白桦脂酸对CCl4诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及机制研究

目的 研究白桦脂酸(Betulinic acid)对四氯化碳(CCl₄)诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其相关机制。方法 50只ICR小鼠随机分为5组:空白对照组、CCl₄组、CCl₄+水飞蓟素组（200mg/kg）、CCl₄+白桦脂酸低剂量组（20mg/kg）、CCl₄+白桦脂酸高剂量组（40mg/kg）。除空白对照组和CCl₄组给予等体积蒸馏水外,其余各组每日灌胃给予相应剂量药物,共7d。末次给药2h后,腹腔注射0.1%的CCl₄植物油溶液（10mL/kg）,空白对照组腹腔注射等体积植物油。18h后取血、肝脏。各组小鼠肝脏做HE染色,检测血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、白介素（IL-6、IL-1β）和肿瘤坏死因子（TNF-α）水平,并采用蛋白免疫印记法（Western blot）检测肝脏组织中p-NF-κB、NF-κB、p-IκBα、IκBα、Nrf-2和HO-1蛋白表达。结果 白桦脂酸（20、40mg/kg）能降低CCl₄诱导的肝损伤小鼠血清MDA、IL-6、IL-1β和TNF-α含量（P<0.01）,升高SOD含量（P<0.01）;能显著改善小鼠肝脏组织的病理学改变;显著降低肝脏p-NF-κB、p-IκBα蛋白表达（P<0.01）,增加肝脏Nrf-2和HO-1蛋白表达（P<0.05~0.01）。结论 白桦脂酸对CCl₄诱导的小鼠肝损伤具有保护作用,这种效应可能与Nrf-2/HO-1/NF-κB信号通路有关。      

龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤的保护作用

目的 研究龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤的保护作用。方法 体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,传至第二代后分5组培养:正常组、地塞米松（10-8mol/L）组、骨化三醇含药血清组、龟鹿二仙胶含药血清低剂量组、龟鹿二仙胶含药血清高剂量组。MTT法检测骨髓间充质干细胞活力,检测细胞上清中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、炎症因子白介素-6（IL-6）、小鼠白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。采用Western blot检测Nrf-2/HO-1/NF-κB信号通路蛋白表达。结果 龟鹿二仙胶能显著提高细胞活力,增加SOD水平、降低MDA水平、降低炎症因子水平,增加蛋白Nrf-2、HO-1蛋白表达水平,降低NF-κB信号蛋白表达。结论 龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤有保护作用,且作用与调控Nrf-2/HO-1/NF-κB信号相关。      

基于氧化应激和炎症探讨健脾解毒汤治疗银屑病脾虚湿盛证大鼠的作用机制

目的 基于氧化应激和炎症探讨健脾解毒汤对银屑病脾虚湿盛证大鼠影响的作用机制。 方法 将48只6～8周龄,体重180～200 g的SPF级SD雄性大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、阳性药物对照组及健脾解毒汤低、中、高剂量组,每组8只。空白组背部除毛后涂抹凡士林,其余各组涂抹5%咪喹莫特乳膏（62.5 mg,2次/d）及灌胃大黄颗粒剂（10 ml/kg,2次/d）,持续10 d构建银屑病脾虚湿盛证模型。造模成功后,健脾解毒汤低、中、高剂量组分别予2.32、4.64、9.26 g/kg健脾解毒汤灌胃;阳性药物对照组给予甲氨蝶呤片0.97 mg/kg灌胃;空白组、模型组给予等量生理盐水。给药14 d后,比较六组银屑病面积和严重程度指数（PASI）、组织病理情况、白细胞介素-22（IL-22）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活力,比较六组皮损处血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达情况。 结果 健脾解毒汤低、中、高剂量组红斑、鳞屑、浸润、进食排便情况优于模型组。健脾解毒汤低、中、高剂量组PASI低于模型组,且健脾解毒汤高剂量组低于健脾解毒汤低、中剂量组（P＜0.05）。与模型组比较,健脾解毒汤低、中、高剂量组表皮增生及角化不全减轻,表皮突变短,真皮血管扩张减弱。模型组血清SOD活力、GSH及皮肤组织HO-1水平低于空白组,血清MDA、IL-22水平高于空白组（P＜0.05）。健脾解毒汤低、中、高剂量组血清GSH高于模型组,健脾解毒汤中、高剂量组血清SOD活力高于模型组,血清MDA、IL-22低于模型组,健脾解毒汤高剂量组皮肤组织HO-1高于模型组（P＜0.05）。健脾解毒汤中、高剂量组血清SOD活力、GSH水平高于健脾解毒汤低剂量组,血清MDA、IL-22水平低于健脾解毒汤低剂量组,健脾解毒汤高剂量组皮肤组织HO-1高于健脾解毒汤低剂量组（P＜0.05）。健脾解毒汤高剂量组血清SOD活力、GSH及皮肤组织HO-1水平高于健脾解毒汤中剂量组,血清MDA低于健脾解毒汤中剂量组（P＜0.05）。 结论 健脾解毒汤对银屑病脾虚湿盛证大鼠病变症状具有一定的改善作用,与降低血清中炎症指标,发挥抗感染及抗氧化应激作用相关。     

金雀异黄酮对糖尿病大鼠心肌Nrf2/HO-1通路的影响

目的：观察金雀异黄酮(genistein,Gen)对糖尿病大鼠心肌组织核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素氧化酶1(heme oxygenase-1,HO-1)通路的影响。 方法：将32只雄性SD大鼠随机分为 4组：正常对照(NC)组、糖尿病对照(DM)组、低剂量Gen治疗(L-Gen)组和高剂量Gen治疗(H-Gen)组(n=8)。采用腹 腔注射55 mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型。造模成功后,L-Gen组和H-Gen组大鼠分别灌胃给予Gen溶液10 和50 mg/kg。8周后,测定各组大鼠左心室动力学指标和空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)水平;测定心肌组织丙 二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)水平;采用透射电镜观察心肌超微结构变化;RT-PCR检测心肌组织 HO-1 mRNA表达,蛋白质印迹法检测Nrf2和HO-1蛋白表达。结果：与NC组比较,DM组左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP),左心室内压最大上升/下降速率(maximal rise/fall rate of left ventricular pressure,±dp/dtmax), GSH-Px,SOD和CAT水平明显降低(均P<0.01);左心室舒张末期压(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP), FBG和MDA水平明显增高(均P<0.01);心肌超微结构损伤明显,心肌组织Nrf2和HO-1表达明显降低(均P<0.01)。与 DM组比较,L-Gen组FBG无显著差异,±dp/dtmax和LVSP明显升高(均P<0.05),LVEDP和MDA水平明显下降(P<0.05或 P<0.01),GSH-Px,SOD和CAT活性明显增高(P<0.05或P<0.01),心肌超微结构损伤减轻,Nrf2和HO-1表达升高(均 P<0.01);H-Gen组上述指标改善更明显(P<0.05或P<0.01)。 结论：金雀异黄酮可减轻糖尿病大鼠心肌氧化应激损伤, 其机制与调节心肌Nrf2/HO-1通路,提高抗氧化酶活性相关。     

缺血后处理对心肌缺血/再灌注大鼠血红素加氧酶-1表达的影响

目的:探讨缺血后处理对心肌缺血/再灌注大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法:56只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)(n=8)、缺血再灌注组(I/R组)(n=16)、缺血后处理组(IPo组)(n=16)和血红素加氧酶抑制剂锌原卟啉组(ZnPP组)(n=16)。采用结扎心脏左冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h制备心肌缺血再灌注损伤模型。IPo组在结扎心脏左冠状动脉前降支30 min,再灌注10 s,缺血10 s,重复3次后,完全恢复心肌血流。再灌注2 h后开胸,每组8只取心尖部缺血心肌,测定超氧化物歧化酶(SOD)活性、心肌组织中丙二醛(MDA)含量和心肌中HO-1蛋白表达。I/R组I、Po组和ZnPP组另取8只大鼠测定心梗面积。结果:与S组比较,I/R组缺血心肌中MDA含量增加,SOD活性降低(P<0.01),I/R组HO-1表达无统计学差异(P>0.05)。与I/R组比较,IPo组缺血心肌中MDA降低,SOD活性升高且心梗面积明显减小(P<0.01),HO-1蛋白表达显著增强(P<0.01)。与IPo组比较,ZnPP组MDA含量升高,SOD活性降低(P<0.01),HO-1表达明显减少(P<0.01)。结论:缺血后处理能减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与增强心肌抗氧化能力和增加血红素加氧酶(HO-1)的表达有关。     

独活寄生汤改善佐剂性关节炎大鼠氧化应激机制探讨

【目的】探讨独活寄生汤对佐剂性关节炎(AIA)大鼠抗氧化能力及对核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的影响。【方法】采用弗式完全佐剂成功诱导大鼠佐剂性关节炎模型。将90只大鼠随机分为正常组,模型组,甲氨喋呤组(剂量为0.5 g·kg~(-1),日2次),独活寄生汤低、中、高剂量组(剂量分别为0.75、1.5、3.0 g·kg-1,日2次),每组15只,连续给药24 d。采用荧光定量聚合酶链反应(q PCR)法检测各组大鼠滑膜组织超氧化物歧化酶(SOD)mRNA、丙二醛(MDA)mRNA、HO-1 mRNA表达变化,采用分光光度法检测各组大鼠滑膜组织SOD、MDA含量,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组大鼠滑膜组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达。【结果】独活寄生汤高、中剂量可上调模型大鼠滑膜组织SOD表达,降低MDA的表达,降低胞质Nrf2含量,升高胞核Nrf2含量,提高Nrf2核转位率,增强滑膜组织HO-1的表达,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。【结论】独活寄生汤具有增强抗氧化应激的能力,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号途径,促进Nrf2核转位,进而促进下游抗氧化因子HO-1的表达有关。     

红景天苷对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠Nrf-2及NF-κB信号通路的影响

目的:探讨红景天苷对肺动脉高压大鼠的肺组织病理与Nrf-2及NF-κB信号通路的影响。方法:将6~8周龄雄性SD大鼠随机分为五组,每组6只。正常对照组注射对照溶剂,模型对照组及药物干预组(低、中、高)皮下注射60mg/kg野百合碱后,于2~28d后分别给予低、中、高浓度组注射50、100、200mg/(kg·d)红景天苷,其余组别分别注射生理盐水;实验结束后,分别检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)及右心室肥厚指数;组织病理学检测大鼠肺组织细小动脉病理变化,RT-PCR检测肺组织HO-1、TNF-α、IL-6mRNA表达水平,Western blot检测肺组织核蛋白Nrf-2、NF-κB p65蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组RVSP及右心室肥厚指数显著上升,肺组织表现明显炎症浸润,肺组织核蛋白Nrf-2及NF-κB均出现上调,HO-1及TNF-α、IL-6mRNA表达上调(P<0.05);经过不同浓度红景天苷干预后,各组大鼠RVSP及右心室肥厚指数出现变化,高浓度组显著下调(P<0.05);Nrf-2核蛋白水平及HO-1mRNA表达进一步上升,NF-κB p65水平及TNF-α、IL-6mRNA表达逐渐下调,呈浓度依赖(P<0.05)。结论:红景天苷能够减缓野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压,可能与Nrf-2活化以及抑制NF-κB信号通路有关。     

异丙酚对大鼠心肌细胞氧化损伤时血红素加氧酶-1表达的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠心肌细胞氧化损伤时血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响.方法 培养1周的乳鼠心肌细胞按9×10~4/ml接种在96孔培养板上,每孔0.1 ml,随机分为8组,每组6孔:对照组(C组)、H_2O_2组(H组)、低剂量异丙酚组(LP组)、中剂量异丙酚组(MP组)、高剂量异丙酚组(HP)、低剂量异丙酚+抑制剂组(LP+I组)、中剂量异丙酚+抑制剂组(MP+I组)、高剂量异丙酚+抑制剂组(HP+I组).抑制剂采用ZnPP IX.各组于孵育6 h后,测定心肌细胞丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、线粒体、Caspase-3的活性及HO-1 mRNA表达.结果 与C组比较.其余各组心肌细胞MDA含量上升、SOD含量及线粒体活性降低;H组心肌细胞Caspase-3活性升高、HO-1 mR-NA表达上调;不同剂量异丙酚组心肌细胞HO-1 mRNA表达上调;不同剂量异丙酚组经ZnPP Ⅸ处理后心肌细胞Caspase-3活性升高,均P<0.05或P<0.01.与H组比较,不同剂量异丙酚组心肌细胞MDA含量降低、SOD活性升高、线粒体活性升高,MP组和HP组心肌细胞Caspase-3活性降低、细胞HO-1 mRNA表达上调(P<0.05或P<0.01).与相应剂量异丙酚组比较,经ZnPP IX处理后心肌细胞MDA含量升高、SOD活性降低、线粒体活性降低、HO-1 mRNA 表达下调,MP+I、HP+I组心肌细胞Caspase-3活性增高(P<0.05或P<0.01).结论 异丙酚可通过上调HO-1的表-达而减轻H_2O_2导致的心肌细胞损伤.     

心肌缺血再灌注损伤大鼠胱硫醚β-合酶/硫化氢和血红素氧合酶-1/一氧化碳的相互作用

目的 研究胱硫醚母β-合酶(CBS)/硫化氢(H2S)体系和血红素氧合酶-1(HO-1)/一氧化碳(CO)体系在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的相互作用.方法 30只SD大鼠随机分为5组(n=6):对照组(C组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)、心肌缺血再灌注+锌原卟啉(HO-1抑制剂)组(I/R+Z组)、心肌缺血再灌注+羟氨(CBS抑制剂)组(I/R+H组)、心肌缺血再灌注+锌原卟啉+羟氨组(I/R+Z+H组).I/R+Z组、I/R+H组和I/R+Z+H组夹闭左冠状动脉前30 min分别腹腔注射锌原卟啉45μmol/kg、5 mmol/L羟氨1 ml和5 mmol/L羟氨1 ml+锌原卟啉45μmol/kg,C组和I/R组腹腔注射等量生理盐水.缺血30 min再灌注2 h后处死大鼠取心肌组织,测定大鼠心肌组织中H2S、NO、GSH、MDA含量、SOD活性及CBS-mRNA和HO-1-mRNA表达的变化;电镜下观察心肌组织线粒体的变化.结果 与C组相比,I/R组H2S、CO和MDA含量增高,GSH含量和SOD活性降低,CBS-mRNA和HO-1-mRNA表达增高.与I/R组相比,I/R+Z组CO含量降低,H2S和GSH含量增高,CBS-mRNA表达增高,HO-1-mRNA表达降低;I/R+H组H2S和GSH含量降低,CO含量增高,CBS-mRNA的表达降低,HO-1-mRNA表达增高;I/R+Z+H组H2S、CO、GSH含量和SOD活性降低,MDA含量增高,CBS-mRNA和HO-1-mRNA的表达均降低;I/R+Z+H组大鼠心肌组织线粒体损伤加重(P<0.05).结论 CBS/H2S体系和HO-1/CO体系在大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中有相互作用.     

甘草酸对大鼠肝星状细胞氧化应激抑制作用的机制研究

目的 探讨甘草酸对大鼠肝星状细胞(HSC)的氧化应激及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶(HO)-1信号通路的影响.方法 体外培养HSC细胞,将细胞分为5组:空白对照组、次氮基三乙酸铁(Fe-NTA)处理组、Fe-NTA+5 μmol/L甘草酸组、Fe-NTA+10 μmol/L甘草酸组及Fe-NTA+20 μmol/L甘草酸组;给药24 h后收集细胞,采用相关试剂盒检测HSC细胞中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽(GSH)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;RT-PCR和Western blot方法分别检测Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白表达水平.结果 Fe-NTA处理组中MDA、NO含量明显升高,而GSH水平显著降低,SOD酶活性也显著降低;而甘草酸处理的3组细胞中MDA、NO含量显著降低,GSH水平显著升高,SOD酶活性也显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05).Fe-NTA处理组中Nrf2和HO-1mRNA及蛋白表达水平与空白对照组比较显著降低,而甘草酸处理的3组细胞中Nrf2和HO-1mRNA及蛋白表达水平相对于Fe-NTA处理组显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 甘草酸有抗HSC细胞氧化应激损伤的作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关.     

海藻玉壶汤中海藻不同品种与甘草加减应用对甲状腺肿大大鼠氧化应激及肝脏Nrf2/HO-1通路的影响

目的探讨海藻玉壶汤中海藻不同品种与甘草加减应用对甲状腺肿大大鼠氧化应激及肝脏核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路的影响。方法随机分为空白组、模型组、阳性药优甲乐组(优甲乐组)、含羊栖菜的海藻玉壶汤全方组(羊栖菜全方组)、含海蒿子的海藻玉壶汤全方组(海蒿子全方组)、含羊栖菜的海藻玉壶汤去甘草组(羊栖菜去甘草组)、含海蒿子的海藻玉壶汤去甘草组(海蒿子去甘草组)、海藻玉壶汤去海藻组(全方去海藻组)、海藻玉壶汤去海藻甘草组(全方去海藻甘草组)。除空白组外其余各组均灌服丙硫氧嘧啶(PTU)复制甲状腺肿大模型,以优甲乐作为阳性对照药。检测各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_2O_2)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,测定肝组织Nrf2 mRNA及HO-1 mRNA的表达。结果与空白组比较,模型组血清MDA升高、Nrf2 mRNA表达降低(P0.01),海蒿子去甘草组血清ALT、肝组织HO-1 mRNA表达升高(P0.05,P0.01),海蒿子全方组血清MDA、肝组织HO-1 mRNA表达升高(P0.05,P0.01),羊栖菜去甘草组及羊栖菜全方组血清ALT、AST、MDA、H_2O_2升高,GSH-Px、Nrf2 mRNA表达降低(P0.05,P0.01);与海蒿子去甘草组比较,羊栖菜全方组血清AST升高、肝组织HO-1 mRNA表达降低(P0.05,P0.01),羊栖菜去甘草组血清H_2O_2升高、HO-1 mRNA表达降低(P0.05,P0.01);与海蒿子全方组比较,羊栖菜去甘草组血清ALT、AST、H_2O_2升高,HO-1 mRNA表达降低(P0.05,P0.01),羊栖菜全方组血清AST升高、HO-1 mRNA表达降低(P0.01)。结论不同品种海藻(海蒿子/羊栖菜)与甘草在海藻玉壶汤中加减应用,海蒿子全方组及海蒿子去甘草组在一定程度上可以保护肝脏组织免受过氧化物的损害,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路提高肝细胞抗氧化能力有关;而羊栖菜全方组及羊栖菜去甘草组肝功能受到一定影响,可能与氧化抗氧化系统平衡紊乱,Nrf2/HO-1通路激活障碍有关。     

芍药苷通过激活Nrf2/Keap1信号通路改善脓毒症急性肺损伤的研究

  目的  探讨芍药苷（paeoniflorin, PF）对脓毒症所致急性肺损伤的影响及其与转录因子NF-E2相关因子2（nuclear factor erythyroid 2-related factor 2, Nrf2）/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）信号通路的关系。  方法  采用盲肠结扎穿孔（CLP）术诱导建立脓毒症大鼠模型。将大鼠随机分成假手术组（Sham）、模型组（Model）、低剂量PF组（L-PF,50 mg/kg）、高剂量PF组（H-PF,150 mg/kg）及高剂量PF+Nrf2抑制剂组（H-PF+ML385,150 mg/kg PF+30 mg/kg ML385）,每组10只。采用改良的脓毒症严重程度评分标准对大鼠脓毒症严重程度进行评分;HE染色观察大鼠肺组织病理变化;黄嘌呤氧化酶法测定大鼠肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性;硫代巴比妥酸法测定大鼠肺组织丙二醛（MDA）含量;ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白介素（IL）-1β和IL-6水平;Western blot和qRT-PCR分别检测肺组织中Nrf2、Keap1、血红素氧合酶1（HO-1）蛋白和mRNA的表达水平。  结果  与Sham组比较,Model组大鼠出现严重的脓毒症;肺组织出现严重炎症浸润,出现大量巨噬细胞,肺间质肿大;肺组织中促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6及氧化指标MDA含量均上升（P<0.05）,而抗氧化指标SOD含量下降（P<0.05）;Nrf2及HO-1蛋白和mRNA表达均降低（P<0.05）,Keap1蛋白和mRNA表达增加（P<0.05）。与Model组比较,PF给药组大鼠脓毒症程度均降低,肺组织损伤均得到改善,肺组织中IL-1β、TNF-α、IL-6及MDA含量均下降（P<0.05）,SOD活性均增加（P<0.05）;Nrf2及HO-1蛋白和mRNA表达均增加（P<0.05）,Keap1蛋白和mRNA表达降低（P<0.05）。与H-PF组比较,Nrf2抑制剂ML385干预后可抑制PF对脓毒症大鼠上述指标的改善。  结论  PF通过激活Nrf2/Keap1信号通路,降低组织氧化应激与炎症水平,改善脓毒症所致的急性肺损伤。     

α-硫辛酸抑制高脂饮食对糖尿病大鼠心肌氧化应激的实验研究

目的观察α-硫辛酸(ALA)对高脂饮食饲养糖尿病大鼠心肌氧化应激的影响。方法 SD大鼠分为对照组(N组)、糖尿病组(D组)、高脂饮食组(H组)和α-硫辛酸组(L组),每组20只,后三组用小剂量链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。N组及D组以普通饲料喂养,其余二组以高脂饲料喂养,L组给予ALA治疗12周。12周后测血糖、血脂水平,用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸比色法及Western blot方法分别检测心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及核因子相关因子2(Nrf2)、血红素氧化酶-1(HO-1)表达情况。结果 (1)与N组比较,D组、H组及L组心肌SOD活性显著下降,组间比较差异有统计学意义(P<0.01),H组SOD活性较D组下降(P<0.01),L组SOD活性较H组升高,但低于D组,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);(2)与N组比较,D组、H组及L组心肌MDA水平明显升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01),H组MDA水平较D组升高(P<0.01),L组MDA水平较H组降低,但高于D组,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);(3)与N组比较,D组、H组及L组心肌Nrf2、HO-1表达增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.01),H组Nrf2、HO-1表达高于D组(P<0.01),L组Nrf2、HO-1表达较H组升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论ALA可显著抑制高脂饮食诱导糖尿病大鼠心肌氧化应激,对糖尿病心肌病具有保护作用。     

荔枝核皂苷对糖调节受损大鼠胰腺组织氧化应激的改善作用及其机制

目的：研究荔枝核皂苷（SL）对糖调节受损（IGR）大鼠氧化应激及核转录因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶1（HO-1）信号通路的作用,阐明其相关机制。方法：采用高脂饲料喂养制备IGR大鼠模型,随机分为模型组、二甲双胍组（0.20 g·kg^-1）、低剂量SL组（0.05 g·kg^-1）、中剂量SL组（0.10 g·kg^-1）和高剂量SL组（0.20 g·kg^-1）,同时设正常对照组,每组12只,连续给药6周。观察SL对实验大鼠糖脂代谢的影响,采用实时荧光定量（Real-time PCR）法检测大鼠胰腺组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和HO-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测大鼠胰腺组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达水平,采用SOD和MDA试剂盒检测大鼠胰腺组织中SOD活性和MDA水平。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠空腹血糖（FBG）和血脂水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平降低（P<0.01）,MDA水平和mRNA表达水平升高（P<0.01）,胞核和胞质中Nrf2蛋白表达水平和核转位率升高（P<0.01）,HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较,二甲双胍组和中、高剂量SL组大鼠FBG和血清甘油三酯（TG）水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平升高（P<0.05或P<0.01）,MDA水平和mRNA表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,胞质中Nrf2表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,胞核中Nrf2表达水平和核转位率升高（P<0.05或P<0.01）,HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。结论：SL具有改善糖脂代谢和增强抗氧化应激作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路、促进Nrf2核转位及增强下游抗氧化基因HO-1表达有关。     

虎杖苷对芥子气肺损伤的保护作用研究

目的 明确虎杖苷对芥子气所致肺损伤的改善作用,并初步探索其作用机制。方法 以雄性ICR小鼠为实验对象,在生存率实验中将小鼠随机分为6组（n=15）：对照组,芥子气（剂量40 mg/kg）组,虎杖苷低、中、高剂量(每天100、200、400 mg/kg)组以及阳性对照药（200 mg/kg N-乙酰半胱氨酸）组。在生存率以外的实验中,小鼠被随机分为4组（n=15）：对照组,芥子气（剂量30 mg/kg）组,虎杖苷中剂量(每天200 mg/kg)组以及阳性对照药（200 mg/kg N-乙酰半胱氨酸）组。皮下注射芥子气溶液（剂量40 mg/kg）建立小鼠芥子气肺损伤模型。虎杖苷处理组与阳性对照药组灌胃给药。生存率实验初步评价虎杖苷对芥子气致肺损伤的作用效果,确定虎杖苷最佳给药剂量;通过肺组织切片评价虎杖苷对芥子气致肺损伤的改善作用;通过ELISA法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）和过氧化氢等氧化应激指标以及白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症反应指标的变化;通过蛋白质免疫印迹实验考察沉默信息调节因子1（SIRT1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）和NAD（P）氢醌氧化还原酶1（NQO1）等氧化应激关键蛋白以及Toll样受体4（TLR4）、核转录因子-?B p65（NF-?B p65）等炎症关键蛋白的表达水平,初步探索虎杖苷改善芥子气致肺损伤的作用机制。结果 与芥子气组相比,虎杖苷中、高剂量组小鼠的生存率升高,其中虎杖苷中剂量组效果更显著（P<0.01）。进一步研究发现虎杖苷中剂量干预可以：升高染毒小鼠肺组织中SOD、GSH水平;降低染毒小鼠肺组织中MPO、MDA和过氧化氢的含量以及IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症因子的水平（P<0.05或P<0.01）;提升芥子气暴露小鼠肺组织中SIRT1的表达,促进Nrf2的核转移,提升HO-1和NQO1的表达;降低肺组织中TLR4、NF-?B p65总蛋白及其磷酸化形式的蛋白表达,各种指标组间差异均显著（P<0.05或P<0.01）。结论 虎杖苷可能是通过调控SIRT1/Nrf2和TLR4/NF-?B通路,抑制芥子气诱导的氧化应激和炎症反应,改善芥子气导致的小鼠肺损伤。     

基于Nrf2/ARE通路研究银杏叶滴剂对口腔溃疡大鼠的作用机制

目的:探讨银杏叶滴剂对口腔溃疡大鼠的作用及对抗氧化通路核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-2 related factor,Nrf2)/抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)通路的调控作用。方法:取50只雄性SD大鼠,其中40只采用化学灼烧法建立口腔溃疡模型,随机分为模型组、银杏叶滴剂低剂量(25 mg·kg^-1)组、银杏叶滴剂中剂量(50 mg·kg^-1)组、银杏叶滴剂高剂量(100 mg·kg^-1)组,其余10只为对照组,连续给药10 d。比较给药第0、1、3、7天时各组大鼠溃疡面积;给药10 d后处死大鼠,检测溃疡组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,TH、Nrf2、HO-1蛋白表达及TH mRNA、Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA水平。结果:与模型组比较,干预第3、7天银杏叶滴剂低、中、高剂量溃疡面积均明显减小(P<0.05);银杏叶滴剂低、中、高剂量组溃疡组织中SOD、GSH-Px水平明显升高、MDA水平明显降低(P<0.05),TH、Nrf2、HO-1蛋白表达明显升高(P<0.05),TH mRNA、Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA水平明显升高(P<0.05)。结论:银杏叶滴剂可有效促进大鼠口腔溃疡愈合,可能与激活溃疡组织内Nrf2/ARE通路改善氧化应激有关。     

EGCG对氧糖剥夺/再灌注神经元氧化应激及Nrf2/HO-1通路的影响

目的：研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对氧糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)导致的神经元氧化应激损伤及核因子E2-相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路的影响。方法：取原代培养的大鼠大脑皮层神经元,建立 OGD/R损伤细胞模型。于OGD/R前加入不同浓度(12.5,25.0,50.0,100.0 μmol/L)EGCG,再灌注后,测定细胞活 力、活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,检测HO-1 mRNA,HO-1蛋白及细胞核Nrf2蛋白表达水平。结果：OGD/R导致神经元细胞活力降低,ROS水平和MDA含量升 高,SOD和GSH-Px活性降低,HO-1 mRNA,HO-1蛋白及细胞核Nrf2蛋白表达增多(P<0.01)。EGCG能明显促进OGD/R 神经元存活,降低ROS水平和MDA含量,提高SOD和GSH-Px活性,上调HO-1 mRNA,HO-1蛋白及细胞核Nrf2蛋白表 达水平(P<0.01)。结论：EGCG能减轻OGD/R诱导的神经元氧化应激损伤,可能与激活Nrf2/HO-1信号通路,增强神 经元的抗氧化能力有关。     

虎杖苷对芥子气肺损伤的保护作用研究

目的 明确虎杖苷对芥子气所致肺损伤的改善作用,并初步探索其作用机制。方法 以雄性ICR小鼠为实验对象,在生存率实验中将小鼠随机分为6组（n=15）：对照组,芥子气（剂量40 mg/kg）组,虎杖苷低、中、高剂量(每天100、200、400 mg/kg)组以及阳性对照药（200 mg/kg N-乙酰半胱氨酸）组。在生存率以外的实验中,小鼠被随机分为4组（n=15）：对照组,芥子气（剂量30 mg/kg）组,虎杖苷中剂量(每天200 mg/kg)组以及阳性对照药（200 mg/kg N-乙酰半胱氨酸）组。皮下注射芥子气溶液（剂量40 mg/kg）建立小鼠芥子气肺损伤模型。虎杖苷处理组与阳性对照药组灌胃给药。生存率实验初步评价虎杖苷对芥子气致肺损伤的作用效果,确定虎杖苷最佳给药剂量;通过肺组织切片评价虎杖苷对芥子气致肺损伤的改善作用;通过ELISA法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）和过氧化氢等氧化应激指标以及白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症反应指标的变化;通过蛋白质免疫印迹实验考察沉默信息调节因子1（SIRT1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）和NAD（P）氢醌氧化还原酶1（NQO1）等氧化应激关键蛋白以及Toll样受体4（TLR4）、核转录因子-?B p65（NF-?B p65）等炎症关键蛋白的表达水平,初步探索虎杖苷改善芥子气致肺损伤的作用机制。结果 与芥子气组相比,虎杖苷中、高剂量组小鼠的生存率升高,其中虎杖苷中剂量组效果更显著（P<0.01）。进一步研究发现虎杖苷中剂量干预可以：升高染毒小鼠肺组织中SOD、GSH水平;降低染毒小鼠肺组织中MPO、MDA和过氧化氢的含量以及IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症因子的水平（P<0.05或P<0.01）;提升芥子气暴露小鼠肺组织中SIRT1的表达,促进Nrf2的核转移,提升HO-1和NQO1的表达;降低肺组织中TLR4、NF-?B p65总蛋白及其磷酸化形式的蛋白表达,各种指标组间差异均显著（P<0.05或P<0.01）。结论 虎杖苷可能是通过调控SIRT1/Nrf2和TLR4/NF-?B通路,抑制芥子气诱导的氧化应激和炎症反应,改善芥子气导致的小鼠肺损伤。     

肝爽颗粒通过Nrf2/HO-1信号通路缓解慢性肝损伤作用及机制研究

[目的]探讨肝爽颗粒(GSG)对四氯化碳(CCL4)所导致的慢性肝损伤(CLI)模型小鼠的保护作用及机制。[方法]将50只雄性BALB/c小鼠平均分为正常组、模型组以及肝爽颗粒低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射20%CCL4橄榄油溶液(2 mL/kg),每周2次,持续6周,成功建立CLI模型小鼠后,正常组与模型组每日灌胃生理盐水,GSG各给药组每日分别灌胃GSG 1、2、4 g/kg,连续给药4周。收集各组小鼠的血清和肝脏,检测血清转氨酶水平并计算肝指数,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理学特征,研究GSG对CLI模型小鼠的治疗作用。此外检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量探讨GSG对CLI小鼠氧化损伤的影响。荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)、醌氧化还原酶1(NQO1)基因表达,初步探究GSG缓解CLI的作用机制。[结果]与正常组比较,模型组小鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平显著升高(P<0.05或P<0.01);HE染色结果显示肝细胞广泛水肿、部分肝细胞坏死;同时,肝组织中MDA水平明显上升(P<0.01),SOD、GSH-Px活性显著下降(P<0.01);肝组织中Nrf2、HO-1、GCLC、NQO1的基因表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,GSG中、高剂量组能显著降低CLI模型小鼠血清AST和ALT的水平(P<0.05或P<0.01);GSG低、中、高剂量组能降低肝组织中MDA水平,同时升高肝组织中SOD、GSH-Px活性及Nrf2、HO-1、GCLC、NQO1基因表达(P<0.05或P<0.01)。[结论]GSG能缓解CCL4诱导的CLI模型小鼠肝功能受损,其潜在的机制可能是通过激活Nrf2/HO-1信号通路抑制肝细胞氧化应激。     

萎胃汤对大鼠血清SOD活性、MDA、GAS的影响研究

目的:通过动物实验研究探讨萎胃汤的作用机制。方法:取SPF级SD大鼠70只,经病理组织学检查判定慢性萎缩性胃炎(CAG)动物模型复制成功后,将模型动物按体重随机均分为模型组、胃复春组(0.54g/kg)、萎胃汤高(20.8 g生药/kg)、中(10.4 g生药/kg)、低(5.2 g生药/kg)剂量组(分别为4倍、2倍、1倍临床等效剂量)。按照测试盒的要求测定胃酸、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)、血清胃泌素(GAS)含量。结果:治疗12周后,各给药组大鼠胃液PH、血清血清SOD活性、MDA、GAS含量等方面均较模型组显著改善(P<0.01),其中萎胃汤高、中剂量组较胃复春组改善程度具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:萎胃汤能改善CAG模型大鼠的生存质量、降低胃液PH值(P<0.01),升高血清GAS含量(P<0.01)、升高SOD活性(P<0.01)、降低MDA含量(P<0.01),且萎胃汤高、中剂量组较对照药胃复春为好。