝关节病理学改变,ELISA法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及软骨寡聚基质蛋白（COMP）含量,Western blot法检测关节软骨中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-7(ADAMTs-7)的表达情况。结果：与模型组比较,强骨宝组MRI关节液信号减弱,且无关节囊局部信号增强情况;强骨宝组软骨表面更加平滑,潮线层次清晰,炎症细胞浸润减少;关节软骨Mankin评分显著降低（P<0.01）;血清中IL-1β、TNF-α、COMP含量均显著下降（P<0.01）;关节软骨中MMP-3、ADAMTs-7蛋白表达显著降低（P<0.0...     

火针对膝骨关节炎模型大鼠血清IL-1β、TNF-α、MMP-13表达的影响

目的 观察火针对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响。方法 将36只SD大鼠分为造模组23只和空白组13只,建立KOA模型。造模组和空白组随机抽取3只比较Mankin’s评分进行造模鉴定。将造模组剩余20只大鼠随机分为模型组和火针组,每组10只。火针组进行火针治疗,隔天1次,治疗4周。治疗前后对3组大鼠进行改良Lequesne MG行为学评分评估,治疗后检测3组大鼠血清IL-1β、TNF-α、MMP-13含量。结果 与空白组比较,造模组Mankin’s评分明显升高（P <0.05）。治疗前造模组改良Lequesne MG行为学评分高于空白组（P <0.05）;治疗后火针组Lequesne MG行为学评分低于模型组（P <0.05）。治疗后火针组血清IL-1β、TNF-α、MMP-13表达低于模型组（P <0.05）。结论 火针能通过降低血清IL-1β、TNF-α、MMP-13表达减轻软骨损伤。     

电针调节Wnt/β-catenin信号通路抑制大鼠膝骨关节炎软骨退变的研究

目的:基于Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路探讨电针治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用机制。方法:从50只2月龄SPF级雄性SD大鼠中随机抽取10只为假手术组,其余40只采用改良Hulth法复制膝骨关节炎模型,造模4周后随机分为模型组、实验1组、实验2组、实验3组,每组10只。假手术组和模型组不作任何干预,实验1组取双侧"内膝眼""犊鼻"电针干预15 min,实验2组取双侧"内膝眼""犊鼻"电针干预30min,实验3组取双侧非经非穴电针干预15min。电针干预每天1次,每周5次,共12周。12周后,取大鼠膝关节软骨组织进行染色,光镜下观察关节软骨组织形态学改变;改良Mankin’s评分评价软骨退变程度;ELISA法检测滑膜组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量;Western blot检测关节软骨组织Wnt-4、β-catenin、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloprotein-13,MMP-13)蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠软骨形态结构紊乱,细胞数量明显减少,基质失染,潮线不完整;Mankin’s评分显著升高(P0.01);滑膜组织中IL-1β含量显著升高(P0.01);Wnt-4、β-catenin、MMP-13蛋白的相对表达水平均显著升高(均P0.01)。与模型组比较,实验1组、实验2组大鼠软骨形态结构较整齐,细胞数量增多,基质染色加深,潮线较完整;Mankin’s评分显著降低(P0.01);滑膜组织中IL-1β含量显著降低(P0.01);Wnt-4、β-catenin、MMP-13蛋白的相对表达水平均显著降低(均P0.01)。与模型组比较,实验3组均未见改善。与实验1组比较,实验3组大鼠软骨形态结构紊乱,细胞数量明显减少,基质失染,潮线不完整;Mankin’s评分显著升高(P0.01);滑膜组织中IL-1β含量显著升高(P0.01);Wnt-4、β-catenin、MMP-13蛋白的相对表达水平均显著升高(均P0.01)。实验2组与实验1组大鼠软骨形态结构相似,Mankin’s评分、滑膜组织中IL-1β含量及Wnt-4、β-catenin、MMP-13蛋白的相对表达水平比较差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:电针"内膝眼""犊鼻"可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路,降低MMP-13的表达,减少炎性因子IL-1β的生成,从而抑制软骨基质的降解和软骨细胞的凋亡,改善软骨形态结构。     

针刺不同敏化状态穴位对KOA模型大鼠的关节软骨形态和关节腔液炎症因子的作用

目的研究针刺不同敏化状态穴位对膝骨性关节炎(KOA)大鼠关节软骨的修复及关节腔液炎症因子的调控作用。方法将成年雄性SD大鼠56只以1:3的比例随机分为空白对照组和KOA造模组。造模组采用单碘乙酸盐(Monoiodoacetic acid,MIA)关节腔内注射法制备KOA模型,采用Von Frey检测临床治疗KOA常用腧穴的机械痛阈值,根据造模前后痛阈值的变化率,筛选具有双向变化的穴位,将该穴痛阈值增高的大鼠分为低敏化组,而降低的分为高敏化组,而痛阈值无明显变化的为模型组。敏化组均接受2周的针刺治疗。观察各组大鼠膝关节周径、行为学评分、关节软骨组织形态学,ELISA检测关节腔冲洗液IL-6、TNF-α和chemerin水平,Western blot检测关节软骨ChemR23蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠关节周径、Lequesne MG评分、关节软骨Mankin’s评分、关节腔冲洗液IL-6、TNF-α和chemerin水平均显著升高(P0.05);与模型组比较,高、低敏化组大鼠关节软骨Mankin’s评分、关节腔冲洗液IL-6、chemerin水平显著下降(P0.05);与低敏化组比较,高敏化组大鼠关节周径、Lequesne MG总分、Mankin’s评分均明显降低,关节腔冲洗液IL-6水平明显下降(P0.05)。结论针刺KOA疾病状态下不同敏化状态的穴位均可改善大鼠行为学表现、促进软骨修复、抑制关节局部部分炎性反应,而针刺高敏化状态穴位的疗效优势还需要进一步验证。     

加味阳和汤对膝骨关节炎大鼠模型基质金属蛋白酶调控及软骨保护作用研究

目的:观察加味阳和汤对软骨细胞MMP-3,9,13及Col2a调控作用及对碘乙酸诱导KOA模型大鼠的软骨保护作用。方法:软骨细胞提取于3周龄SD大鼠关节软骨,第三代软骨细胞加入梯度浓度加味阳和汤干预后使用IL-1β诱导炎症。MTT检测加味阳和汤最佳干预浓度。Western Blot检测MMP-3,9,13及Col2a表达。组织病理学切片KOA大鼠模型软骨退变情况并行Mankin评分。结果:Western Blot结果示加味阳和汤能有效下调异常增高的MMP-3、9、13并上调Col2a表达。Mankin评分结果提示加味阳和汤能有效延缓退变。结论:加味阳和汤可通过抑制MMPs表达从而保护软骨。     

补肾强筋胶囊对膝骨关节炎的治疗作用及分子机制研究

目的:探讨补肾强筋胶囊对膝骨关节炎(KOA)的治疗作用及相关分子机制。方法:将40只SD大鼠随机分为4组,每组10只。采用关节腔注射木瓜蛋白酶和半胱氨酸建立KOA大鼠模型。正常组和模型组给予生理盐水灌胃,补肾高、低剂量组分别灌胃0.486 g/kg和0.243 g/kg补肾强筋胶囊。6周后处死大鼠并采集膝关节软骨和血清进行检测。苏木精-伊红(HE)染色和番红-固绿染色观察各组大鼠膝关节软骨病理变化并进行改良Mankin评分;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹(Western Blot)检测MMP13、Beclin1、LC3B、ULK1、p-AMPK、p-mTOR mRNA和蛋白的表达。结果:与模型组相比,补肾高、低剂量组大鼠膝关节软骨退变程度明显减轻且Mankin评分显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。补肾高、低剂量组大鼠血清IL-1β和TNF-α水平显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。补肾高、低剂量组大鼠软骨MMP13 mRNA和蛋白表达显著降低,Beclin1、LC3B-Ⅱ/Ⅰ、ULK1 mRNA和蛋白表达显著升高,p-mTOR蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。补肾高剂量组大鼠软骨p-AMPK蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论:补肾强筋胶囊可能通过AMPK/mTOR通路上调KOA模型大鼠膝关节软骨自噬水平从而延缓病程。     

麻芍平喘汤对哮喘模型大鼠气道重塑的干预作用

目的:观察麻芍平喘汤对哮喘大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA蛋白)的影响,初步探讨麻芍平喘汤防治哮喘气道重塑的可能作用机制。方法:采用10%卵白蛋白加氢氧化铝干粉10 mg致敏和激发,建立哮喘大鼠气道重塑模型,将70只大鼠随机分为正常组、模型组、麻芍平喘低剂量组、麻芍平喘中剂量组、麻芍平喘高剂量组、地塞米松组、阳和平喘组,造模成功后,采用麻芍平喘汤、地塞米松和阳和平喘汤进行干预,干预结束后,HE染色法观察气道病理切片,肺功能测定仪测定用力呼气肺活量(FVC)、0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)、最大呼气流量(PEF)与0.3 s用力呼气容积占用力呼气肺活量的比值(FEV0.3/FVC),RT-PCR法检测TGF-β1mRNA、α-SMA mRNA在肺组织中的表达。结果:模型组大鼠FVC、FEV0.3、PEF明显低于正常组(P0.01),FEV0.3/FVC值明显高于正常组(P0.01)。各给药组大鼠FVC、FEV0.3、PEF均有改善(P0.05);模型组大鼠肺组织TGF-β1mRNA、α-SMA mRNA蛋白表达水平明显高于正常组,各给药组灰度值低于模型组(P0.01),麻芍平喘高剂量组和阳和平喘组与地塞米松组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:麻芍平喘汤能够改善肺功能,降低TGF-β1、α-SMA的蛋白表达,抑制支气管平滑肌增生,减轻气道壁厚度,从而减轻气道炎症,延缓气道重塑。     

火针对膝骨关节炎大鼠关节功能及炎性反应的影响

目的:观察火针对膝骨关节炎(KOA)大鼠退化软骨和炎性因子的影响,探讨火针干预KOA的分子生物学机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、火针干预组,每组13只。采用右侧膝关节腔内注射单碘乙酸盐制备KOA大鼠模型。火针干预组选择右侧"内膝眼""犊鼻"穴火针点刺,每周2次,治疗3周。观察各组大鼠爪压和步态评分;采用番红固绿染色观察右膝软骨组织病理形态并行骨关节炎(OA)评分;透射电镜观察右膝软骨结构;采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素1α(IL-1α)、IL-10、IL-37、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠爪压和步态评分、OA评分、血清IL-1α和TNF-α含量均升高(P0.05,P0.01),血清IL-10、IL-37、TGF-β含量均降低(P0.01)。火针干预组爪压和步态评分、OA评分、血清IL-1α和TNF-α含量较模型组均降低(P0.05,P0.01),血清IL-10、IL-37、TGF-β含量较模型组均升高(P0.01)。模型组可见脂滴较正常组多且大,线粒体肿胀,甚至空泡,粗面内质网扩张,甚至断裂溶解,数量较正常组减少,排列杂乱;火针干预组可见到丰富的轻度扩张、排列相对较规则的粗面内质网和线粒体,脂滴增多。结论:火针可改善KOA大鼠运动功能和膝骨关节软骨形态,其机制可能与降低血清炎性因子、提高抗炎因子的表达水平有关。     

阳虚寒凝型兔膝骨关节炎模型建立初探

目的 初步探讨建立阳虚寒凝型兔膝骨关节炎（KOA）模型的评价指标。方法 将24只4月龄新西兰大白兔按随机数字表法分为正常组、木瓜蛋白酶组、阳虚组、阳虚寒凝组,每组6只。正常组不予干预,常规饲养;其余3组均用4周造模,在第1周的第1、4、7天均关节腔内注射4%木瓜蛋白酶溶液0.1 mL建立KOA模型;阳虚寒凝组从第1周开始持续4周每日置于湿度为50%～60%、温度为4～6℃恒温恒湿培养箱中不限活动1.5 h,第3周以0.65 mL/（kg·d）薄荷油连续灌胃2周;阳虚组第3周开始以薄荷油连续灌胃2周。造模后比较4组兔膝关节周径、Lequesne MG评分、膝关节软骨及滑膜病理学改变、软骨损伤改良Mankin’s评分、关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量以及体质量、肛温、心率、中医证候评分。结果 与正常组比较,造模后木瓜蛋白酶组、阳虚组、阳虚寒凝组膝关节周径、Lequesne MG评分及关节液中IL-1β、TNF-α含量均明显升高（P<0.05）,膝关节软骨、滑膜病理切片损伤情况均显著加重,改良Mankin’s评分均显著升高（P均<0.05...