碘对甲状腺细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bak表达的影响

碘是制造甲状腺激素的主要原料,是调节甲状腺生长与分化功能的重要因子。晚近的研究表明,碘与多种甲状腺疾病的发生、发展与转归密切相关,并在甲状腺细胞的凋亡过程中承担重要角色［１３］。本研究采用细胞培养方法及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹技术,研究碘对甲状腺细胞凋亡相关蛋白表达的影响,旨在探讨碘在甲状腺稳态和甲状腺疾病发病机制中的作用和地位。一、材料与方法１－甲状腺细胞培养：甲状腺标本取材于良性孤立性甲状腺腺瘤旁正常组织,经胶原酶和双酶消化,于含５％胎牛血清的改良ＨａｍＦ１２培养液中传代培养。２－碘刺激试验：…     

低碘和高碘对大鼠甲状腺细胞凋亡的影响

目的 研究低碘和高碘对大鼠甲状腺细胞凋亡的影响。方法 利用病区的低碘粮食喂养大鼠，同时饮用不同质量浓度的加碘水，复制低碘和高碘动物模型，于20周后在光、电镜下观察甲状腺形态结构改变，原位末端标记方法对甲状腺细胞凋亡进行检测。结果 与对照组相比，低碘和高碘组甲状腺凋亡细胞数明显增多。结论 低碘和高碘均诱发大鼠甲状腺细胞凋亡，进而调节甲状腺的形态结构和功能。其中以低碘组作用明显，提示细胞凋亡过度是引起低碘和高碘性甲状腺功能低下的重要原因。     

细胞凋亡与甲状腺

已证实，正常和病理甲状腺组织中存在细胞凋亡现象，凋亡相关蛋白Ｂｃｌ－２家族及Ｆａｓ的表达也呈现出相应的变化，而促甲状腺碘和细胞因子等多种因素对甲状腺细胞的凋亡具有调节作用，表明细胞凋亡参与甲状腺的生理病理过程。     

细胞凋亡与甲状腺

已证实 ,正常和病理甲状腺组织中存在细胞凋亡现象 ,凋亡相关蛋白Bcl 2家族及Fas的表达也呈现出相应的变化 ,而促甲状腺激素、碘和细胞因子等多种因素对甲状腺细胞的凋亡具有调节作用 ,表明细胞凋亡参与甲状腺的生理病理过程。     

细胞凋亡与自身免疫性甲状腺疾病

近来研究发现,某些自身免疫性甲状腺疾病如桥本甲状腺炎及甲状腺癌中细胞凋亡的数量明显增加.甲状腺细胞对凋亡相关基因Fas、FasL、Bcl-2的表达程度与细胞凋亡密切相关.目前认为,细胞凋亡数量增加的自身免疫性甲状腺疾病组织中Fas上调表达,同时Bcl-2的表达下调.本文着重介绍细胞凋亡的生物学特性、基因调控及自身免疫性甲状腺疾病中细胞凋亡的研究进展.     

低碘和高碘对大鼠甲状腺细胞凋亡的影响

目的观察低、高碘对大鼠甲状腺细胞凋亡的影响,探讨细胞凋亡在低、高碘甲状腺肿大(甲肿)形成过程中的作用.方法选用断乳1个月,体重为80～100 g Wistar大鼠,按性别和体重随机分为3组对照组,低碘组,高碘组.3组动物均食用由重度缺碘地区的粮食配制的饲料.低碘组动物饮用去离子水,对照组及高碘组动物分别饮用含碘化钾(KI)为0 3和30 mg/L的去离子水.大鼠在喂养20周时,20%乌拉坦腹腔麻醉后分离出甲状腺.光、电镜下观察大鼠甲状腺形态结构的改变.TUNEL法检测甲状腺细胞凋亡指数.结果光镜下对照组甲状腺滤泡呈中等大小,上皮细胞多呈立方形,滤泡腔内含丰富的胶质;低碘组甲状腺滤泡明显变小,数量增多,上皮细胞增生肥大,多呈柱状,滤泡内胶质明显减少;高碘组甲状腺滤泡多明显增大,上皮细胞扁平状,滤泡腔内充满丰富浓染的胶质.电镜下低碘和高碘组甲状腺凋亡细胞数明显增多,凋亡细胞体积缩小,与邻近细胞脱离;胞浆浓缩,内质网、线粒体肿胀,甚至呈空泡样变;核变小,变圆,染色质浓缩、边集,核碎裂改变.TUNEL法检测结果表明,低碘组和高碘组甲状腺细胞凋亡指数与对照组相比明显增高,但低碘组增高更为明显.结论光、电镜结果证实功物模型已复制成功.通过透射电镜观察及TUNEL法对细胞凋亡检测,结果表明低碘和高碘均促进甲状腺细胞凋亡,且低碘的作用更为明显.以往已知低碘时甲状腺激素合成释放减少,反馈性引起垂体释放TSH增多,TSH可刺激甲状腺细胞增殖肥大,导致甲状腺肿大.本实验结果提示在低碘甲肿形成过程中,通过细胞增殖和凋亡的共同作用调节甲状腺细胞数,由于细胞增殖数量超过细胞凋亡数量,所以在形态学上低碘甲肿表现为增殖性甲肿.低碘时细胞凋亡指数增高,可起到减少甲状腺细胞数量,维持正常甲状腺形态的作用,但长期严重缺碘产生的过度凋亡势必金造成甲状腺组织损伤,成为导致甲状腺功能低下的一个重要原因.高碘甲肿大鼠甲状腺细胞凋亡指数明显增高,其作用机制可能是过量碘摄入使离子碘的活化产物I2生成增多,后者通过过氧化作用促进细胞凋亡,也可能是由于早期甲状腺功能增强,使具有抑制甲状腺细胞凋亡作用的TSH分泌减少,从而导致了甲状腺细胞凋亡增多.以上关于凋亡的调节机制尚需要我们进一步验证.综上所述,无论低碘、高碘都可以通过促进细胞凋亡途径损伤甲状腺细胞,进而影响甲状腺的功能.     

高碘对豚鼠脑和甲状腺细胞凋亡影响的实验研究

目的 研究高碘对豚鼠和甲状腺细胞凋亡的影响。方法 用高碘水喂养豚鼠复制出高碘甲状腺肿模型,采用光镜及透射电镜形态学观察、ＤＮＡ凝胶电泳及流式细胞术,分两期观察不同浓度高磺水对大脑皮质、海马和甲状腺细胞凋亡的影响。结果 （１）高碘可以诱发豚鼠大脑皮质、海马和甲状腺细胞凋亡,呈现凋亡形态学及生化特征性改变。（２）高碘所诱发的大脑皮质、海马和甲状腺组织和细胞凋亡率高低与摄碘量和碘作用时间的长短有关。结论     

microRNA与甲状腺肿瘤的研究进展

microRNA( miRNA)是一种长度约22 nt的非编码单链小分子RNA,通过与mRNA互补结合,降解靶mRNA或阻止其翻译.miRNA作为一种调控因子,在细胞的分化、增殖和凋亡中起重要作用,其突变、缺失或表达水平的异常与人类肿瘤发生、发展密切相关.甲状腺肿瘤起源于甲状腺滤泡上皮细胞或甲状腺滤泡旁细胞,是内分泌系...     

自身免疫性甲状腺疾病与细胞凋亡

自身免疫性甲状腺疾病细胞凋亡存在异常,桥本甲状腺炎时,甲状腺细胞Fas表达增强,诱导细胞凋亡,造成甲状腺细胞的损伤。Graves病时因Fas表达减弱,bcl-2表达增经而阻止了凋亡生,从而造成甲状腺滤泡上皮细胞增生肥大,一些物质可以上调或者下调甲状腺细胞Fas表达,因此,可能为自身免疫性甲状腺疾病开拓一条新的治疗途径。     

Fas／FasL途径在Graves病发病机制中的作用

Graves病(GD)存在凋亡信号分子Fas和Fas配体(FasL)等的异常表达。凋亡相关分子bcl-2和白细胞介素、促甲状腺素、甲状腺刺激性抗体、活性氧等诸多因素共同影响甲状腺内Fas途径的凋亡反应。凋亡异常与甲状腺细胞增生、免疫细胞浸润及最终出现GD特征性的毒性甲状腺肿等密切相关，在GD的发病中具有重要作用。     

抗甲状腺药物免疫抑制作用的分子机制

已证实 ,抗甲状腺药物具有免疫抑制作用。其作用的分子机制为调控甲状腺细胞FasL、Ⅱ型主要组织相容性复合体、细胞间粘附分子 1等的表达与修饰 ,进而通过诱导甲状腺内浸润T淋巴细胞凋亡、抑制甲状腺自身抗原呈递等途径 ,间接地发挥免疫抑制作用     

抗甲状腺药物免疫抑制作用的分子机制

已证实，抗甲状腺药物具有免疫抑制作用。其作用的分子机制为调控甲状腺细胞FasL、II型主要组织相容性复合体、细胞间粘附分子1等的表达与修饰，进而通过诱导甲状腺内浸润T淋巴细胞凋亡、抑制甲状腺自身抗原呈递等途径，间接地发挥免疫抑制作用。     

表达MHC Ⅱ类分子的转基因鼠甲状腺细胞对自身T细胞的影响

从转基因小鼠分离表达主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类分子的甲状腺细胞与小鼠自身T细胞共同培养,结果甲状腺细胞未能刺激T细胞的增殖和活化,相反,促进了自身CD4+T细胞凋亡.     

新的甲状腺自身抗原钠／碘同向转运体与甲状腺疾病

甲状腺钠／磺同向转运体（ＮＩＳ）是主要存在于甲状腺细胞的一种糖化膜蛋白,它在甲状腺激素合成中起重要作用。目前人ＮＩＳ（ｈＮＩＳ）与鼠ＮＩＳ（ｒＮＩＳ）的分子结构及其ｃＤＮＡ序列已经明确,并发现ＮＩＳ异常与许多甲状腺疾病有关,近年更发现ＮＩＳ是一种新的甲状腺自身抗原,与自身免疫性甲状腺病的发生密切相关。对ＮＩＳ研究有着诱人的临床应用前景。     

Caspase-3、Bcl-2在甲状腺功能减退症大鼠心肌组织中的表达及与甲状腺功能关系的研究

目的观察甲状腺功能减退症大鼠心肌损伤时Caspase-3和Bcl-2在心肌细胞中的表达,探讨甲减心肌损伤的发生机制以及与甲状腺功能的关系。方法用丙基硫氧嘧啶(PTU)连续灌胃制作甲状腺功能减退症大鼠模型。分别动态观察对照组、甲减组和干预组(给予左甲状腺素钠和停止给予PTU进行干预治疗)大鼠的心肌病理改变及损伤情况,并同时应用免疫组化技术及末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法检测Caspase-3和Bcl-2在心肌细胞中的表达及心肌细胞凋亡情况。结果甲减大鼠出现心肌细胞凋亡,并且随着病程进展凋亡逐渐加重,并与甲状腺功能密切相关。干预组心肌细胞凋亡均较甲减组减轻。结论甲减时心肌损伤与心肌细胞凋亡密切相关,即心肌细胞凋亡可引起甲减心肌损伤,甲状腺激素参与调控细胞凋亡。     

TF-1细胞凋亡相关基因19与甲状腺肿瘤之间关系的初步探讨

目的 探讨TF-1细胞凋亡相关基因19(TFARl9)在甲状腺腺瘤(TA)和甲状腺乳头状癌(PTC)中是否有表达及其细胞定位。方法 6例TA和6例PTC患者,经手术得到甲状腺肿瘤组织标本并获病理诊断,以6例TA患者的瘤周正常甲状腺组织作为对照。TFAR19表达的检测采用免疫组化染色。结果 TFAR19在正常甲状腺组织中几乎未见表达;在TA组的甲状腺肿瘤组织中呈强阳性表达,而在PTC组中呈阴性表达。结论 TFAR19凋亡通路在TA中被激活,而在PTC中则受到抑制,提示细胞凋亡与增殖之间的平衡失调可能在PTC的发病机制中具有重要作用。     

Graves病患者甲状腺细胞凋亡的初步研究

目的　研究Graves病 (GD)甲状腺细胞凋亡和凋亡相关蛋白Fas、可溶性Fas(sFas)及Fas配基 (Fas L)的表达特征 ,探讨Fas介导的细胞凋亡与GD发病机制之间的内在联系。方法甲状腺组织取自 7例GD手术患者和 3例意外死亡健康个体 ,采用原代甲状腺细胞 (TEC)培养技术、流式细胞术、ELISA及半定量RT PCR法检测TEC凋亡率及Fas、sFas和Fas L的表达情况。结果(1)GDTEC凋亡率为 (3.42± 0 .81) %,明显高于正常对照 (P <0 .0 1)。 (2 )GDTECFas表达率为 (8.3± 1.7) %,与正常对照相比差异无显著性。 (3)GDTEC培养上清液中sFas含量明显高于正常对照(P <0 .0 1)。 (4 )正常及GDTEC均表达Fas及sFasmRNA ,而Fas LmRNA仅在GDTEC表达。与正常对照相比 ,GDTECFasmRNA差异无显著性 ,sFasmRNA含量则明显升高 (P <0 .0 1)。结论GD患者甲状腺细胞存在细胞凋亡和Fas系统的异常表达 ,提示Fas介导的细胞凋亡参与GD的发病过程 ,sFas产生增加可能与甲状腺细胞增殖有关。     

碘对大鼠甲状腺细胞凋亡及bax、bcl-2基因mRNA表达的影响

目的探讨碘对甲状腺细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法Wistar大鼠分为6组,即低碘组(LI)、正常碘组(NI)、5倍碘组(5HI)、10倍碘组(10HI)、50倍碘组(50HI)、100倍碘组(100HI),用含不同碘的自来水喂养,6个月后取甲状腺。末端标记法(TUNEL)进行原位细胞凋亡检测,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对甲状腺细胞凋亡相关基因bax、bcl-2进行半定量测定。结果原位细胞凋亡检测结果表明,LI组细胞凋亡明显,而NI组与其他组均未见凋亡细胞。baxmRNA表达水平以bax/β-actin光密度比表示,LI组为1.096±0.089,NI组为0.647±0.062,5HI组为0.638±0.191,10HI组为0.676±0.081,50HI组为0.644±0.092,100HI组为0.751±0.152;同样方法表示,bcl-2mRNA表达水平分别为0.273±0.185、0.172±0.115、0.236±0.107、0.235±0.071、0.267±0.065、0.313±0.062。结果表明,在LI组大鼠甲状腺bax、bcl-2mRNA表达水平均明显增加(P<0.05);在其他组,bcl-2mRNA表达水平随给碘量增加而增加,而bax无明显变化。但bax/bcl-2比值随摄入碘量增加而呈降低趋势。结论碘缺乏易诱发大鼠甲状腺细胞凋亡;而碘过量不易引起细胞凋亡,甲状腺细胞对碘过量有一定耐受能力。bcl-2家族参与甲状腺细胞凋亡过程。     

过量碘对原代培养的猪甲状腺细胞凋亡的诱导作用

目的观察过量碘对原代培养的猪甲状腺细胞凋亡的诱导作用,并对其机制作初步探讨。方法取健康的猪甲状腺细胞培养24 h后,加入不同浓度的碘化钾,观察细胞的形态改变;琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术分析DNA的降解;采用MDA法测定细胞膜的脂质过氧化程度。结果加入碘化钾后6 h左右,可见细胞凋亡,48 h左右达到高峰;琼脂糖凝胶电泳出现典型的梯状带;流式细胞术可见亚二倍体高峰,细胞凋亡率随碘化钾浓度的升高而升高(P<0.05);脂质过氧化产物丙二醛含量随碘化钾浓度的升高而升高(P<0.05)。结论过量碘化钾诱导原代培养的猪甲状腺细胞凋亡,呈剂量依赖关系,可能通过活性氧机制启动凋亡。     

PI3K/Akt信号转导通路与甲状腺结节

近年来研究发现,磷脂酰肌醇3激酶(PDK)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路在细胞的增殖、分化、生存和凋亡过程中起重要调节作用.结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤、甲状腺癌及桥本甲状腺炎病变中存在着PI3K/Akt信号转导通路的过度激活.PI3K/Akt信号转导通路的活化使甲状腺细胞增殖指数和生长指数明显升高,刺激甲状腺滤泡持续生长,促进甲状腺结节的发生、发展.研究此通路中相关分子的表达,对探索甲状腺结节的病因、发病机制和防治策略具有重要意义.