| 蛋白质工程改造脂肪酶对映选择性的研究进展 |
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| 引用本文： | 王佳佩,李雅琴,王晓帆,黎俊波.蛋白质工程改造脂肪酶对映选择性的研究进展[J].武汉工程大学学报,2021,43(2):119-126. |
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| 作者姓名： | 王佳佩 李雅琴 王晓帆 黎俊波 |
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| 作者单位： | 华中科技大学生命科学与技术学院，分子生物物理教育部重点实验室（华中科技大学），湖北 武汉 430074 |
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| 摘 要： | 脂肪酶已被广泛应用于手性化合物拆分，但天然脂肪酶催化效率低、对非天然底物的选择性较差。为满足工业应用需求，开发具有高效对映体选择性的脂肪酶具有十分重要的意义；当前通过蛋白质工程改造获取高效脂肪酶已成为主流策略。鉴于脂肪酶催化受化学反应的环境影响较大，系统分析了脂肪酶与外消旋底物作用的关键区域（酰基结合口袋、疏水腔、亲水腔和氧阴离子洞）特性，重点综述了近年外消旋羧酸和外消旋醇拆分反应中影响脂肪酶对映选择性的重要突变位点相关研究进展。相比于传统从自然界中筛选具有特定选择性脂肪酶资源方法，蛋白质工程，特别是计算机辅助的理性设计，能大幅缩短脂肪酶进化历程，且能使其朝着预设方向进化。可以预期，随着运用蛋白质工程改造脂肪酶对映选择性研究的进一步深入发展，将可实现特定外消旋化合物的酶法高效手性拆分，也可为定向开发具特殊活性的生物催化剂提供新的研究思路。
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| 关 键 词： | 脂肪酶 对映选择性 催化裂缝 关键突变位点 外消旋底物 拆分 蛋白质工程 |
Synthesis and Properties of Fluorescent Probes with High Sensitivity to Cyanide Ions |
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| Authors: | WANG Jiapei LI Yaqin WANG Xiaofan LI Junbo |
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| Affiliation: | School of Life Science and Technology， Huazhong University of Science and Technology；Key Laboratory of Molecular Bio-physics （Huazhong University of Science and Technology）， Wuhan 430074， China |
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| Abstract: | Sodium cyanide and potassium cyanide are commonly used and highly toxic chemicals. It is of great significance to develop a low-cost and rapid method for the detection of CN- in industrial waste water. In this article， we used indole salt as the acceptor and the triphenylamine as the donor， both parts were conjugated by carbon-carbon double bond to obtain the probe 2-［4-（diphenylamino）styryl］-1，3，3-trimethyl-3H-indol-1-ium iodide. Fortunately， after the addition of CN-， the color of solution （Vethanol∶Vwater = 9∶1， 10-5 mol/L） is immediately changed from pink to colorless， while the fluorescence of solution is also changed from weak （Φf= 0.07） to strong blue fluorescence（Φf= 0.20）. At the same time， other common anions such as F-， Cl-， Br-， I-， BF4-， ClO4-， NO3-， do not interfere with the detection of CN-. The calculated detection limit is as low as 0.067 μmol/L， far below the World Health Organization’s highest standard for CN- content in drinking water （1.9 μmol/L）. |
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| Keywords: | probe CN- fluorescence color change indole |
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