地塞米松对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中细胞因子分泌及T细胞亚群表达的影响

目的 探讨地塞米松对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中白细胞介素(IL)-17、干扰素(IFN)-γ分泌水平和Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群表达的影响.方法 SLE患者和健康对照者的PBMCs分空白孔、佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)孔、PMA/Ionomycin+地塞米松(DEX)孔行体外培养,运用四色流式细胞术检测PBMCs表达Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群的百分比,采用酶联免疫吸附法测定SLE患者和健康对照者血浆及PBMCs培养上清中IL-17、IFN-γ的表达水平.结果 SLE组患者血浆IL-17[138.98(84.82～187.04)ng/L]、IFN-γ[21.92(15.95～27.09)ng/L]含量均高于正常对照组[57.21(47.78～72.12)ng/L,13.43(7.04～17.37)ng/L].无PMA刺激条件下,SLE患者PBMCs培养上清中细胞因子水平、PBMCs中各T细胞亚群的百分比与正常对照组相比差异均无统计学意义(P均＞0.05);加入PMA刺激后,SLE患者PBMCs上清中IL-17的水平[(26.43±10.04)ng/L]和外周血Th17[(2.49±1.49)%]、Tc1[(44.89±16.43)%]细胞的比例均显著高于正常对照组[(18.06±5.42)ng/L,(1.47±0.73)%,(31.41±9.05)%)(P均＜0.05),SLE患者Th1、Tc17细胞百分比与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P均＞0.05);地塞米松能明显抑制活化状态下的PBMCs分泌IL-17的水平[(16.72±6.09)ng/L](P＜0.01),且显著下调Th17(1. 34±0.76)%、Tc1(34.62±17.25)%细胞百分比(P均＜0.05),而地塞米松对IL-17的抑制作用更强.结论 SLE患者体内T细胞亚群及其相应细胞因子的表达水平存在明显异常,地塞米松能干扰SLE患者体内细胞因子网络失衡的免疫病理过程,且对IL-17有明显的抑制作用,为临床使用糖皮质激素治疗SLE提供新的理论依据和实验室基础.     

肾癌患者外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2细胞因子的表达

目的检测不同临床分期肾癌患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中细胞因子的表达水平,分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移对肾癌发生和转移的临床意义。方法用流式细胞仪检测60例不同分期肾癌患者和40例正常对照者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-6和IL-10的表达水平。结果与正常对照组相比,无症状型肾癌患者各细胞因子的表达无明显差异,而局限型患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平降低(P<0.01),局部进展型和转移型肾癌患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平明显下降(P<0.01);而Th2、Tc2类细胞因子IL-4、IL-6(P<0.05,P<0.01)分泌水平升高。结论 Th1/Th2偏移和Tc1/Tc2偏移促进了晚期肾肿瘤的进展和转移。T淋巴细胞亚群改变导致免疫功能失调,使肿瘤细胞发生免疫逃逸。     

IL-37对变应性鼻炎患者相关细胞因子免疫调控研究

目的探究白介素37(IL-37)在变应性鼻炎(AR)患者外周血单核细胞(PBMCs)的表达水平及对相关细胞因子的免疫调控分析。方法选取120例AR患者作为研究组,另选择同期健康志愿者120例作为对照组,检测各组血清IL-37蛋白及mRNA表达,辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞百分比及相关细胞因子水平;提取2组PBMCs,并应用浓度为100、200 ng/mL的重组人IL-37蛋白(rIL-37)干预,分析干预前后相关细胞因子水平变化。结果研究组血清IL-37水平及IL-37 mRNA表达均显著低于对照组,Th1细胞、Th17细胞百分比及Th1/Th2比例显著高于对照组,Th2细胞、CD4+CD25+Treg细胞、Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞百分比显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组IL-1β、IL-6、IL-17水平显著高于对照组,IL-4、IL-10、IL-27、IFN-γ、TGF-β1水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清IL-37与IL-1β、IL-6、IL-17存在负相关性,与IL-4、IL-10、IL-27、IFN-γ、TGF-β1存在正相关性(P<0.05)。rIL-37干预后,研究组IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IL-27、IFN-γ、TGF-β1各指标变化更加显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。200 ng/mL组干预PBMCs细胞各细胞因子变化水平相较于100 ng/mL组各指标变化更显著(P<0.05)。结论变应性鼻炎患者IL-37表达明显下降,进而影响了Th1/Th2、Th17/Treg细胞平衡,导致抑炎因子水平降低,促炎因子水平升高,在AR发病中具有重要作用。     

扁桃体和外周血CD8+T细胞表达CXCR5和IL-21水平对比分析

目的 对比分析扁桃体和外周血单个核细胞(PBMC8)中CD8+T细胞表达CXCR5和IL-21的水平是否存在差异.方法 分离扁桃体和正常人PBMCs,四色流式细胞术(FCM)检测扁桃体单个核细胞和PBMCs中CD8+T细胞表达CD69和CXCR5 的水平.采用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)刺激扁桃体单个核细胞和PBMCs后,流式细胞术检测CD8+T细胞表达IL-21的水平.结果 与PBMCs中CD8+T细胞相比,扁桃体组织中CD8+T细胞高表达CD69和CXCR5(P＜0.05),经PMA+Ionomycin刺激后,扁桃体CD8+T细胞可检测到IL-21的表达,而PBMCs中CD8+T细胞基本不产生IL-21.结论 CD8+T细胞的表型和功能在扁桃体组织和PBMCs中存在差异,扁桃体中CD8+CXCR5+和CD8+IL-21+T细胞的免疫功能有待进一步研究.     

多发性硬化患者造血干细胞移植后Th、Tc细胞亚型的变化

目的观察多发性硬化(MS)患者自体造血干细胞移植(AHSCT)前后外周血中辅助性T细胞(Th)、细胞毒性T细胞(Tc)亚型的变化,及其在AHSCT后诱导MS缓解中的作用。方法用流式细胞仪(FCM)检测患者移植前1周及移植后1月外周血中Th、Tc细胞亚型,及其分别占CD3+T淋巴细胞的百分比。结果MS患者外周血Th1和Tc1细胞百分比高于健康对照组(P<0.01及P<0.05),移植后Th1和Tc1显著低于移植前及对照组(P<0.01)。移植前MS患者Th2细胞与健康对照组差异无显著性(P>0.05),Tc2细胞低于对照组(P<0.05)。移植前后相比,移植前组Th2细胞下降(P<0.05),而Tc2差异无显著性(P>0.05)。结论MS患者体内存在高水平的Th1和Tc1。AHSCT可使其逆转,从而有利于MS病情的缓解。     

白介素6对人Th17细胞的免疫调节作用

本研究旨在探讨白介素6(IL-6)对人Th17细胞的调节作用.应用免疫磁珠分离正常人CD4+ T细胞并培养.实验分为2组,实验组(IL-6+):CD4+ T细胞(1×106/ml)经重组人IL-6(20ng/ml)刺激4天;对照组(IL-6-):不经IL-6刺激.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中IL-17蛋白水平,流式细胞术(FCM)检测Th17细胞数量.结果发现,与对照组相比,经IL-6刺激后的CD4+ T细胞上清中IL-17蛋白水平明显升高(337.05±189.09pg/ml vs 15.07±12.70 pg/ml)(p<0.05);进一步FCM发现,IL-6剌激组Th17细胞数量明显高于对照组[(4.05± 0.30)% vs(2.81±0.44)]%,(p<0.01).结论:IL-6促进人Th17细胞的增殖.     

系统性红斑狼疮外周血Tc与Th细胞漂移的变化及意义

目的:探讨Tc1/Tc2、Th1/Th2及Tc/Th的失衡与系统性红斑狼疮(SLE)分期的关系及意义。方法:采用全血培养、T淋巴细胞荧光标记的流式细胞术分析SLE稳定期和活动期患者及正常健康人外周血中T淋巴细胞亚群及其细胞内因子γ-干扰素(IFN-γ)和白介素4(IL-4)表达率的变化,比较Tc1、Tc2;Th1、Th2,Tc/Th细胞比率在系统性红斑狼疮患者稳定期、活动期的变化,与SLEDAI分期的相关性。结果:SLE活动期患者的CD4~+/CD8~+比值明显低于正常对照组,而其Tc1、Th1细胞表达水平、Tc1/Tc2、Th1/Th2比值则均明显高于SLE稳定期及正常对照组(P0.05),但在SLE稳定期与正常对照组无差异(P0.05)。结论:Tc/Th的失衡及Tc与Th细胞向Tc1、Th1漂移的变化在SLE的发病机理中有着重要的作用。     

来氟米特对类风湿关节炎患者外周血Th1/Th2平衡和关节功能的影响

目的:探讨来氟米特对类风湿关节炎(rheumatoidarthrtitis,RA)患者外周血T淋巴细胞亚群和关节功能的影响及其可能的作用机制。方法:收集25例RA患者(RA组)和10例接受来氟米特治疗前及治疗3个月后的RA患者(治疗组)的外周血,对CD4+,CD8+细胞分泌白细胞介素-4(IL-4)和γ干扰素的情况进行检测。选择9例健康志愿者作为对照组。采用细胞内细胞因子染色、三色流式细胞分析法检测单个细胞分泌细胞因子的情况。结果:RA患者和健康对照组的外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞中,分泌(干扰素的细胞群均比分泌IL-4的细胞群多(t=3.534,P<0.01),同健康对照组犤(7.61±3.27)%犦比较,RA组患者外周血中Th1型细胞犤(4.57±2.70)%犦明显减少(t=-2.233,P<0.05)。接受来氟米特治疗后产生γ干扰素的Th1型、Tc1型细胞和产IL-4的Th2型细胞明显减少(分别t=3.709,3.419,3.211,均P<0.01),而Tc2型细胞则无明显增加或减少(t=1.022,P<0.05),各项关节功能指标包括关节肿胀指数、血沉、C-反应蛋白等均显著下降(t=3.466,3.325,3.207,均P<0.01)。结论:氟米特可能通过抑制Th1型和Tc1型的分化、减少Th1/Tc1型细胞因子如γ干扰素的分泌而发挥抗炎和改善关节功能的作用。     

急性髓系白血病中辅助性T细胞Th9分布和转录因子表达

目的:研究急性髓系白血病(AML)中辅助性T细胞9(T helper cell,Th9)的分布及其与疾病临床特征的关系,同时研究Th9中不同转录因子的激活情况。方法:收集102名AML患者及83名健康人外周血样本,应用CD3磁珠法分离健康人及AML患者外周血T细胞,应用实时定量PCR检测IL-9的mRNA表达,应用流式细胞术检测CD4~+IL-9~+(Th9)细胞在疾病各阶段的比率,以及与IL-9共表达的转录因子激活情况。结果:AML-M2和M3型患者外周血T细胞中IL-9的mRNA表达显著高于健康对照者(P0.01),同时CD4~+IL-9~+细胞比率也明显高于健康对照者(P0.01)。对M2和M3中Th9细胞分布动态监测结果表明,初诊M2和M3及复发M2组Th9细胞比率及IL-9 mRNA表达显著高于缓解状态下M2和M3患者(P0.01)。对调控IL-9表达的转录因子共表达分析表明,初诊及复发M2及M3患者的外周血中p-SMAD3~+的Th9细胞显著多于缓解时M2及M3患者(P0.01);而与之相反,缓解期M2及M3患者外周血中IRF-1~+的CD4~+IL-9~+细胞显著多于初诊M2及M3患者(P0.01)。结论:辅助性T细胞Th9细胞在AML-M2和M3中分布显著增高,并且与疾病状态相关;对于Th9细胞的功能预测需要与其转录因子结合进行,后者对AML患者体内肿瘤微环境具有重要意义。     

异基因非清髓造血干细胞移植后WT1特异性T细胞亚群与移植物抗宿主病的关系

目的 探讨非清髓造血干细胞移植后WT1诱发的各T细胞亚群与移植物抗宿主病(GVHD)之间的关系.方法 分析19例表达WT1的白血病患者在全相合非清髓造血干细胞移植后GVHD的发生情况;WT1126-134体外刺激患者外周血单个核细胞,采用胞内因子染色法(ICCS)检测移植前后外周血中Tc1、Tc2、Th1及Th2细胞;对供受者表达HLA-A*0201的14例患者采用HLA-A*0201/WT1五聚体检测外周血中的WT1+CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL).结果 ①19例患者中,17例并发GVHD,其中16例在GVHD发生时出现以Tc1及Th1细胞为主的高峰(P=0.039).②Ⅱ度以上急性GVHD(aGVHD)患者在GVHD发生时Tc1及Th1细胞峰值水平均高于Ⅰ度aGVHD者,但差异无统计学意义(P=0.900及P=0.140).③弥漫型慢性GVHD(cGVHD)患者Tc1及Th1细胞峰值水平明显高于局限型cGVHD者,但仅Th1细胞峰值水平差异具有统计学意义(P=0.004),而Tc1细胞峰值水平差异无统计学意义(P=0.060).④未并发GVHD者Tc1、Th1及WT1+CD8+CTL峰值水平接近于轻度aGVHD患者的平均水平,但低于中重度aGVHD患者的平均水平.结论 GVHD发生时WT1诱发的移植物抗白血病(GVL)效应增强,其强度与GVHD尤其是cGVHD发生的严重程度相关;相对于局限型cGVHD患者,弥漫型cGVHD患者WT1诱发GVL效应的增强可能与Th1细胞有关.

Abstract：

Objective To explore the relationship between WT1-induced T-cell subsets and graftversus-host disease(GVHD) after nonmyeloablative allogeneic hematopoietic stem cell transplantation(NST).Methods Peripheral blood mononucleated cells(PBMCs) from 19 patients who expressed WT1 and developed GVHD after NST were simulated by WT1126 - 134 peptide in vitro, and proportions of WT1-induced-T-cell subsets (Tc1 ,Tc2 ,Th1 ,Th2 cells) before and after transplant were detected by intracellular cytokine staining (ICCS) assay. WT1 -specific CD8 + CTLs of 14 patients with HLA-A * 0201 were detected by HLA-A *0201/WT1 pentamer. Results ①)17 of 19 patients developed GVHD, among whom proportions of Tc1 and Th1 cells, achieved peak value in 16 patients at occurrence of GVHD( P =0. 039) ;②The peak proportions of Tc1 and Th1 cells in patients with aGVHD above grade Ⅱ were higher than those with grade Ⅰ , but being no statistical difference ( P = 0. 900 and P = 0. 140, respectively ); ③The peak proportion of Th1 cells ( P =0.004), but not Tc1 cells( P =0.060)in patients with extensive cGVHD was significantly higher than that in patients with limited one;④)Proportions of Tc1, Th1 and WT1 + CD8+ CTL in patients without GVHD were similar to those in patients with Grade Ⅰ aGVHD, but lower than those in aGVHD above grade Ⅱ. Conclusion GVHD promotes the generation of WT1-induced GVL effect, and the intensity of the latter maybe correlated with the intensity of GVHD, especially cGVHD. Th1 cells play a more important role in the enhancement of WT1-induced GVL effect in extensive cGVHD patient than in limited cGVHD patients.     

IL-23在单纯疱疹病毒Ⅱ型致病中的作用

目的 探讨IL-23在单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)致病机制中的作用.方法 应用ELISA法检测HSV病毒感染复发患者外周血IL-23、IL-12、IFN-γ、IL-14、IL-10水平,以及细胞培养液中IFN-γ水平,流式细胞仪检测记忆性CD4+T细胞表达IFN-γ的水平,同时设立健康对照组进行比较.结果 生殖器疱疹复发患者(RGH)组血清IL-23、IL-12、IFN-γ水平明显低于健康对照组,IL-14、IL-10水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);IL-23剂量依赖性诱导患者单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ,并刺激记忆性CD4+T细胞表达IFN-γ.结论 IL-23等Th1型细胞因子在RGH患者体内水平低下,Th1/Th2平衡失调,机体不能有效抑制病毒,是导致病情反复的重要原因;IL-23可能在体内同样刺激T细胞产生IFN-γ,发挥抗病毒效力.     

流式细胞术检测分析人巨细胞病毒核酸疫苗诱导宿主细胞免疫效应

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)pp65核酸疫苗对宿主细胞免疫功能的诱导效应。方法用自行构建的含HCMVpp65基因的重组质粒免疫小鼠,用流式细胞仪检测免疫小鼠脾脏T淋巴细胞亚群的变化以及CD8 T细胞分泌干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4的情况,并以四甲基偶氮唑盐(MTT)增殖试验作补充验证。结果接种重组质粒组与仅接种空质粒或生理盐水对照组小鼠的免疫效应不同,表现为CD8 T细胞百分率增加(P<0.05),分泌细胞因子IFN-γ和IL-4的CD8 T细胞百分率亦增高(P<0.05),两者的平均荧光强度值增高更为显著(P<0.05)。免疫小鼠的脾脏T细胞经HCMVpp65蛋白刺激后,实验组的刺激指数(SI)较对照组明显增高(P<0.05)。结论HCMVpp65核酸疫苗接种可诱导宿主的细胞免疫反应,倾向于表现为细胞毒性T细胞(Tc)1和Tc2的混合应答以及脾脏T细胞的增殖效应。     

麻疹患者T淋巴细胞亚群和调节性T淋巴细胞分析

目的 探讨成年人及儿童麻疹患者急性期与恢复期T淋巴细胞及调节性T淋巴细胞表达水平的变化。 方法 成年人及儿童麻疹患者各40例,用流式细胞术分别测定各组出疹期和恢复期患者外周血CD+3总T细胞、CD+4辅助性T细胞(Th)、CD+8细胞毒性T细胞(Tc)及CD+4CD+25调节性T淋巴细胞(Treg)比例。 结果 成年人麻疹患者出疹期较对照期外周血CD+3总T和CD+4Th表达水平降低,CD+4CD+25 Treg表达水平升高,恢复期CD+4Th升高,CD+8Tc降低,CD+4/CD+8比值升高,CD+4CD+25 Treg降低。儿童麻疹患者出疹期较对照组CD+3总T、CD+4Th降低,恢复期较出疹期CD+3总T表达回升。 结论 T淋巴细胞及调节性T淋巴细胞参与成年人及儿童麻疹患者免疫状态的调节,但其表达水平在成年人和儿童中有差异。     

人外周血初始CD4~+T细胞向Th17细胞分化条件研究

目的探讨细胞因子水平对人外周血初始CD4~+T细胞向辅助性T细胞17(Th17细胞)分化的影响。方法选取人外周血单个核细胞分选初始CD4~+T细胞,在转化生长因子(TGF)-β存在下,以白细胞介素(IL)-1β和IL-23系列水平刺激其向Th17细胞分化。以流式细胞术检测IL-17A~+细胞比例,以荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测IL-17A、IL-17F、维A酸相关孤独受体(ROR)γt、RORα和IL-23R等相关因子表达水平。结果初始CD4~+T细胞经细胞因子刺激,IL-17A~+细胞比例显著升高(0.2%~1.0%),同时IL-17A等相关因子表达均显著增高,差异有统计学意义(P0.05),但IL-1β和IL-23系列水平刺激没有出现显著的量效关系,差异无统计学意义(P0.05)。结论现有条件可成功诱导人外周血初始CD4~+T细胞向Th17细胞分化,但分化效率不高,提高IL-1β和IL-23水平未显著提升分化效率,具体原因亟待进一步探索。     

哮喘患儿外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞检测及其意义

目的:探讨哮喘患儿急性发作期及缓解期Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞亚群平衡的变化情况。方法:采用荧光标记抗体,应用三色荧光流式细胞仪技术,从单细胞水平对急性发作期哮喘患儿(20例)、缓解期哮喘患儿(18例)及同龄正常健康儿(对照组20例)外周血CD4+、CD8+细胞内分泌IFN-γ、IL-4进行检测。结果:哮喘患儿外周血细胞内分泌IL-4(+)的CD4+(Th2)、CD8+(Tc2)百分率较正常对照组升高,且哮喘急性发作期高于缓解期;分泌IFN-γ(+)的CD4+(Th1)、CD8+(Tc1)百分率较正常对照组降低,且哮喘急性发作期低于缓解期。结论:哮喘患儿外周血Th2、Tc2百分率升高,Th1、Tc1百分率降低,Th1/Th2、Tc1/Tc2比值降低,且哮喘急性发作期低于缓解期。     

化疗联合DC-CIK细胞治疗对胰腺癌患者免疫功能的影响

目的探讨DC-CIK细胞免疫治疗对化疗后胰腺癌患者免疫功能的影响。方法对50例经病理确诊的胰腺癌患者依据治疗方式分为两组:化疗联合自身DC-CIK细胞治疗25例患者作为联合治疗组,同期单纯化疗25例患者作为对照组。分别于治疗前、治疗后相同时间点取外周血,采用流式细胞仪检测T细胞亚群及CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg)的变化;ELISA方法检测IFN-γ及IL-4水平的变化。结果联合治疗组患者治疗后外周血CD3+、CD4+、CD3+CD56+T细胞百分率上升,CD4+/CD8+值上调,CD8+T细胞百分率下降(P<0.05或P<0.01);CD4+CD25+CD127lowTreg下降(P<0.01);Th1细胞因子IFN-γ水平较治疗前升高,而Th2细胞因子IL-4水平降低(P<0.01)。对照组单纯化疗后CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率下降(P<0.05或P<0.01);CD4+CD25+CD127lowTreg下降(P<0.01);IFN-γ和IL-4水平降低(P均<0.01)。结论化疗联合DC-CIK细胞治疗能提高胰腺癌患者的免疫功能,增强机体的抗肿瘤免疫效应,是治疗胰腺癌患者的辅助手段之一。     

为过继性免疫治疗培养淋巴细胞时的细胞因子作用和基因表达特征

在过继免疫性细胞培养时需要加入不同的细胞因子。本研究旨在比较不同细胞因子及EBV抗原肽联合细胞因子刺激淋巴细胞后淋巴细胞分化方向和相关的基因表达变化特征。分别用不同细胞因子及EBV抗原肽联合细胞因子刺激淋巴细胞,在培养的当天和第1、3、7、10天,用流式细胞术检测各组细胞中CD3+(总T细胞)、CD3+CD4+(辅助T细胞)、CD3+CD8+(细胞毒性T细胞)、CD3+CD8+CD45RO+(记忆型T细胞)、CD3+CD8+CD45RA+(初始型T细胞)、CD3+CD30+(Th2辅助细胞)、CD19+(B细胞)、CD56+(NK细胞)、CD4+CD25+(初始调节T细胞)、CD4+CD25+FOXP3+(精确调节T细胞)在培养前后总细胞中的百分比变化;用RT-PCR技术检测管家基因mad1、pten和辅助T细胞转录调控基因t-bet(Th1)、gata3(Th2)、细胞因子ifn-γ(Th1)、il-4(Th2)基因表达量。结果表明:EBV多肽组CTL细胞成为优势细胞,临床治疗有确切疗效;比较加入EBV多肽组和不同细胞因子培养组结果显示,EBV抗原肽可以更有效刺激CTL生成,ifn-γ基因表达量明显增加;辅...     

强直性脊柱炎外周血Th17细胞的检测及意义

目的探讨Th17细胞在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的水平及意义。方法取20例AS患者(分AS病情稳定组及活动组各10例)和健康人外周血单个核细胞(PBMC)、免疫磁珠分选CD4+T细胞,用或不用非特异性刺激剂(anti-CD3、anti-CD28),然后加佛被酯/离子霉素,经固定/透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术检测CD4+T细胞内白细胞介素-17(IL-17)、γ-干扰素(IFN-γ)、及IL-6水平。结果免疫磁珠分选CD4+T细胞纯度达90%以上。AS病情活动组IL-17表达水平较病情稳定组和健康对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。用anti-CD3、anti-CD28刺激后,CD4+T细胞IL-17胞内表达水平较无刺激有一定的增加。AS患者CD4+T细胞IFN-γ胞内表达水平呈现与IL-17表达相似的特点。结论 AS患者外周血CD4+T细胞胞内IL-17和IFN-γ呈高表达,提示分泌IL-17的Th17细胞和分泌IFN-γ的Th1细胞共同参与了AS发病过程。     

多发性硬化患者造血干细胞移植后Th、Tc细胞亚型的变化

目的 观察多发性硬化（MS）患者自体造血干细胞移植（AHSCT）前后外周血中辅助性T细胞（Th）、细胞毒性T细胞（Tc）亚型的变化,及其在AHSCT后诱导MS缓解中的作用.方法 用流式细胞仪（FCM）检测患者移植前1周及移植后1月外周血中Th、Tc细胞亚型,及其分别占CD3＋T淋巴细胞的百分比.结果 MS患者外周血Th1和Tc1细胞百分比高于健康对照组（P〈0.01及P〈0.05）,移植后Th1和Tc1显著低于移植前及对照组（P〈0.01）.移植前MS患者Th2细胞与健康对照组差异无显著性（P〉0.05）,Tc2细胞低于对照组（P〈0.05）.移植前后相比,移植前组Th2细胞下降（P〈0.05）,而Tc2差异无显著性（P〉0.05）.结论 MS患者体内存在高水平的Th1和Tc1.AHSCT可使其逆转,从而有利于MS病情的缓解.     

类风湿关节炎患者外周血Th17细胞的检测及其临床意义

目的探讨Th17细胞与类风湿关节炎(RA)疾病的相关性。方法采用RT-PCR检测外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞的特异性转录因子视磺醛酸相关的孤儿核受体(RORγt)mRNA;酶联免疫吸附法(ELISA)检测20例健康体检者和22例RA患者外周血单个核细胞(PBMCs)刺激培养后,上清液中白细胞介素-17(IL-17)的水平。结果与健康对照组相比,RA患者PBMCs刺激后产生IL-17的量明显增高(P<0.01),RORγtmRNA也高于健康对照组(P<0.01)。结论 Th17细胞参与了RA发病及病情发展。