芽孢杆菌胞外产物的研究进展

芽孢杆菌大多能分泌高活性的胞外产物(extracellular products),如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等水解酶和果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等分解植物性饵料中非淀粉多糖的酶类[1].     

中草药复合益生菌制剂对凡纳滨对虾生长、抗病力及水质的影响

将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等比例混合,制成芽孢杆菌制剂;将芽孢杆菌制剂与粪肠球菌、嗜酸乳杆菌等比例混合制成复合益生菌制剂;将分别用3种芽孢杆菌发酵的中草药等比例混合制成中草药芽孢杆菌制剂;将分别用5种益生菌发酵的中草药等比例混合,制成中草药复合益生菌制剂。在饲料中分别添加4种益生菌制剂(活菌为2×10~7 cfu/g),研究4种制剂对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)生长、抗病力及水质的影响。结果表明:1)4种益生菌制剂均可提高凡纳滨对虾的成活率、增重率和饲料利用率(P0.05),中草药益生菌制剂组的促生长效果优于益生菌制剂组,以中草药复合益生菌制剂组促生长效果为最佳(P0.05);2)4种益生菌制剂均可维持对虾养殖水体p H值、氨态氮和亚硝酸盐含量的稳定(P0.05),中草药益生菌制剂对水质的改良效果优于益生菌制剂(P0.05);3)用1×10~8 cfu/m L的哈维氏弧菌(Vibro harveyi)菌液浴浸泡凡纳滨对虾10 d,凡纳滨对虾的累计死亡率由大到小依次为中草药复合益生菌制剂组(31.11%)、复合益生菌制剂组(35.56%)、中草药芽孢杆菌制剂组(37.78%)、芽孢杆菌制剂组(44.44%)、对照组(93.33%)。在饲料中添加一定比例的中草药复合益生菌制剂可提高凡纳滨对虾的生长指标、改善养殖水体环境、提高对虾的抗病力。     

有益微生物对水质因子的调控效应

随着我国水产养殖业的发展 ,集约化、半集约化的养虾模式随之迅猛发展 ,养殖规模不断扩大。在养殖过程中 ,因残存饵料腐烂 ,生物代谢 ,以及生物残体沉积 ,致使养殖水体理化环境和生态环境恶化 ,从而影响生物的生长、发育和行为活动。为改善养殖环境 ,促进水产养殖业健康可持续性地发展 ,近年来微生物技术在水产养殖业中得到了广泛应用[1,2 ] ,1) 。利用芽孢杆菌和光合细菌等有益微生物能调节和稳定养殖水体中的水质因子 ,分解、转化养殖水体的有机物的特性 ,达到改良、净化和营造养殖生态环境的效果 ,在生产上取得了明显的成效。为此 ,从 1 …     

养殖场底泥中芽孢杆菌属细菌的生态学研究

对近海养殖场底泥细菌的研究，发现养殖池底泥中芽孢菌为优势菌群。应用形态学、生理生化和16S rDNA序列测定，对芽孢杆菌属细菌做进一步分类的结果表明，该属细菌在底泥中的主要种群为蜡状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、Bacillus baekryungensis等。同时，还分析了这些芽孢杆菌属细菌在底泥元素的地球化学循环中的作用，认为这类细菌应属于陆生微生物，在养殖环境中代谢有机化合物产生氨、亚硝酸盐和H2S，对养殖环境产生不利的作用和影响。     

养殖场底泥中芽孢杆菌属细菌的生态学研究

对近海养殖场底泥细菌的研究 ,发现养殖池底泥中芽孢菌为优势菌群。应用形态学、生理生化和 16SrDNA序列测定 ,对芽孢杆菌属细菌做进一步分类的结果表明 ,该属细菌在底泥中的主要种群为蜡状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、Bacillusbaekryungensis等。同时 ,还分析了这些芽孢杆菌属细菌在底泥元素的地球化学循环中的作用 ,认为这类细菌应属于陆生微生物 ,在养殖环境中代谢有机化合物产生氨、亚硝酸盐和H2 S ,对养殖环境产生不利的作用和影响     

假单胞菌Pseudomonas stutzeri的生长特性及其反硝化活性

为有效控制养殖水体中的氮素污染，研究了一株假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)的生长特性和反硝化活性。结果表明，假单胞菌不能利用无机碳源进行生长，其在有机碳源存在的前提下可以利用无机氮源(如氯化铵和硝酸钾)进行生长和繁殖，并且与氮源的浓度呈正相关。假单胞菌的最适生长pH为7．0～8．0，最适生长温度为30～35℃，生长条件与一般的细菌相似。假单胞菌可对水体中的硝态氮通过反硝化来实现生物脱氮，这种反硝化的活性与水体中溶氧的含量呈负相关。研究显示，运用假单胞菌的生长特性和反硝化活性实现养殖水体生物脱氮是控制养殖水体氮素污染的一条良好途径。     

水产养殖用芽孢杆菌制剂的检测

通过平板菌落计数法检测编号为GD1、GD2、GD3、GD4、GD5、JS、JX、SD1和SD2等9种水产养殖用芽孢杆菌制剂的有效活菌数,结合形态、生理生化和16S rRNA基因序列分析对各制剂中分离的产芽孢细菌代表菌株进行鉴定。结果显示:除GD1、GD2和GD5制剂未标明芽孢数量外,其余制剂检测到的芽孢数量均低于或远低于标注数量;经鉴定,各制剂中最优势类型,GD2、GD3、GD5、SD1和SD2制剂为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),GD4、JS和JX制剂为解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens),GD1制剂为枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。除GD4、GD5和SD1制剂未标明具体菌种以及GD2的标注菌种与检测结果不一致外,其他制剂的标注菌种与被鉴定的优势类型芽孢杆菌基本一致。     

假单胞菌Pseudomonas stutzeri的生长特性及其反硝化活性

为有效控制养殖水体中的氮素污染,研究了一株假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)的生长特性和反硝化活性.结果表明,假单胞菌不能利用无机碳源进行生长,其在有机碳源存在的前提下可以利用无机氮源(如氯化铵和硝酸钾)进行生长和繁殖,并且与氮源的浓度呈正相关.假单胞菌的最适生长pH为7.0～8.0,最适生长温度为30～35 ℃,生长条件与一般的细菌相似.假单胞菌可对水体中的硝态氮通过反硝化来实现生物脱氮,这种反硝化的活性与水体中溶氧的含量呈负相关.研究显示,运用假单胞菌的生长特性和反硝化活性实现养殖水体生物脱氮是控制养殖水体氮素污染的一条良好途径.     

水生动物微生态制剂作用机理的研究进展

近年来,益生菌制剂被广泛应用于水生动物的健康养殖中,因此,对水生动物微生态制剂的研制和机理性研究渐受关注.一方面,它利用有益菌改善养殖水体质量,为养殖动物提供一个良好的生活环境,同时水体中的有益菌也能随水流进入水生动物的消化道中[1];另一方面,有益菌也常被用作饲料添加剂以促进动物对饲料的消化和利用.此外,益生菌还有许多其他的益生效果:它能分泌有机酸、过氧化氢和细菌素等物质抑制病源菌的生长;通过与病源菌竞争营养物质和附着位点进而抑制其滋长;还能优化和平衡水生动物肠道中固有菌群组成结构;刺激动物的免疫系统,更重要的是它具有安全、无毒、无害、无副作用等特点[2,3].笔者就益生菌在健康养殖上的应用状况及将之作为生物控制的内在机制等方面的研究进展进行了介绍和阐述,进而系统地探讨水生动物微生态制剂的作用机理.     

几株有益芽孢杆菌对温度、制粒工艺及pH值的耐受性

报道了实验室分离、筛选的5株有益芽孢杆菌对温度、对虾饲料制粒工艺流程和pH值的耐受性。结果表明，5株芽孢杆菌经80℃水浴40min后全部存活，90℃水浴20min有35％-70％存活，100℃水浴10min仍有30％-50％存活，显示所筛选的5株芽孢杆菌对高温有较强的耐受力；在对虾饲料中添加5株芽孢杆菌，经整个生产工艺流程后芽孢杆菌存活95％，烘干后芽孢杆菌存活93％，说明杆菌能够承受饲料制粒生产中压力、温度和水分的变化；当pH值为3．8、4．6、5．2时，分别有l、3、5株菌能繁殖，pH值6．0-8．5时，5株菌生长旺盛，将5株菌经pH值2．2—4．6处理1h，再接种在pH值7．2的培养基可以良好生长，说明杆菌在酸性环境中生长性能较差，在弱酸性和碱性环境中生长旺盛；能耐受酸性环境而存活，再给予适宜环境即能良好生长。5株芽孢杆菌具有作为水产硬颗粒饲料专用益生素菌株的优势。     

九孔鲍养殖水体中产酶菌群的研究

为了解九孔鲍养殖环境中细菌生理菌群的生态作用，对分离自养殖水体的33株菌株的产酶能力和种类进行了研究。结果表明，具有分泌胞外蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶能力的菌株分别为39．4％、57．6％和30．3％；在这33株菌中，产至少一种胞外酶的菌株比例高达63．6％。API鉴定结果表明，在有能力分泌胞外蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶的菌株中，弧菌菌群所占的比例分别为46％、42％和40％，而其中河流弧菌又占各弧菌菌群比例的83．3％、62.5％和100％。充分阐明弧菌，尤其是河流弧菌为优势菌，在鲍鱼养殖微生物态中起的重要作用。     

红树林共附生微生物HSL36的鉴定及其主要代谢产物GC/MS分析

从湛江红树林的根部中分离筛选一株潜在益生菌,命名HSL36,通过形态观察,并进行生理生化特性分析和16S rDNA序列分析后,鉴定为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)。采用气-质联用技术(GC-MS)对菌株HSL36胞外代谢产物进行成分分析,菌株HSL36发酵液二氯甲烷萃取物的主要化学成分为邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯、2,6-二叔丁基-4-甲基环己醇、柏木脑、碘代十六烷和2个未确定化合物。     

水生动物微生态制剂作用机理的研究进展

近年来，益生菌制剂被广泛应用于水生动物的健康养殖中，因此，对水生动物微生态制剂的研制和机理性研究渐受关注。一方面，它利用有益菌改善养殖水体质量，为养殖动物提供一个良好的生活环境，同时水体中的有益菌也能随水流进入水生动物的消化道中；另一方面，有益菌也常被用作饲料添加剂以促进动物对饲料的消化和利用。     

几株有益芽孢杆菌对温度、制粒工艺及pH值的耐受性

报道了实验室分离、筛选的 5株有益芽孢杆菌对温度、对虾饲料制粒工艺流程和pH值的耐受性。结果表明 ,5株芽孢杆菌经 80℃水浴 4 0min后全部存活 ,90℃水浴 2 0min有 35 %～ 70 %存活 ,10 0℃水浴 10min仍有 30 %～ 5 0 %存活 ,显示所筛选的 5株芽孢杆菌对高温有较强的耐受力 ;在对虾饲料中添加 5株芽孢杆菌 ,经整个生产工艺流程后芽孢杆菌存活 95 %,烘干后芽孢杆菌存活 93%,说明杆菌能够承受饲料制粒生产中压力、温度和水分的变化 ;当pH值为 3.8、4 .6、5 .2时 ,分别有 1、3、5株菌能繁殖 ,pH值 6 .0～ 8.5时 ,5株菌生长旺盛 ,将 5株菌经pH值 2 .2～ 4 .6处理1h ,再接种在pH值 7.2的培养基可以良好生长 ,说明杆菌在酸性环境中生长性能较差 ,在弱酸性和碱性环境中生长旺盛 ;能耐受酸性环境而存活 ,再给予适宜环境即能良好生长。 5株芽孢杆菌具有作为水产硬颗粒饲料专用益生素菌株的优势。     

马氏珠母贝肠道及其养殖水体可培养细菌群落结构

【目的】了解马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)肠道及其养殖水体可培养细菌的群落组成。【方法】采用2216E平板涂布法研究海区养殖马氏珠母贝肠道与养殖水体的可培养菌群种类及丰度。【结果与结论】马氏珠母贝肠道及其养殖水体的可培养细菌归属于2门(变形菌门和厚壁菌门)3纲7目10科23属56种。属水平上,肠道中以弧菌属(74.7%)和假交替单胞菌属(18.7%)为主;养殖水体中α-变形菌纲的FJ943236_g属(40.7%)丰度最大,弧菌属(16.7%)相对肠道丰度较低。样品共有菌属为弧菌属、假交替单胞菌属、发光杆菌属和芽孢杆菌属;肠道特有菌属为希瓦氏菌属和盐单胞菌属;养殖水体特有菌属主要为FJ943236_g、鲁杰氏菌属和Nautella。在种水平上,7个种为二者共有;马氏珠母贝肠道和养殖水体特异性菌种分别为18个和31个。虽然门水平上马氏珠母贝肠道中可培养细菌群落与其养殖水体中的细菌群落大致相似,但在属、种水平上二者差异明显。     

九孔鲍养殖水体中产酶菌群的研究

为了解九孔鲍养殖环境中细菌生理菌群的生态作用,对分离自养殖水体的33株菌株的产酶能力和种类进行了研究。结果表明,具有分泌胞外蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶能力的菌株分别为39.4%、57.6%和30.3%;在这33株菌中,产至少一种胞外酶的菌株比例高达63.6%。API鉴定结果表明,在有能力分泌胞外蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶的菌株中,弧菌菌群所占的比例分别为46%、42%和40%,而其中河流弧菌又占各弧菌菌群比例的83.3%、62.5%和100%。充分阐明弧菌,尤其是河流弧菌为优势菌,在鲍鱼养殖微生物态中起的重要作用。     

水体中芽孢杆菌和微囊藻的生长及其资源竞争

以C，N，P为主要限制性因子研究了芽孢杆菌和微囊藻在水中的生长率，并据Monod方程了解种群增长率与营养浓度之间的关系，以判断藻菌资源竞争的结果。研究结果显示，氮浓度的或高或磷浓度的降低，即N／P比值的或高，有利于芽孢杆菌的生长；而当氮浓度一定时，C／N比值越高，芽孢杆菌生长得越好。而微囊藻作为一种自养的光合,春生长与水中的C源无关，与氮磷浓度有关。氮磷浓度越高则生长越好。在此研究结果基础上进行藻菌生长动态的比较表明，在氮限制条件下，微囊藻的生长率稍高于芽孢杆菌；在磷限制条件下，芽孢杆菌的生长率总是大大高于微囊藻的生长率。     

大口黑鲈肠道益生菌的分离与鉴定

【目的】分离鉴定大口黑鲈（Micropterus salmoides）肠道益生菌,评估分离菌用作饲料添加剂的益生潜力。【方法】采集大口黑鲈肠道样本,采用稀释涂布法分离细菌,经16S rRNA序列比对和生化试验鉴定种属,并进行抗逆性能、黏附能力、溶血活性和药敏特性等鉴定。【结果】从大口黑鲈肠道分离菌株84株,经测序、blast比对,筛选出3株同源性最高的菌株MS-1、MS-2、MS-3,分别鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）和贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）。3株分离菌均为γ-溶血,不具有生物膜,疏水性50%～93.3%,自凝集性43.6%～69.2%;可在pH 2.0～12.0环境和5.0 g/L胆盐中存活;经高温处理后仍可生长;3株菌对大多数抗生素敏感。【结论】芽孢杆菌MS-1、MS-2和MS-3抗逆性高,黏附性能及饲料学安全性高,可作为大口黑鲈养殖中潜在益生菌。     

地衣芽孢杆菌在异育银鲫日粮中的应用

在异育银鲫基础日粮中分别添加质量分数0.01%、0.02%、0.03%、0.04%的地衣芽孢杆菌,测定了鱼体的生长及食糜植酸酶活性等。结果表明:与对照组相比,添加量0.01%、0.02%、0.03%组的增重率分别显著提高了12.46%、18.59%、18.84%;添加量0.02%、0.03%组的磷表观消化率分别提高37.63%、35.03%(P<0.05);饵料系数降低了0.52、0.57(P<0.05),其他组差异不显著。与对照组相比,0.03%组食糜植酸酶活性提高50.79%、0.04%组肝体比降低20.91%(P<0.05),其他组差异不显著。因此在异育银鲫日粮中添加地衣芽孢杆菌提高了机体酶活性,促进了鱼体生长。     

地衣芽孢杆菌在异育银鲫日粮中的应用

在异育银鲫基础日粮中分别添加质量分数0．01％、0．02％、0．03％、0．04％的地衣芽孢杆菌，测定了鱼体的生长及食糜植酸酶活性等。结果表明：与对照组相比，添加量0．01％、0．02％、0．03％组的增重率分别显著提高了12．46％、18．59％、18．84％：添加量0．02％、0．03％组的磷表观消化率分别提高37．63％、35．03％（P〈0．05）；饵料系数降低了0．52、0．57（P〈0．05），其他组差异不显著。与对照组相比，0．03％组食糜植酸酶活性提高50．79％、0．04％组肝体比降低20．91％（P〈0．05），其他组差异不显著。因此在异育银鲫日粮中添加地衣芽孢杆菌提高了机体酶活性，促进了鱼体生长。