| 温郁金凝集素蛋白重组及对结肠癌HCT-116细胞凋亡、迁移和侵袭的影响 |
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| 引用本文： | 周丹,张丽萍,丰梦熠,朱强,任仙樱,吴志刚,姜程曦.温郁金凝集素蛋白重组及对结肠癌HCT-116细胞凋亡、迁移和侵袭的影响[J].现代药物与临床,2023,46(11):2366-2373. |
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| 作者姓名： | 周丹 张丽萍 丰梦熠 朱强 任仙樱 吴志刚 姜程曦 |
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| 作者单位： | 温州医科大学 药学院, 浙江 温州 325035;温州大学 生命科学研究院, 浙江 温州 325035;安徽济人药业有限公司, 安徽 亳州 236800;温州莪金医药有限公司, 浙江 乐清 325600 |
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| 基金项目： | 安徽济人药业有限公司课题（KJHX2009）；合肥未来药物开发有限公司横向课题（KJHX2008） |
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| 摘 要： | 目的 获取温郁金凝集素（CWL）重组蛋白，并研究其对结肠癌细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 根据CWL基因全长编码序列，采用大肠杆菌原核表达系统重组表达及纯化CWL；观察CWL对兔红细胞的凝血作用；CCK-8法评价CWL（10、20、40、80 μg·mL-1）对结肠癌HCT-116细胞的毒性；流式细胞仪检测CWL（40、80 μg·mL-1）对HCT-116细胞凋亡的影响；划痕实验检测细胞迁移能力；Transwell小室法检测细胞侵袭能力；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）实验分析Caspase-3、Caspase-9、BAX、PARP mRNA表达水平； Western blotting检测cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、BAX、cleaved-PARP蛋白表达水平。结果 重组纯化获得相对分子质量为3×104的CWL；高质量浓度的CWL导致红细胞出现明显的凝血情况，随着CWL质量浓度的降低，其凝血活性逐渐下降，直至消失。与对照组比较，CWL对HCT-116细胞活性具有显著抑制作用（P＜0.001）；40、80 μg·mL-1 CWL可显著降低HCT-116细胞的迁移和侵袭能力（P＜0.001），显著升高HCT-116细胞凋亡率（P＜0.01、0.001）；显著升高Caspase-3、Caspase-9、BAX、PARP的mRNA表达水平（P＜0.05、0.01、0.001），同时显著增加cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、BAX、cleaved-PARP蛋白表达水平（P＜0.05、0.01）。结论 CWL可通过线粒体凋亡途径促进HCT-116细胞凋亡并抑制其迁移和侵袭，从而发挥抗肿瘤作用。
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| 关 键 词： | 温郁金凝集素 HCT-116细胞 凋亡 迁移 侵袭 线粒体凋亡 |
| 收稿时间： | 2023/5/29 0:00:00 |
Protein recombination of Curcuma wenyujin lectin and its effects on apoptosis, migration and invasion of HCT-116 cells |
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| ZHOU Dan,ZHANG Liping,FENG Mengyi,ZHU Qiang,REN Xianying,WU Zhigang,JIANG Chengxi.Protein recombination of Curcuma wenyujin lectin and its effects on apoptosis, migration and invasion of HCT-116 cells[J].Drugs & Clinic,2023,46(11):2366-2373. |
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| Authors: | ZHOU Dan ZHANG Liping FENG Mengyi ZHU Qiang REN Xianying WU Zhigang JIANG Chengxi |
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| Affiliation: | School of Pharmacy, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325035, China;Institute of Life Sciences, Wenzhou University, Wenzhou 325035, China;Anhui Jiren Pharmaceutical Co., Ltd., Bozhou 236800, China;Wenzhou Ejin Pharmaceutical Co., Ltd., Yueqing 325600, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Curcuma wenyujin lectin HCT-116 cells apoptosis migration invasion mitochondrial apoptosis |
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