| MINDY2过表达慢病毒质粒的构建及其对肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 张路瑶,李泽艳,王晓旋,石兴云,罗婉媜,宋良鹏,孙玉玲,李得意,马雪艳.MINDY2过表达慢病毒质粒的构建及其对肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响[J].现代肿瘤医学,2023,0(7):1187-1194. |
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| 作者姓名： | 张路瑶 李泽艳 王晓旋 石兴云 罗婉媜 宋良鹏 孙玉玲 李得意 马雪艳 |
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| 作者单位： | 大理大学基础医学院，云南 大理 671000 |
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| 基金项目： | National Natural Science Foundation of China（No.82160504）;国家自然科学基金（编号:82160504）；云南省科技厅科技计划项目（编号:202101AU070136）；大学生创新创业训练计划项目（编号:S201110679014） |
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| 摘 要： | 目的:构建能表达MINDY2的慢病毒质粒，并获取稳定过表达MINDY2的A549细胞株，探讨过表达MINDY2对肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法:采用同源重组法构建pLVX-Flag-MINDY2过表达质粒，并通过菌落PCR和测序对重组质粒进行鉴定；在HEK293T细胞中瞬时转染pLVX-Flag-MINDY2质粒，通过Western blot实验检测Flag-MINDY2融合蛋白的表达；重组慢病毒载体包装HEK293T细胞，获取病毒上清液感染A549细胞，嘌呤霉素筛选后利用Western blot实验检测Flag-MINDY2融合蛋白的表达；CCK8实验、Transwell和划痕实验检测过表达MINDY2对A549细胞增殖和迁移能力的影响；流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化。结果:测序结果证明成功构建了MINDY2过表达慢病毒载体；在HEK293T细胞中瞬时转染MINDY2重组质粒，能检测到Flag-MINDY2融合蛋白的表达；Western blot结果显示MINDY2在A549细胞中稳定过表达；CCK8实验表明过表达MINDY2能够抑制A549细胞的增殖；流式细胞术表明...
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| 关 键 词： | MINDY2 A549细胞 增殖 凋亡 细胞周期 迁移 |
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