基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的布渣叶化学成分分析

目的 应用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间高分辨质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）分析布渣叶中的化学成分。方法 色谱条件为Waters CORTECS UPLC C₁₈色谱柱（2.1 mm×150 mm,1.6 μm）,以甲醇（A）-0.1%甲酸水溶液（B）流动相进行梯度洗脱（0~4 min,14%~30%A;4~16 min,30%~58%A;16~25 min,58%~78%A;25~25.1 min,78%~98%A;25.1~29 min,98%A）,流速0.25 mL· min^-1,进样量1 μL;质谱条件为电喷雾离子源（ESI）,在正、负离子模式下对色谱流出物进行检测,检测范围m/z 100~1 500。结果 通过高分辨质谱数据分析、结合参考文献数据以及对照品确认,从布渣叶中共鉴别出31个化学成分,包括28个黄酮类（9个黄酮碳苷类,10个黄酮醇及其苷类,8个原花青素类,1个苯骈色原酮类）和3个有机酸类（咖啡酸、阿魏酸和p-香豆酸）。结论 UPLC-Q-TOF-MS/MS技术为鉴别布渣叶药材中化学成分提供简便、快速、准确的方法,其主要化学成分为黄酮碳苷类、黄酮醇氧苷类、原花青素类,7个原花青素类成分在该植物中属首次发现,可为布渣叶药材的质量评价及药效物质基础研究提供参考。     

傣肾宁化学成分的HPLC-Q-TOF-MS/MS分析

目的 采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法（HPLC-Q-TOF-MS/MS）对源于傣族经典名方的傣肾宁中主要化学成分进行鉴定。方法 色谱条件为Cosmosil 5 C₁₈-AR-Ⅱ色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相乙腈（A）-0.5%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~10 min,5%A;10~20 min,5%~20%A;20~30 min,20%A;30~55 min,20%~35%A;55~65 min,35%~55%A;65~75 min,55%~100%A;75~80 min,100%A;80~85 min,100%~5%A;85~90 min,5%A）,流速1 mL·min^-1,柱温40 ℃,进样量10 μL。质谱条件为选择电喷雾离子源（ESI）,正、负离子检测模式,质量扫描范围m/z 100~2 000。通过MassHunter B.06.00软件结合PubChem,MassBank,ChemicalBook等数据库,并参考文献信息,进行傣肾宁中主要化学成分的鉴定。结果 从傣肾宁中共鉴定出96个成分,主要包括32个黄酮类化合物,19个有机酸类化合物,6个糖苷类化合物,6个萜类化合物,5个苯丙素类化合物,8个酚类化合物,14个其他类化合物和6个未知化合物。结论 建立的HPLC-Q-TOF-MS/MS可同时对傣肾宁不同类型的化合物进行分析,有助于开展该制剂主要化学成分的提取分离和质量控制研究。此外,通过对傣肾宁化学成分的快速指认,推测其主要药效物质为黄酮类和有机酸类成分。     

基于UPLC-QE-Orbitrap-MS技术的芪蛭降糖胶囊化学成分分析

目的 为系统分析芪蛭降糖胶囊的化学组成,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-QE-Orbitrap-MS）对该复方的化学成分进行鉴定。方法 采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,以乙腈（A）-水（B）为流动相梯度洗脱（0~13 min,1%~25%A;13~21 min,25%~35%A;21~28 min,35%~85%A;28~30 min,85%~100%A;30~32 min,100%~1%A）,流速设定0.2 mL·min^-1,柱温30 ℃,进样量3 μL;运用电喷雾离子源（ESI）,扫描范围m/z 100~1 500,正、负离子全扫描模式采集数据。采用对照品比对、自建化合物数据库搜索、文献信息比对、诊断离子筛选及Compound Discoverer 3.0软件推测的方法快速鉴定各离子峰。结果 共鉴定了芪蛭降糖胶囊中52个化学成分,并归属了化合物的来源药材,其中氨基酸类成分主要来源于水蛭,苯丙素类成分来源于黄芪和地黄,环烯醚萜苷类成分来源于地黄,香豆素和三萜类成分来源于黄芪,黄酮类成分来源于黄芪和黄精。结论 建立的UPLC-QE-Orbitrap-MS分析方法能全面快速地分析和鉴定芪蛭降糖胶囊中的化学成分,其中多种成分经现代药理研究证明具有改善糖尿病及其并发症相关症状的作用,体现了芪蛭降糖胶囊多成分协同作用的特点,可为其药效物质基础和质量控制研究提供参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的吴茱萸化学成分分析

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术分析吴茱萸药材中的化学成分。方法 色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~3 min,6%A;3~4 min,6%~10%A;4~7 min,10%~12%A;7~8 min,12%~14%A;8~13 min,14%~15%A;13~15 min,15%~20%A;15~18 min,20%~30%A;18~21 min,30%~49%A;21~25 min,49%~51%A;25~27 min,51%~73%A;27~30 min,73%~80%A;30~31 min,80%~100%A;31~32 min,100%A）,流速0.4 mL·min^-1,柱温35 ℃。质谱条件为电喷雾离子源,正、负离子全扫描模式采集数据,检测范围m/z 100~1 200。通过高分辨质谱数据分析、参考文献数据及对照品确认,对吴茱萸药材的化学成分进行快速、全面的定性分析。结果 从吴茱萸70%甲醇提取物中共鉴定出92个化合物,包括生物碱类39个、黄酮类19个、柠檬苦素类12个、酚酸类20个和有机酸类2个;通过与对照品比对,准确归属了26个化合物。结论 吴茱萸药材化学成分类型多样,极性差异大,但不同产地、不同品种的药材样品中化学成分基本一致。该研究建立的方法能快速、准确地对吴茱萸的化学成分进行全面解析,为该药材药效成分和毒性成分的进一步阐明提供了实验依据。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的黄芪桂枝五物汤基准样品化学成分分析及表征

目的 对黄芪桂枝五物汤基准样品（冻干粉）进行化学成分分析，为该经典名方制剂的质量标准制定提供质量标志物。方法 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间-串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS），色谱条件为Waters ACQUITY UPLC? HSS T3色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm），流动相甲醇（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~8 min，1%~20%A；8~10 min，20%~30%A；10~12 min，30%~35%A；12~14 min，35%~40%A，14~23 min，40%~55%A，23~27 min，55%~99%A；27~28 min，99%A；28~28.5 min，99%~1%A；28.5~30 min，1%A），柱温40 ℃，进样量2 μL，流速0.3 mL·min^-1。在正、负离子模式下采集黄芪桂枝五物汤基准样品（冻干粉）的质谱数据，质谱条件为电喷雾离子源（ESI），扫描范围m/z 50~1 200，碰撞能量10~30 eV。利用UNIFI 1.8和Progenesis QI 2.0软件解析，结合对照品和文献信息比对，对黄芪桂枝五物汤基准样品（冻干粉）的化学成分进行表征。结果 一共表征出123化学成分，其中黄酮类33个、苷类26个、有机酸类18个、萜类11个、苯丙素类7个、姜辣素类4个、生物碱类3个、氨基酸类3个、酰胺类2个、其他类16个。结论 建立的方法可以快速、准确地表征黄芪桂枝五物汤基准样品（冻干粉）中的化学成分，可为该经典名方的质量评价指标筛选提供依据，并为其制剂研究提供参考。     

狗脊毛甲醇提取物UPLC/Q-TOF-MS分析

目的：探索狗脊毛化学成分组成及其外用止血的物质基础。方法：采用超声、索氏、回流3种方式对狗脊毛进行甲醇提取,通过UPLC/Q-TOF-MS对各提取物进行定性分析,流动相乙腈（A）-水（B）梯度洗脱（0~5 min,5%~55% A;5~7 min,55%~85% A;7~15 min,85%~100% A;15~20 min,100% A）,检测波长254 nm,m/z扫描范围100~1 000,脱溶剂气温度350 ℃,脱溶剂气体积流量9 L·min^-1,喷雾器压力2.4×10⁵Pa,毛细管电压4 000 V。结果：3种方式共检出化合物50个,给出了其中38个化合物的推荐分子式和名称。编号32~39共8个化合物为一系列三酰基甘油类同系物。结论：狗脊毛中化合物包括植物油类（三酰基甘油）、有机酸类、有机酸酯类、生物碱类、黄酮类、多酚类、糖苷类等,相对分子质量集中于200~800,三酰基甘油可能为主要药效成分。     

黄连花薹化学成分的UPLC-Q-Orbitrap HRMS鉴定

目的 应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap HRMS）分析黄连花薹中的化学成分。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相梯度洗脱（0~15 min,10%~22%B;15~20 min,22%B;20~25 min,22%~44%B;25~35 min,44%~50%B;35~40 min,50%~60%B;40~55 min,60%~85%B）,流速0.15 mL·min^-1,进样量3 μL,柱温30 ℃。高分辨质谱采用电喷雾离子源（ESI）,正、负离子切换模式扫描,扫描方式为全扫描/数据依赖二级扫描（Full MS/dd-MS²）。经高分辨质谱采集的数据运用Compound Discoverer 3.0软件进行分析,根据化合物的精确相对分子质量、色谱保留时间、特征离子碎片信息,并结合数据库（mzCloud,mzVault,ChemSpider,中药成分高分辨质谱数据库OTCML）,相关文献和对照品信息比对后鉴定黄连花薹中的化学成分。结果 共鉴定出51个成分,包括生物碱类16个、黄酮类14个、苯丙素类7个、有机酸类7个和其他类7个,其中10个成分［小檗碱、巴马汀、黄连碱、芦丁、槲皮素、异槲皮苷、绿原酸、隐绿原酸,D-（-）奎尼酸和D-脯氨酸］经与对照品比对后准确鉴定。结论 该方法可准确分析黄连花薹中的化学成分,41个成分首次在黄连花薹中报道,6个生物碱类成分首次在黄连植物中发现。该研究可为黄连花薹的质量评价和药效物质基础研究提供方法学参考和实验依据,并为其后续的资源开发奠定基础。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析

目的 明确甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶的活性成分,为寻找新的抗阿尔茨海默病（AD）药物提供参考。方法 采用改良的Ellman''s法筛选甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性部位,超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）对活性部位的化学成分进行分析,色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）,流动相选择乙腈（A）-0.4%氨水溶液（B）梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温30 ℃。二氯甲烷萃取部位A相比例随时间变化为0~3 min,5%A;3~7 min,5%~20%A;7~11.5 min,20%~33%A;11.5~15.5 min,33%~50%A;15.5~20.5 min,50%~80%A;20.5~23 min,80%~85%A;23~25 min,85%~95%A。正丁醇萃取部位A相比例随时间变化为0~2 min,5%A;2~8 min,5%~20%A;8~11 min,20%~33%A;11~15 min,33%~95%A。质谱条件为电喷雾离子源,正离子全扫描模式采集数据,检测范围m/z 100~1 500。结果 甘青乌头醇提物的二氯甲烷萃取部位和正丁醇萃取部位对乙酰胆碱酯酶均有一定的抑制作用,二者的半数抑制浓度分别为（64±4.4）,（85.7±3.8） mg·L^-1。经UPLC-Q-TOF-MS/MS分析,从二氯甲烷萃取部位共推测出21个生物碱类成分,正丁醇萃取部位共推测出11个生物碱类成分;2个部位均含有的关附壬素为首次在甘青乌头中发现。结论 二萜生物碱是甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性的主要药效物质,值得深入挖掘。     

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS的佛耳草多成分定量分析

目的 建立一种快速稳定的液质联用方法同时分析佛耳草中17种化学成分的含量,为完善佛耳草质量标准提供实验依据。方法 采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）对15批不同产地佛耳草中的17种成分进行定量分析,使用ACQUITY UPLC^? BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,以甲醇（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱（0~1.0 min,8%A;1.0~4.0 min,8%~26%A;4.0~9.0 min,26%A;9.0~14.0 min,26%~34%A;14.0~14.5 min,34%~45%A;14.5~15.0 min,45%~60%A;15.0~18.0 min,60%~90%A;18.0~19.0 min,90%A;19.0~19.01 min,90%~8%A;19.01~20.0 min,8%A）,流速0.3 mL·min^-1,柱温40 ℃,进样量2 μL;运用电喷雾离子源,正、负离子模式全扫描,扫描范围m/z 100~1 000。结果 所建立的测定方法经方法学验证良好,能够用于17种成分的同时定量。15批佛耳草样品中奎宁酸、没食子酸、原儿茶酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、异槲皮苷、1,5-O-二咖啡酰奎宁酸、大波斯菊苷、紫云英苷、异绿原酸C、木犀草素、芹菜素、高车前素的质量范围依次为39.60~179.12、0.17~0.84、2.41~8.38、4.33~31.50、13.63~180.38、2.43~14.75、1.16~19.68、0.49~5.63、55.77~445.16、0.23~10.26、62.04~530.10、1.11~18.01、11.36~90.61、12.22~65.98、7.22~69.84、3.37~45.65、0.30~2.59 μg·g^-1,其中有机酸类成分在佛耳草中含量比黄酮类成分更高,以1,5-O-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、奎宁酸、绿原酸含量较高,同时,贵州产地佛耳草样品中黄酮类成分含量高于江苏产地样品,江苏产地佛耳草样品中有机酸类成分含量则高于贵州产地样品。结论 建立的检测方法可用于佛耳草中17种成分含量的快速、准确测定,明确了佛耳草主要成分的含量范围,可为佛耳草质量控制标志物的选择提供参考。     

经典名方温经汤的基准样品特征图谱分析

目的 建立温经汤基准样品特征图谱。方法 采用高效液相色谱法（HPLC）,建立温经汤基准样品的HPLC特征图谱分析方法,在此基础上,分别采用同一品牌多根色谱柱和4种不同品牌色谱柱,3个不同厂家仪器进行了系统适应性考察,计算相对保留时间,统计不同色谱柱、不同仪器的相对保留时间偏差,并对该方法进行方法学考察。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MSⁿ）对温经汤基准样品成分进行鉴别,色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~2.8 min,10%A;2.8~8.0 min,10%~18%A;8.0~12.2 min,18%~25%A;12.2~15.3 min,25%~40%A;15.3~17.4 min,40%A;17.4~20.5 min,40%~90%A）,流速0.4 mL·min^-1,柱温30 ℃。质谱条件为电喷雾离子源,正、负离子模式扫描,检测范围m/z 50~1 600。结果 共选取了10个共有特征峰,通过对照品比对,指认了其中8个,分别为芍药苷（1号峰）,芹糖甘草苷（2号峰）,甘草苷（3号峰）,阿魏酸（4号峰）,甘草素（6号峰）,桂皮醛（8号峰）,丹皮酚（9号峰）和甘草酸（10号峰）。通过质谱分析,共鉴定了30个化合物,主要包括甘草三萜皂苷类和黄酮类、人参中人参皂苷类、白芍中单萜苷类和鞣质类、牛膝中甾酮类、当归中酚酸类成分。结论 所建立的温经汤特征图谱分析方法简便稳定、重复性好,通过质谱指认及来源归属,基本明确了温经汤基准样品的物质基础,可为后续温经汤的开发和质量控制提供参考依据。