| 重组亲环蛋白A的可溶性表达 |
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| 引用本文： | 闫啸,徐立仁,关怡新,姚善泾.重组亲环蛋白A的可溶性表达[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2010,36(4):363-369. |
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| 作者姓名： | 闫啸 徐立仁 关怡新 姚善泾 |
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| 作者单位： | 浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 为获得高表达量的可溶亲环蛋白A(cyclophilin A,CypA),对重组CypA质粒表达和工程菌的培养过程进行研究.首先将pRSET-CypA质粒转入EscherichiacoliBL21菌株,获得表达CypA的重组工程菌;然后以2×YT为基本培养基,对培养基组成包括碳源、氮源和氨苄青霉素浓度进行优化,并考察接种量和诱导条件(诱导剂浓度、诱导时机、诱导后培养时间)等对目标蛋白表达量的影响.结果表明:通过控制培养温度和转速可大大减少CypA包涵体的量;以甘露醇为碳源能显著提高目标蛋白的表达量;优化的培养基组成为蛋白胨16 g?L-1,酵母提取物10 g?L-1,NaCl 5 g?L-1,甘露醇10 g?L-1,Amp50 mg?L-1;在对数生长期中期OD600为1.3时加入1 mmol?L-1IPTG诱导,然后在30℃、180 r?min-1条件下继续培养9 h收获菌体;优化后目标蛋白CypA产量为66.7 mg?L-1发酵液,与优化前相比提高了76.6%.
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| 关 键 词： | 亲环蛋白A 可溶表达 培养优化 |
Soluble expression of recombinant cyclophilin A in Escherichia coli |
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| YAN Xiao,XU Li-ren,GUAN Yi-xin,YAO Shan-jing.Soluble expression of recombinant cyclophilin A in Escherichia coli[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2010,36(4):363-369. |
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| Authors: | YAN Xiao XU Li-ren GUAN Yi-xin YAO Shan-jing |
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